최근 영국의 암양 복제 성공 발표에 이미 미국서도 두마리의 원숭이를 복제해 냈다고 발표해 전 세계에 큰 파문을 일으키고 있다.유전자 조작에 따른 포유동물의 복제 성공은 인간복제도 머지않았음을 보여준 것이다. 이에 클린턴은 인간복제 연구에 대한 정부지원을 중단하고 과학자들에게 이 분야 연구를 중단할 것을 당부했으며 우리나라 각 환경ㆍ종교단체도 "복제실험은 인류의 재앙"이라고 규정하고 반대에 나섰다.
The aim of this study was to investigate the effect of parity and postpartum day on the behavior of nursing sows and their suckling piglets. Total 36 Landrace or Yorkshire sows(range of parity: 1 to 8) and their litters(range of litter size: 11 to 13 piglets) were assigned with sow's parity($1{\sim}2,\;3{\sim}4$ and 5 or more) and sow's postpartum days(day 1, 7, 14 and 21). The sows were housed in farrowing crates($0.6{\times}2.1m$) located in pens($2.4{\times}1.8m$) with totally perforated flooring. The sows and piglets were conventionally managed. The sows and their piglets behaviors were recorded during the 24 hour period at 1, 7, 14 and 21 days of postpartum. The obtained results from this study were as follows; 1. All the nursing sows in both group made attempts for lateral tying more than for other behaviors for whole days. The order of behavioral frequency at 1 and 3 weeks postpartum according the days of postpartum of sows was lateral tying, ventral lying, standing, sitting, feeding and drinking. The nursing sows at day 1 postpartum spent more time on sitting and standing than the sows at day 7 or more postpartum. 2. The parity of sows did not affected the lateral tying and sitting behavior of nursing sows, however the ventral tying are lowed in $1{\sim}2$ parity of sow group than the other parity group. Standing, feeding and drinking behavior of sows was not showed at any trends according to the sow's parity. 3. In the behaviors of suckling piglets, lying was increased and unsuccessful suckling was decreased until 21 days postpartum. Compared to the 7, 14 and 21 day postpartum, piglets at the 1 day postpartum spent less time for lying and walking, whereas they spent much more time for unsuccessful suckling. 4. According th the sow's parity, their piglets tying and unsuccessful suckling was lowed in $1{\sim}2$ parity sow group, however more than 3 parity sow's piglets behavior are not affected.
Mesothermal gold deposits of the Heungdeok, Daewon and Ilsaeng mines in the Youngdong area occur in fault shear zones in Precambrian metamorphic rocks of central Sobaegsan Massif, Korea, and formed in single stage of massive quartz veins (0.3 to 3 m thick). Ore mineralogy is simple, consisting dominantly of pyrrhotite, sphalerite and galena with subordinate pyrite, chalcopyrite, electrum, tetrahedrite and native bismuth. Fluid inclusion data indicate that hydrothermal mineralization occurred at high temperatures (>240$^{\circ}$ to 400$^{\circ}$C) from $H_{2}O-CO_{2}(-CH_{4})$-NaCI fluids with salinities less than 12 wt. % equiv. NaC!. Fluid inclusions in vein quartz comprise two main types. These are, in decreasing order of abundance, type I (aqueous liquid-rich) and type II (carbonic). Volumetric proportion of the carbonic phase in type II inclusions varies widely in a single quartz grain. Estimated $CH_4$ contents in the carbonic phase of type II inclusions are 2 to 20 mole %. Relationship between homogenization temperature and salinity of fluid inclusions suggests a complex history of fluid evolution, comprising the early fluid's unmixing accompanying $CO_2$ effervescence and later cooling. Estimated pressures of vein filling are at least 2 kbars. The ore mineralization formed from a magmatic fluid with the ${\delta}^{34}S_{{\Sigma}S}$, ${\delta}^{18}O_{water}$ and ${\delta}D_{water}$ values of -2.1 to 2.2$\textperthousand$, 4.7 to 9.3$\textperthousand$ and -63 to -79$\textperthousand$, respectively. This study validates the application of a magmatic model for the genesis of mesothermal gold deposits in Youngdong area.
1960년대에 본격적인 연구가 시도된 난세포질내 정자직접주입법(Intracytoplasmic Sperm Injection ; ICSI)은 1976년에는 Uehara 등에 의한 hamster의 연구에서 최초로 전핵의 형성에까지 성공하였다. 이후 계속된 연구를 통하여 여러 동물종에서 이 방법에 의한 난자의 수정 및 배발달에 성공하여, 1988년에 토끼, 1991년에 소, 1995년에는 생쥐에서 산자의 생산에 성공하였다. 한편, 사람에 있어서는 1988년 Lanzendorf 등에 의해 최초로 사람난자가 난세포질내 정자직접주입법에 의해 수정에 성공한 것이 보고되었으며, 1992년에는 Palermo 등에 의해 이 방법에 의해 수정된 수정란 이식을 통한 임신 및 성공적인 분만이 보고되었다. 난세포질내 정자직접주입법에 있어서는 정자의 운동성 및 첨체반응 등의 유무가 수정에 관여하는 중요한 요인이 아닌 것으로 알려지고 있으며, 성숙한 정자가 아닌 정소상체(미부-두부)정자 혹은 정소내의 미성숙정자를 사용하여 난세포질내 정자직접주입법을 시행하여도 수정 및 임신이 가능한 것으로 보고되었다. 또한 정자세포(spematid)나 원형정자세포(round spermatid)를 수정과 배발달이 관찰되었으며 사람에 있어서는 분만까지 성공하였다. 현재까지 이 난세포질내 정자직접주입법은 학술적으로는 난자-정자가 결합하는 기전을 밝히는 연구에 이용되어 왔으며, 임상적으로는 시험관아기시술에 있어서 정자의 기능, 수 등이 문제가 되어 수정이 어려운 남성불임환자에게 적용하여 좋은 성과를 거두어 왔다. 향후 이 기술은 유전자진단이나 남성불임환자의 처치에 폭넓게 사용될 것으로 기대된다.
A total of fourteen, 1-wk-old male Holstein calves were allotted into two groups consisted of control (CON) and IGY which was orally administrated with immunoglobulin yolk (IgY) for 1wk. Calves in both groups were provided with milk replacer according to feeding program and had ad libitum access to timothy hay for the entire experimental period (7wks). At 0, 7 and 49 day of experiment, blood samples were collected from the jugular vein of calves to investigate blood biochemical profiles and the differential count (%) of white blood cell (WBC). We also monitored growth performance and colony forming unit (CFU) of fecal microbial population in calves. The adminstration of IgY in calves did not affect body weight and weight gain during 49 days feeding trial compared with control group. The CFU of E. coli and Lactobacilli in the feces of calves were not significantly affected by IgY treatment, whereas the score of the calf scours during day 43 to 49 in IgY group showed a significant (P<0.05) solid type. There were no differences in plasma biochemical components including total protein, albumin, immunoglobulin and the other indicators. As for WBC differential count (%), there was no statistical difference in the percentages of neutrophil, lymphocyte, monocyte, eosinophil and basophil at 0, 7 and 49 days after the oral supplementation of IgY. In conclusion, the oral supplementation of IgY as an immunostimulant did not affect growth performance, fecal microbial population, blood biochemical profile and WBC differential count in Holstein calves.
This study was conducted to test the efficacy of the automatic liquid feeder(designated as NLRI) developed by National Livestock Research Institute, Korea for 7-day old early-weaning piglets. The other automatic liquid feeder imported from USA(designated as IALF) was used for a comparative purpose. A total of sixty piglets of 7 days of age were allotted to three treatments. The control group of 20 piglets was raised by their own sows until 21 days of age, while others were shifted to automatic liquid feeders of either NLRI or IALF on 7 days of age and reared during 14 days post-weaning. After then, all the piglets were fed nutritionally identical mash diets until 70 days of age. Compared with control group, body weight of piglets reared on automatic liquid feeders were lighter(P〈0.05) at 21 days of age [5.55kg (control) vs 4.97 (NLRI) and 4.98kg (IALF)], while heavier(P〈0.05) at 70 days of age(24.82kg vs 30.17 and 29.42kg). The results indicated that pigs reared on liquid feeding showed higher(P〈0.05) average daily gain than control pigs during the whole experimental period [346.7g (control) vs 425.8 (NLRI) and 416.1g (IALF)], while no difference was found in feed/gain (1.67 vs 1.78 and 1.84). There was no difference in growth performance and incidence of diarrhea between two automatic liquid feeders, NLRI and IALF. Compared with control group, intestinal villi tended to be shorter in liquid feeding group during the first week, but were recovered within two weeks. The results suggest that the automatic liquid feeder newly developed by National Livestock Research Institute, Korea can be successfully used for rearing young piglets weaned at very early age.
포유동물의 난소 내에는 많은 수의 primordial follicles 과 preantral follicles 이 존재하고 있으며, 이것은 수정란을 체외생산하기 위한 잠재적인 난자의 공급원이 될 수 있다. 생쥐 preantral follicles 내에 존재하는 난자의 체외성장과 발달을 위하여 몇몇 배양체계가 개발이 되었으며, 적당한 배양조건에서 감수분열 능력이 없는 preantral follicles 내의 난자가 체외배양을 통하여 난자 직경이 증가하고 완전한 핵성숙을 하는 것으로 나타났다. 또한, 체외성장 및 성숙된 난자로부터 생쥐 산자의 성공적인 생산은 preantral follicles 내의 난자가 체외배양을 통해서도 완전한 발달능력을 얻을 수 있음을 입증하였다. 그렇지만, 생쥐 preantral follicle로부터 수정란의 체외생산능력은 매우 낮은 것으로 보고되고 있다. 한편 사람을 비롯한 돼지, 소와 같은 중ㆍ대가축의 경우에는 pre antral follicle의 체외배양을 통하여 감수분열능이 있는 단계의 난자로까지의 발달이 아직 보고가 되지 않고 있다. 따라서 지금까지의 연구결과들을 종합해 볼 때, preantral follicles의 체외배양조건을 개선하거나 새로운 배양체계를 개발에 대한 많은 연구가 요구되고 있다. 사람과 중ㆍ대가축의 preantral follicles의 체외배양체계의 확립은 우수한 형질을 가진 동물의 확장, 희귀동물 혹은 멸종위기 동물의 보존에 이용될 수 있을 것이며, 그리고 암치료를 위하여 화학적, 방사선 치료를 받아야 하는 여성에게서 향후에 불입치료를 위한 방법으로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
In vitro cultrue systems for the growth of sma-II oocytes and for meiotic maturation are expected to provide a new source of a large population of oocytes as well as assistance in basic physiological studies of oogenesis. Mouse oocytes mid-growth phase can complete grovvth and acquire full developmental capacity in vitro. On the other hand, growing pig oocytes need some other factors. FSH at a low concentration maintains the viability of both oocytes and granulosa cells, and hypoxanthine promotes the meiotic competence of the oocytes during culture period. Considerable improvement in the culture systems for growth of pig oocytes, suggested from mouse studies, and for oocyte maturation could help to develop this technology in larger species.
Proper development of fertilized oocyte to blastocyst is a key step in mammalian development to implantation. During development of preimplantation embryos, the mammalian embryo needs supply the energy substrate for keep viability. Usually mammalian oocyte get substrate especially energy substrate from oviduct and uterus, because it does not store much substrate into cytoplasm during oogenesis. Carbohydrates are known as a main energy substrate for preimplantation stage embryos. Glucose, lactate and pyruvate are essential component in preimplantation embryo culture media and there are stage specific preferences to them. Glucose transporter and $H^+$-monocarboxylate cotransporter are a main mediator for carbohydrate transport and those expression levels are primarily under the control of intrinsic or extrinsic factors like insulin and glucose. Other organic substances, amino acids, lipids and nucleotides are used as energy substance and cellular regulation factor. Though since 1960s, successful development of fertilized embryo to blastocyst has been accomplished with chemically defined medium for example BWW and give rise to normal offspring in mammals, the role of metabolites and the regulation of intermediary metabolism are still poorly understood. Glucose may permit expression of metabolic enzymes and transporters in compacting morula, capable of generating the energy required for blastocyst formation. In addition, it has been suggested that the cytokines can modulate the metabolic rate of carbohydrate in embryos and regulate the preimplantation embryonic development through control the metabolic rate. Recently we showed that lactate can be used as a mediator for preimplantation embryonic development. Those observations indicate that metabolites of carbohydrate are required by the early embryo, not only as an energy source, but also as a key substrate for other regulatory and biosynthetic pathways. In addition metabolites of carbohydrate may involve in cellular activity during development of preimplantation embryos. It is suggested that through these regulation and with other regulation mechanisms, embryo and uterus can prepare the embryo implantation and further development, properly.
착상전 수정란 단계에서 형질전환 수정란의 선발은 형질전환동물의 효율을 증대시킬 수 있는 방법이다. 성공적인 형질전환동물의 생산을 위해서는 생산된 수정란의 mosaicism 빈도를 감소시켜 전체 할구에서의 유전자 발현을 유도하는 것이 최적일 것이다. 따라서 본 연구에서는 돼지의 웅성 생식세포를 이용한 형질전환동물의 생산에 있어서 다양한 정자세포 이용시 형질전환 수정란의 생산성 및 mosaicism 빈도를 조사하였다. 아울러 돼지 웅성생식세포내 GFP 유전자도입시 세포들의 생존율 및 원형정자세포분리 후 배양에 따른 형태적 변화를 관찰하였다. 돼지의 웅성 생식세포내 GFP 유전자 도입은 전기자극법 (1.3 ㎸/cm, 200 $\mu\textrm{s}$) 에 의하여 수행되었으며, 이 때 생존율은 60-70%이였다. 유전자가 도입된 전체 세포중 원형정자세포군의 분리는 유식세포분리기에 의하여 수행하였으며, 전체집단에 대한 분리군의 비율은 평균 16.2%이였다. 형질전환 수정란의 생산은 정자 (ICSI), 원형정자세포 (ROSI), 배양후 확장된 원형정자세포(ELSI)를 이용하였으며 각각의 난할율은 ICSI (82.9%), ROSI (59.1%), ELSI (62.1%)로 유의한 차이를 나타내었다. 그리고 8세포기까지의 배발달율은 각각 61.1, 40.9 및 48.6%이였으며, 상실배 및 포배기형성율은 각각 24.6, 18.1 및 32.4%이였다. 형광현미경하에서 GFP 단백질이 발현된 8세포기 수정란을 대상으로 각각의 할구를 primer extension pream-plification (PEP) PCR 방법으로 분석한 결과, ICSI 및 ROSI 실시후 대부분 (15/20, 9/10) 의 수정란은 3~4개의 할구에서만 GFP 유전자의 존재여부를 확인할 수 있었으며, 전체 할구에서 GFP 유전자가 모두 확인된 수정란은 없었다. 반면에 배양된 확장 원형정자세포를 이용하여 생산한 수정란의 경우, 4/10 (40%)에서 전체 할구내에 GFP 유전자의 존재를 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 비록 배발달율 및 GFP 유전자 발현율에 있어서는 ELSI방법이 ICSI 등의 방법보다 현저히 낮았지만, mosaicsism 빈도가 낮아 바람직한 형질전환 수정란 생산에서는 오히려 유용한 방법이라고 사료된다. 또한 외래 유전자의 도입효율 면에서 후기 원형정자나 성숙정자보다 초기 원형정자세포에 외래유전자를 도입한 다음, 성숙시킨 확장원형 정자세포를 이용하는 방법이 보다 우수하다는 것을 시사하였다. 따라서 본 연구결과는 포유동물의 웅성 생식세포를 이용하여 nonmosaicisn을 나타내는 형질전환수정란을 생산하고 선발할 수 있는 일련의 기술적 과정을 정립하였다고 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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