• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권2호
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• pp.181-186
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• 1986

대장균 염색체의 acetyl CoA carboxylase (fabE)영역 (염색체 지도상 72분 영역)의 유전자를 가진 결함형질도입 파아지를 분리했다 이 형질도입 파아지로부터 20 Md의 염색체 유래의 DNA를 분리하여 제한효소 지도를 작성했으며 이 영역에는 제한효소 Eco RI의 절단부위는 없었다. 형질도입 파아지 DNA의 제한효소 분해산물들은 pACYC 184 플라스미드 벡터에 재클로닝하여 fab E의 온도감수성 변이를 회복할 수 있는 수 종류의 플라스미드를 분리했다. 이들 플라스미드를 분석하여 fab E 유전자는 7, 4Md Bel II 단편상의 Hind III의 절단부위를 가진 3.4 Md Ban HI-Sal I 단편내에 존재함을 밝혔다.

• 미생물학회지
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• 제25권4호
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• pp.282-289
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• 1987

Pseudomonas putida KU816에서 분리한 플라스미드 pKU10의 여러가지 특성을 조사하고 그 제한 효소 지도를 작성하였다. pKU 10은 암펴설런, 테트라사이클린, 클로람페니콜에 대한 내성 유전자를 갖는 작은 R factor로서 마이토마이신 C에 의하여 큐어링 된다. 플라스미드의 크기는 9.4Kb로 측정되었다. pKU 10은 Pseudomonas와 E.coli블 숙주로 하였을 때 안정하게 형질 발현이 되다. 또한 pKU 10의 불화합성균은 IncP-I으로 조사되었다. Eco RI, Xho I. SaiI, BglII, SmaI은 pKU 10 DNA를 한 부위에서 자르고, Pst I은 두 부위, Hind Ill는 여섯 부위에서 자른다. 제한 효소 지도는 제한 효소를 이중, 삼중으로 완전 소화시키거나, 부분 소화시켜서 얻었다. pKU 10은 Pseudomonas속에서 유용한 클로닝 벡터호 이용된 것으로 기대된다.

• 미생물학회지
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• 제25권1호
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• pp.40-45
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• 1987

B Brevibacterium divaricatum FERM 5948 균주로부터 Bdi I RIM 체계에 속하는 BdiI methylase 유천자를 클로닝하여 발현을 조사하였다. Bdi I methylase 유전자의 클로닝을 위해 pBR 322의 EcoRI, BamHl, Sal I 3 군데의 클로닝 site를 이 용했고 1 차 형질전환후 나온 플라스미드를 BdiI으로 자른 뒤 ligation 시키지 않고 형질전환시키는 방법을 이용하였다. 유전 자을 가지는 행질전환체의 선별은 Bdi I methylase에 의해 수정된 채조합 플라스미드는 BdiI 제한효소에 방호된다는 것에 기 초하여 선별하였는데 5.6kb의 EcoRI insert DNA를 가지는 pBDIM 116이 Bdil methylase 유전자플 가지는 것으로 판명 되었다. pBDIM 11&을 가지는 숙주셰포에서 추출한 추출용액에는 S-adenosylmethionine이 있으면 BdiI의 인지부위인 A ATCGAT에만 특정한 methylase 활성이 측정되였다. 11개의 제한효소를 이용하이 제한효소지도를 작성하였고, BdiI r restriction -modification 체계에 관해서 도 논의하였다.

• 미생물학회지
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• 제25권3호
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• pp.173-179
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• 1987

한국산 A, tumefaciens의 3균주에서 분리한 Ti plasmid의 type과 분자량을 조사한 결과로 이들 모두는 octopine type 이었으며 각 plasmid의 분자량은 pTi12가 44Kb이었고, pTi14는 180Kb이었으며, pTi14는 172Kb이었다. 이중 pTi12를 Smal 및 HindIII로 가수분해한 결과 8개의 Smal digest fragment와 10개의 Hind III digest fragment를 얻었으며 Southern hybridization techniques을 이용하여 잠정적인 physical map을 작성하였다.

• 한국어병학회지
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• 제6권2호
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• pp.103-110
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• 1993

Sau3AI으로 부분절단한 Serratia marcescens genomic DNA(5Kb 이상)을 pUC19의 BamHI site에 삽입하여 total genomic library를 준비하였다. Swollen colloidal chitin media에서 halo를 형성하는 2개의 E.coli 형질전환주를 선별하였다. 이들 colony가 chitinase 유전자를 갖음을 재확인하기 위하여 4-methylumbelliferyl N-acetyl-$\beta$-D-glucosaminide(4-MuFGlcNAc)를 이용하였다. 4-MuFGlcNAc는 chitinase에 대한 기질특이성을 나타내며 형광을 나타내는 기질로서 positive clone들은 360nm의 자외선을 조사하였을 경우 밝은 형광을 나타낸다. pUC19으로 부터 유래된 2 종류의 다른 chitinase clone, pCH1(11.0Kb) 및 pCH2(7.5Kb)를 genomic DNA library로 부터 분리하였으며, 이들의 제한효소지도를 작성한 결과 서로 다른 제한효소지도를 나타내었다. pCH1EA 및 pCH2로 부터 각각의 EcoRI-Xbal fragment를 subcloning함으로써 두개의 다른 chitinase 유전자의 위치를 결정하였다. pCH1EA 및 pCH2를 cross hybridization 한 결과 hybridization signal을 나타내지 않아 서로 유사성이 없는 것으로 사료된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권6호
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• pp.619-624
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• 1992

Tn5 lac 삽입으로 채소입고병원균에 길항력이 약화된 T-67 및 고추역병균과 참깨역병균에 길항력이 약화된 T-81의 Tn5 lac 유전자 일부와 오른쪽 말단에 있는 길항관련 유전자의 flanking sequence가 cloning된 pAG67 및 pAG81 clone을 선발하였고, pAG67 및 pAG81 clone된 길항관련 유전자의 flanking sequence를 야생 길항균 Pseudomonas maltophilia B-14의 DNA를 probe로 사용하여 Southern hybridization으로 확인하였으며, 제한효소 지도를 작성하여 8Kb 및 4Kb 크기의 flanking sequence가 cloning되었음을 확인하였다. pAG6 및 pAG81의 flanking sequence를 EcoRi-BglII와 EcoRI-MpaI으로 분리하여 유전자 은행으로부터 길항관련 유전자가 cloning된 cosmid clone 7개주를 선발하였다.

• 한국균학회지
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• 제21권4호
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• pp.279-284
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• 1993

담자균류의 영지버섯으로부터 homocysteine methyltransferase를 code하는 metE 유전자를 methionine 요구성 균주인 대장균에 complementation시켜 cloning하였다. 그 결과 삽입된 DNA의 크기는 약 1.54 kb 이었고, 5개의 제한효소 부위가 존재하였다. 이 clone체의 제한지도를 작성하였고, southern blot 분석으로 metE 유전자는 영지버섯의 genome으로부터 유래하였으며, 단일 복제수로 존재함을 확인하였다.

• 미생물학회지
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• 제23권2호
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• pp.115-121
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• 1985

Lactobacillus casei에 감염하는 독성 phage중 각 분류꾼을 대표하는 5종의 phage (J1, TK93, K1, PD 5 빛 CP 1)와 l 종의 용원 phage (${\phi}$ 1043) 의 핵산의 특성을 바교 검토하였다. 실험한 6 종의 phage는 모두 double S stranded DNA를 갖고 있였으며 J1. TK93, K1 및 ${\phi}$ 1043 DNA의 크기는 약 42Kb, PD5 와 CP1 DNA는 140K Kb정도로 서로 비슷하였다. EcoR 1으로 절단시 J1, TK93, K1, PD5, CP1 및 ${\phi}$1043은 각각 13, 13. 11, 14, 14와 12개의 절편을 갖는 특징적인 절단양식을 보여주었다. J1, TK93 및 ${\phi}$ 1043 DNA에는 cohesive end가 존재 하였고 K1, PD5 빛 CP1 DNA에는 없는 것으로 사료되었다. J1과 TK93 DNA의 제한효소 지도를 작성하여 비교 검토하였으며 이상의 결과로부터 진화적 유연관계를 검토하였다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제12권2호
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• pp.237-245
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• 1995

Klebsiella pneumoniae 의 phoA 유전자를 함유하는 DNA를 plasmid pACYC184에 클로닝 하였다. 클로닝된 DNA의 크기는 4.0 kb이었으며 제한효소지도를 작성한 결과 3개의 PstI 절단부위와 4개의 PvuII 절단부위가 발견되었다. Klebsiella pneumoniae 의 phoA 유전자의 염기서열은 Escherichia coli와 매우 유사하여 80%의 유사성을 보였으며 이는 이 두 균종이 서로 유전적으로 매우 가까운 관계에 있음을 시사하였다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제36권1호
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• pp.30-36
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• 1997

미국과 캐나다는 한국에 분포하는 잎응애속(Tetranychus)중 범세계적 분포종인 점박이응애(T. urticae Koch)를 제외한 벚나무응애(Tetranychus vienensis Zacher), 차응애(T. kanzawai Kishida), 뽕나무응애(T. truncatus Ehara)를 검역대항으로 하고 있다. 잎응애속 응애들은 암컷성충으로 월동휴면에 들어가는데 기존의 수컷생색기의 형태를 위주로 한 동정방법으로는 이 휴면태의 암컷을 정확히 동정하기 어렵다. 월동을 위해 사과 과실 꼭지부에 우발적으로 부착할 가능성이 있는 것으로 우려되는 잎응애속 응애들의 월동휴면태에 대한 신속, 정확한 동정법이 수출검역현장에서 절실히 요구되는 실정이다. 사과의 주요해충인 점박이응애와 과수원 주변에서 발견되는 벚나무응애, 뽕나무응애, 차응애의 미토콘드리아 DNA(mtDNA)내 cytochrome oxidase subunit I(CO-I) 유전자를 PCR로 증폭하고 증폭된 DNA의 종간 변이를 이용하여 발육영기나 암수에 관계없이 동정할 수 있는 방법을 찾는 연구를 수행하였다. 세쌍의 primer에 의해 미토콘드리아 DNA의 CO-I 유전자 일부(680 bp)를 중복되게 증폭하였고 증폭된 유전자는 제한효소 AluI, DdeI, Sau3A 대하여 응애종간 특이적 인식부위를 가지고 있었다. 제한효소에 의해 절단되는 특이적 DNA 단편은 Tetranychus 응애류를 동정하는데 유용한 표식인자로 사용될 수 있을 것이다. 아울러 증폭한 CO-I 유전자내의 제한효소 인식부위에 대한 이들 4종 응애의 유전자지도를 작성하였다.