This study was carried out to investigate the efficient in vitro mass propagation methods for juvenile sporophytes of Matteuccia struthiopteris. Chopped segments of pinnae, petiole and rhizome were cultured on 1/2MS with 0.1% activated charcoal. Among these explant sources only rhizome segments produced young sporophytes, regenerating vigorously on 1/2 MS medium. Adjusting sucrose concentration to 2% and supplement to $50mgL^{-1}$$NaH_2PO_4$ in 1/2MS medium proved to be more efficient for plant regeneration. Various combinations of growth regulators such as kinetin, BA, NAA, and IBA were added to the growing media, and the best sporophyte regeneration was obtained by $1{\mu}M$ kinetin. The BA addition resulted in vigorous proliferation of meristematic tissues, but without differentiation to sporophytes. Three types of culture methods, solid using agar, liquid stationary, and liquid shaking culture, were employed with or without activated charcoal. The addition of 0.1% activated charcoal to modified 1/2MS media (2% sucrose, $50mgL^{-1}$$NaH_2PO_4$, $1{\mu}M$ kinetin, pH 5.8 and 0.8% agar) yielded highest sporophyte regeneration in liquid shaking culture.
Experiments with non-nodulated alfalfa (Medicago sativa L. cv, Europe) plants grown in hydroponic cuiture, were carried out to estimate the remobiJization of nitrogen (N) reserves and to investigate the transported forms of reduced soluble-N in xylem during regrowth following shoot removal. Endogenous N remobilization were estimated by $^{15}N$ labelling and amino acids in xylem sap were analysed. The, $^{15}N$ contents of ~egr9wing leaves and stems increased as a result of remobilization of N reserves mainly from root ,system, Regrowing leaves were a stronger sink than regrowing stems, with about tWo-thirds of remobilized 15N being recoved in leaves. Endogenous N in lateral roots accounted for about 46% of the total N reserves used for regrowth, while tap roots accounted for 23%, About 72% of total endogenous N remobilized to regrowing shoot, occurred during the first 10 days of regrowth, The outflow of reduced soluble-N (mainly amino acids) was greater than that of protein-N, while the latter was the largest storage pool in tap root and lateral roots. It is suggested that amino acids-N was the most readily avaiable form of N reserves. Asparagine, which repre5ented about 75% of amino acids-N in xylem sap, was the main transported form of reduced N. Its relative contents, during the first 10 days of regrowth, decreased from 75% to 59%. This decline was accompanied by compensatory increase in the relative contents of asparatate and glutamine.
Plant regeneration system from leaf and root segments of Lycoris chejuensis via bulblet formation was established. Surface-sterilized leaf and root segments were cultured on the B5 medium containing 2,4-D. After 12 weeks of culture onto B5 medium containing 2,4-D, white globular structures and white calluses were formed on the cut surface of the explants. The highest frequency of globular structures and calluses formation from leaf explants was 32.1% when leaf explants were cultured onto B5 medium supplemented with 1 mg/L of 2,4-D. However, the higher concentration of 2,4-D (over than 3 mg/L) resulted in decrease of the frequency. In comparison to leaf explants, root segments showed the highest frequency at a rate of 36.1% when root explants were cultured onto B5 medium supplemented with 3 mg/L of 2,4-D. These structures and calluses were sub-cultured and proliferated onto the same culture medium. Upon transfer to B5 basal medium, white globular structures were developed into bulblets and normal plantlets. After 4 weeks of incubation in the light, plantlets were successfully rooted over the frequency of approximately 90%. Rooted plantlets were successfully transferred to potting soil and acclimatized in the growth chamber. The plant regeneration system of Lycoris chejuensis established in this study, might be applied to mass proliferation, conservation of genetic resources and genetic transformation for molecular breeding.
Kim, Cho-Min;Kim, Soon-Hee;Kim, Su-Mi;Park, Sang-Wook;Lee, Il-Woo;Kim, Moon-Suk;Rhee, John-M.;Khang, Gil-Son;Lee, Hai-Bang
Polymer(Korea)
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v.32
no.1
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pp.49-55
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2008
It is recognized that Schwann cells (SC) are essential for peripheral nerve development and regeneration. SIS (small intestinal submucosa) consists of some growth factors which can stimulate cell activity without immune rejection responges. SCs were harvested from the femurs and tibias of female Fischer rat and then suspended with $2{\times}10^6$ cell/sponge in SIS sponge. Fischer rat received an implant consisting of the SCs and the SIS sponge at the place of a 5 mm gap created by the sciatic nerve resection. Thin sections were stained with H &E staining and immunostaining of S-100, GFAP and NF after 1, 2, and 4 weeks. It was observed that the effects of the SIS sponge with SCs on neuroinduction(Group II, with scaffold & cell) are strong as much as uninjured model(Control I), and significantly stronger than SIS sponge model (Group 1, with scaffold only) and blank model (Control II). In conclusion, these results suggest that SIS sponge filled with SCs may have an important role for peripheral nerve regeneration of tissue engineering.
후두암의 수직절제 수술후의 후두 재건 목적은 기관절개를 통하지 않고 후두를 통한 호흡이 가능하도록 하면서 연하시 기도흡인을 피하기 위한 sphincter 능력의 보존, 그리고 발성이 가능하도록 성대진동 mechanism을 재건하는데 있다. 오늘날 수많은 후두학자들에 의해서 고안 개발된 다양한 재건 방법이 있다. 연자는 광범위한 후두절제에 따른 큰 결손을 메우기 위해 bulky하면서도 점막 상피의 재생이 용이한 재건 피판으로 흉유돌근골막 피판을 이용하여 후두 결손부를 재건하여 보았다. 방법은 성견 3마리를 대상으로하여 thiopental sodium 정맥주사로 전신마취를 시행한 후 설골에서부터 흉골상까지 경부 정중앙의 피부를 절개하고 후두를 노출시켜 후두 수직절제술을 시행하였다. 흉유돌근과 흉골에 부착된 골막을 박리하여 흥유돌근골막 피판을 제작한 후 골막이 후두강 안쪽으로 되도록하여 골막연과 후두점막을 봉합하였다. 그리고 3, 5, 9개월에 후두적출술을 시행하여 병리조직학적 및 수술후 경과를 관찰하였다. 3실험견 모두 기관절개술 없이 후두를 통한 호흡이 가능하였고 흡입성 폐렴이나 피하기종등의 합병증없이 창상이 치유되었으며 발성도 양호하였다. 이식된 골막위로 신생혈관의 출현과 함께 점막재생이 잘되 있었다. 단지 봉합사 주위에 소량의 육아종이 관찰되었다. 조직학적으로는 섬유조직위로 편평상피가 재생되었으며 성문하부에서는 일부 섬모가 있는 호흡기 점막도 관찰되고 골막하부에 신생골 형성은 관찰할 수 없었다. 골막 피판은 그 유연성 때문에 결손부위의 점막연에 맞춰도 tension이 없고 공기 누출이 되지 않게 봉합이 가능할 뿐 아니라 점막이 재생할 수 있는 frame-work의 역할을 하는 것으로 사료되었다. 이상과 같은 사실로 미루어 흉유돌근 자체가 견실하고 골막에 혈류공급이 잘되어 창상치유에 좋을 뿐 아니라 큰 후두결손부의 재건이 가능하리라고 사료되었다.로서 몇가지 앞으로의 치료지침에 도움이 되는 결과를 얻었기에 보고하는 바이다. 1) 성별 분포는 남자 16(39 %), 여자 25 (61%)이었으며 1 : 1.5의 빈도를 보였다. 2) 연령 분포는 20대와 30대에서 남녀 모두 25명으로 대부분을 차지하였다. 3) 부식제의 종류는 빙초산이 26명 (63.4 %)으로 대부분을 차지하였고 염산 7 (17.1 %) Lye 3 (0.7 %) 의 순이었다. 4) 음독후 12시간내에 식도경술을 받은 환자가 3명(0.7 %) 12-24시간에 받은 환자가 17명(41.5 %), 24 - 48시간에 받은 환자가 11명(26. 8%)으로 48시간 내에 시행받은 환자가 전체의 75.6%를 차지하였다. 5) 식도경 검사상 나타난 식도화상은 Grade I 11명 (26.8%) G.ade II 18(43.9%) Grade III 7명(17.1%) 이었으며 Grade II 인 경우가 18명(43.9%)로 가장 많았으며 Grade I 11명(26.8 %), Grade III 7명 (17.1 %) Normal 5명 (12.2 %) 순이었다. 6) 조기 식도경 검사에서 41명중 oral cavity burn이 없었던 경우가 15명(36. 1 %) 이었으며, oral cavity burn이 있었던 26명중 5명(19 .2 %)에서 Esophageal burn이 없었다 특히 Esophageal burn의 Grade II, III 25명 중 9명(29.6 %)에서 oral cavity burn이 없었다. 7) 식도 부식중 환자의 치료 원칙으로 Grade I, II, III에서 항생제 및 보존적 치료를 하였으며 Grade I에선 oral feeding을 시켰고 Steroid는 경우에 따라 투여하였으며 Grade III에선 원칙적으로 사용치 않았다. 식도조영술은 Grade I II III에서 3주 후에 모두 시행하였다. 8) 3주 후 식도조영술을 실
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1996.04a
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pp.185-185
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1996
Nitric oxide synthase(NO Synthase:E.C.1.14.13.39)는 생체내에서 L-arginine을 기질로 하여 citrulline과 nitric oxide(NO)를 생성하는 효소로서, 최근 연구에 의하면 2/3 부분 간 절제술 후 prereplicative phase동안에 발현되는 것으로 알려져 있다. 한편, 생체내에서 NO Synthase에 상경적 길항제인 methylarginine에 관해서도 수년간 많은 연구가 진행되어 왔다. 이들의 생성 기전은 protein methylation에 의해 생성된 methylated protein이 생체 내에서 분해되어 생성된다고 알려져 있으나, 정확한 기전에 대해서는 아직 논란의 여지가 많다. 따라서, 본 연구에서는 In vivo 실험을 통해 부분 간 절제술 후 시간대별로 간 조직에서의 NO Synthase 활성도와 혈청에서 NO의 최종 대사물인 Nitrite/Nitrate를 측정하였으며, 또한 NO Synthase 조절에 관여하는 세포내 기질인 arginine과 억제 인자인 methylarginine함량을 간 조직 및 혈청에서 측정하고, 세포 신호 전달체계에 관여하는 cyclic GMP 함량을 측정함으로써, 부분 간 절제술 후 간 재생동안에 NO Synthase 활성도와 methylarginine 및 arginine과의 상관 관계를 규명하고, 간 재생동안, 생성된 nitric oxide의 역할을 연구하려한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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