Kim, Young-Jae;Shim, Kwang-Sup;Hwang, Kyung-Gyun;Oh, Young;Paik, Seung-Sam
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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v.27
no.5
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pp.438-445
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2005
Cyclosporine A(CsA) is a powerful immunossuppresive agent used to prevent graft rejection of organ and treat autoimmune disease. One of the major side effects associated with CsA treatment is the development of gingival overgrowth. The purpose of this study was to evaluate the expression and association of the several growth factors in gingival overgrowth induced CsA using by immunohistochemical technique. Normal tissues as control were obtained from healthy normal gingivae and overgrowth gingival tissues as experiments were obtained from the patients taken the CsA. The expressions of the MMP-1, TIMP-1, TGF$\beta$-1, p21, p53, PCNA were evaluated by immunohistochemical technique. The more overgrowth was detected at the epithelial and connective tissue area in experimental group. The MMP-1, TGF$\beta$-1, p21, p53, PCNA expressions were significantly increased in experimental group. The TIMP-1 expressions was not significantly increased in experimental group. We could conclude that the gingival overgrowth induced CsA was related with the collagen matabolism in connective tissue and also the production of the growth factor from epithelial tissue.
The purpose of this study was to evaluate clinically and histopathologically the effects to the periodontal tissue in rats after Cyclosporin A (CsA) administration and to determine whether there is a relationship between dosage of CsA or blood CsA level and the seventy of gingival overgrowth in rats. Twenty 6-week-old Sprauge-Dawley Fats were randomized into 4groups. The control group received olive oil only and the test group received daily CsA in olive oil via gastric feeding for 6weeks at a 3,10, and 30mg/kg. Rats were weighed to evaluate the systemic effect of drug and stone models were made from alginate impressions of upper and lover anterior region at 2 week interval. On completion of offal CsA administration, blood were collected and blood CsA levels were quantitated by TDxFLx analyzer. Rats were sacrificed an6 their upper and lower jaws were removed together with the surrounding gingiva and soft tissue for light microscopic examination. The results were as follows : 1. The weight gain of GsA-treated rats was much less than of the control group and central incisors were gradually displaced and separated in the test groups. 2. The extensive fibrovascular proliferation and scattered inflammatoy infiltrates in an edematous stroma were observed in enlarged gingiva of CsA-treated rats. 3. The increase in buccolingual, mesiodistal dimension of the anterior teeth and vertical height of the interdental papilla showed dose-dependent manner in CsA-treated rats. 4. Significant positive correlation exists between blood CsA level and the severity of gingival overgrowth in anterior teeth. This result indicates that the severity of gingival enlargement in CsA treated rats is correlated with dosage of CsA administration and blood CsA level.
The gingival hyperplasia refers to an increase in the size of the gingival tissue produced by an increase in the number of its component cells. In order to investigate the cellular change in epithelium and subepithelial tissue of noninflammatory gingival hyperplasia, the gingival tissues were surgically obtained from the patients with dilantin gingival hyperplasia and idiopathic gingival hyperplasia. The excised tissue samples were fixed in neutral formalin for 6-24 hours, embedded with paraffin, sectioned at $4-6{\mu}m$ in thickness, mounted on glass slides coated with 3-aminopropyltriethoxysilane(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, U.S.A.) and immunocytochemically processed by Avidin-Biotin peroxidase complex method for detecting proliferating cell nuclear antigen, tenascin and collagen type IV. Monoclonal mouse anti-human PCNA antibody(Oncogene Science, Uniondale, NY, U.S.A., 1 : 250,000), monoclonal mouse anti-human tenascin antibody(Chemicon-International Inc., Temecula, CA, U.S.A., 1:5,000), and monoclonal mouse anti-human collagen type IV(Dakopatts, Glostrup, Denmark, 1: 50) were used as primary antibodies. The results were as follows: 1. In non-inflammatory gingival hyperplasia, the positive reaction to proliferating cell nuclear antigen was localized in the basal cell layer of gingival epithelium and well-developed rete pegs. 2. The positive reaction to tenascin was shown in the connective tissue subjacent to basament membrane of gingival tissue, and especially strong positive reaction was noted in the tip portion of connective tissue projections. 3. The positive reaction to collagen type IV was localized along the basement membranes of gingival epithelium and blood vessels. The results suggest that connective tissue enlargement may affect the proliferation of gingival epithelium.
Kim, Young-Muen;Hwang, Kyung-Gyun;Lee, Jae-Seon;Park, Chang-Joo;Shim, Kwang-Sup
Maxillofacial Plastic and Reconstructive Surgery
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v.28
no.5
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pp.445-453
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2006
Cyclosporine A (CsA) is a powerful immunosuppresive agent used to prevent graft rejection of organ and treat autoimmune disease. One of the major side effects associated with CsA treatment is the development of gingival overgrowth. The purpose of this study was to investigate the mRNA expression and association of the several growth factors in gingival overgrowth induced by CsA, respectively. Gingival fibroblasts were obtained from gingival tissues of healthy donor and the patients treated with CsA. The cultured gingival fibroblasts were incubated with increasing concentrations of CsA for 24 hours, and the expression of MMP-1, TIMP-1, $TGF-{\beta}_1$, p21 were determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The expressions of MMP-1 was slightly increased according to the concentration of treated CsA, but there was no statistical significance. TIMP-1 showed the increased expression at the CsA concentration of 250 and 500 ng/ml and significantly decreased at the CsA concentration of 750ng/ml. $TGF-{\beta}_1$ showed the increased expression at the CsA concentration of 500 and 750 ng/ml. The expression of p21 was not changed significantly. We concluded that the gingival hyperplasia induced by CsA was more related with $TGF-{\beta}_1$ than MMP-1 or TIMP-1 on gingival collagen metabolism in patients treated with CsA.
Kim, Su-Hwan;Yang, Byung-Kun;Ku, Young;Rhyu, In-Chul;Chung, Chong-Pyoung;Han, Soo-Boo;Lee, Yong-Moo
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.34
no.2
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pp.269-279
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2004
백악질 세포의 분리 및 배양방법을 확립하고, 이를 이용하여 백악질 세포의 형질특성을 알아보고자 하였다. 교정목적으로 발거된 소구치를 이용하여, 치은섬유아세포, 치주인대 세포 및 백악질 유래세포를 분리, 배양하였다. 백악질 유래 세포 배양시에는 백악질을 절제한 후 Collagenase P를 이용하여 백악질 유래 세포 외의 다른 세포의 개제를 배제하였고, 기질을 분해하여 세포의 분리 및 배양이 용이하도록 하였다. 분리 및 배양시기의 세포의 형태를 광화현미정을 이용하여 관찰하였다. 조골세포의 특성을 가지는 SaOs-2 세포를 대조군으로 이용하여 분리 및 배양된 세포군들을 동일한 조건으로 배양하였다. 3일 및 7일째에 세포증식도를 측정하였고 7일째에 ALPase 효소 활성도를 측정하였다. 각 세포의 형질 특성을 알아보기 위해 RT-PCR을 실시하여 조골세포 분화 표식자와 연관된 osteopontin(OPN), Alkaline phosphatase(ALP), type I collagen(COL-I), Bone sialoprotein(BSP), BMP-2 및 osteocalcin(OC)의 발현을 비교 관찰하였다. 백악질 유래 세포의 분리 및 배양을 시도한 5명의 치아 중에서 3명의 치아에서 세포군을 배양해 낼 수 있었다. 배양한 백악질 유래 세포는 섬유아세포와 유사한 형태와 증식을 보였다. ALPase 효소 활성도 검사 결과 백악질 유래 세포는 SaOs-2 세포보다 낮은 활성도를 나타내었으며, 배양된 세포의 RT-PCR 결과 백악질 유래 세포군에서는 ALPase의 발현이 나타나지 않았고, 다른 조골세포 표식자의 발현도 낮게 나타났다. 이는 백악질 유래 세포가 조골세포 및 다른 대조군의 세포와는 다른 형질 특성을 가지고 있다는 것을 시사한다. 이상의 관찰결과로 사람의 백악질 유래 세포롤 백악질의 절제 및 효소처리 방법으로 효과적인 분리 및 배양이 가능하며, 이는 향후 백악질 세포의 형질 특성 및 백악질 형성의 분자적 기전을 파악하는 중요한 연구자료로 활용 될 수 있을 것으로 사료된다.
Platelet-derived growth factor(PDGF) is one of the polypeptide growth fators. PDGF has been reported as a biological mediator which regulates activities of wound healing process including the cell proliferation, migration and metabolism. Recent studies indicated that demineralized root surface as the primary site for growth factor application has advantages over other application method, especially due to binding capacity of growth factor for exposed matrix component of deminera1ized dentin surface. The purpose of this study is to evaluate optimal application time of PDGF-BB on proliferation of human gingival fibroblasts using deminera1ized dentin surface as primary application site. Human gingival fibroblasts and dentin slabs were prepared from the first premolar tooth extracted for the orthodontic treatment, cells were cultured in DMEM/I0% FBS at the $37^{\circ}C$, 5% CO2 incubator. All of the dentin slabs were preconditioned with Tetracycline HCI(100mg/ml) solution and rinsed in PBS. In the cell proliferation experiment, experimental group was immersed in DMEM containing 10% FBS, 50ng/rnl PDGF-BB during different time(30sec, 1, 2, 4, 8 minutes) and dried. Cells at concentration of $1{\times}10^5$cells/ml were seeded in each culture well which contained dentin slabs and incubated for 6 hours. Then, all of the dentin slabs were moved into new 24 well culture dish and incubated for 24, 48, 72 hours. The cell counting was done by hemocytometer with inverted phase contrast microscope after trypsinization. The results were as follows : The application of PDGF-BB for 1, 2 min slightly increased the number of gingival fibroblasts, and the application of PDGF-BB for 4, 8 min prominently increased the number of gingival fibroblasts. The application of PDGF-BB for 4 min showed maximum proliferation rate of gingival fibroblasts at 24, 48, 72 hours, and the application of PDGF-BB for 8 min showed less proliferation rate of gingival fibroblasts compared to the application of PDGF-BB for 4 min at 24, 48, 72 hours. In conclusion, the application of PDGF-BB for 4 min appeared to be optimal to obtain maximum proliferation of gingival fibroblasts using demineralized dentin surface as primary applicaton site of PDGF-BB.
Epidermal growth factor(EGF) is one of polypeptide growth factors. EGF has been reported as a biological mediator which regulates activities of wound healing process including the cell proliferation, migration and metabolism. The purposes of this study is to evaluate the effects of EGF on the human periodontal ligament cells and human gingival fibroblast cells that promote regeneration of periodntal tissue. The mitogenic effects of epidermal growth factor on human periodontal ligament cells and human gingival fibroblasts were evaluated by determining the incorporation of 5-Bromo-2'-deoxy-uridine into DNA of the cells in a dose dependent manner. The prepared cells were the primary cultured gingival fibroblast and periodontal ligament cells from humans, the fourth or sixth subpassages were used in the experiments. Cells were seeded in DMEM containing 10% FBS. 1, 10, 50, 100, $200{\eta}g/ml$ and epidermal growth factor were added to the quiescent cells for 24 hours, 48 hours and 72 hours. They were labeled with $10\{mu}l/200{\mu}l$ 5-Bromo-2'-deoxy-uridine for the last 6 hours of each culture. The results of the five determinants were presented as mean and S.D.. The results were as follows : The DNA synthetic activity of human gingival fibroblasts were increased dose dependently by epidermal growth factor at 24 hours, 48 hours and 72 hours. The mitogenic effects were similar at the 24 and 48 hours of epidermal growth factor, but the DNA synthetic activity of human gingival fibroblasts generally decreased at 72 hours. The DNA synthetic activity of human periodontal ligament cells were increased dose dependently by epidermal growth factor at 24 hours but the DNA synthetic activity decreased at $200{\eta}g/ml$ of each hour. Generally the maximum mitogenic effects were observed at the 48 hours application of epidermal growth factor. The DNA synthetic activity of human periodontal ligament cells generally decreased lower at 24, 72 hours than at 48 hours the application of epidermal growth factor. In the comparison of DNA synthetic activity between human gingival fibroblasts and human periodontal ligament cells, human periodontal ligament cells had slightly higher proliferation activity than human gingival fibroblasts for a longer time at the high dosage of the epidermal growth factor. In conclusion, epidermal growth factor have important roles in the stimulation of DNA synthesis in human periodontal ligament cells and human gingival fibroblasts, and thus may be useful for clinical applications in periodontal regenerative procedures.
Choi, Sooji;Sohn, Young Bae;Ji, Suk;Song, Seungil;Shin, Jeongwon;Kim, Seunghye
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.47
no.3
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pp.344-351
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2020
Amelogenesis imperfecta (AI) occurs either in isolation or in association with other dental abnormalities and systemic disorder. A rare syndrome associating AI with nephrocalcinosis was named as Enamel Renal Syndrome (ERS; OMIM #204690). This syndrome is characterized by severe enamel hypoplasia, failed tooth eruption, intra pulpal calcifications, enlarged gingiva, and nephrocalcinosis. Nephrocalcinosis is a condition where calcium salts are deposited in renal tissue, and this may lead to critical kidney complications. This rare syndrome shows pathognomonic oral characteristics that are easily detectable at an early age, which proceeds the onset of renal involvement. Pediatric dentists are the first oral health practitioners whom ERS patients will meet at early age. The role of pediatric dentists is critically important for early diagnosis and referral of patients to both nephrologists for renal assessment and geneticists for identification of causative mutation and diagnosis. Early detection of renal involvement may provide chances to prevent further undesired renal complications.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.39
no.4
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pp.412-417
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2012
Mucopolysaccharidosis (MPS) is a disorder which is caused by the defect of the lysosomal enzyme that is essentially needed for resolution of glycosaminoglycans (GAGs). Metabolite of GAGs will accumulate in the lysosome of cells and will result in the dysfunction of cells, tissues, and organs. Eventually, patients will manifest both mental retardation and physical disorders. In worst cases, mucopolysaccharidosis can cause premature death. The current clinical types have been classified as MPS from type I to type IX according to the defect of certain enzyme. The dental complications have been reported as delay of eruption, enamel hypoplasia, microdontia, malocclusion, condylar defects, gingival hyperplasia and dentigerous cystlike follicle. This clinical report presents the case of a boy with MPS type II, Hunter Syndrome which has various dental complications.
This study was designed to evaluate the expression of heat shock protein in tooth and surrounding tissue during the experimental movement of rat incisors, by LSAB(labelled streptavidine biotin) immunohistochemical staining for heat shock protein. Twenty seven Sprague-Dawley rats were divided into a control group(3 rats), and 6 experimental groups(24 rats), to which 75g of force was applied from helical springs across the maxillary incisors. Rats of experimental groups were sacrificed at 0.5, 1, 4, 7, 14 and 28 days after force application, respectively. And the periodontal tissues of a control group and experimental groups were studied immunohistochemically. The results were as follows : 1. In control group, the expression of HSP47 was rare in gingiva, dentin and cementum, and mild in periodontal ligament and alveolar bone. But it was more evident than that of HSP70. 2. The expression of HSP47 or HSP70 was rare or mild in dentin, cementum and odontoblast of experimental group, regardless of the duration of force application, which was not different from that of control group. 3. In experimental group, the expression of HSP47 got to the highest degree in periodontal ligament and alveolar bone at 4 days after force application, and then decreased. And the expression was more evident in the pressure side than in the tension side of periodontal ligament 4. The expression of HSP70 began to increase at 12 hours after force application and got to the highest degree at 4 days, in the capillary of pulp and periodontal ligament. And the expression was more evident in the pressure side than in the tension side of periodontal ligament 5. The expression of HSP70 in alveolar bone of experimental group was rare, which was similar to that of control group.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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