As a result of PCR-RFLP, the isolates used in this study were classified into five groups. Isolates 1 and 3 were included in AG-5 with 97% genetic similarity. Isolates 12 and 13 were included in AG-1 wilh 100% genetic similarily. Isolates 10 and AG-2-2 showed 97% similarity Isolates 7, 8, 11. 13, and 15 were included in AG-1. When isolates of 4, 5, 7 and 8 were restricted with Hae I. there was a single 700 bp fragment matched with AG-1. A 517 bp restriction fragment of isolate 9 was matched with AG-2-1. Based on the result of southem hybridization of genomic DNAs, all isolates restricted with Msp I showed more variable restriction differences than those restricted with Hae Ill. Isolates AG-2-1 and 9 showed 200 bp restriction fragment, and isolates 3 and AG-1 showed 1 kb restriction fragments.
서론: 급성 관동맥 증후군과 심근경색증의 진단과 예후 예측에 도움을 주는 새로운 심효소인자가 여러 가지 발견이 되어 현재 응급의료센터에서도 기본적으로 허혈성 흉통이 있는 환자에게 많이 사용하고 있다. 특히 최근에는 troponin과 CK-MB의 유용성에 대해서 많이 언급을 하고 있다. CRP도 역시 급성 관상동맥증후군에서 중요성이 인식되고 있다. 저자들은 세 가지 인자를 동시에 평가하여 상승되는 인자 수에 따라 그 중요성이 다를 수 있다는 가정 하에 총체적인 환자에 대한 정보를 제공할 수 있고, 응급실 근무 의사에게 급성 심근 경색증 환자를 좀 더 효율적으로 평가 할 수 있도록 하기 위하여 다표지 인자에 관한 연구를 시작하였다. 방법: 저자들은 응급의료센터에 내원한 급성 허혈성 흉통이 있는 환자 중 심효소 검사와 심전도에서 급성 심근 경색증에 합당한 소견을 보이고 이후 검사한 심혈관 조영술에서 심근경색증으로 확진된 환자를 대상으로 하였다. 내원 초기에 troponin T와 CK-MB, CRP를 동시에 측정하였고 또한 후향적으로 환자에 대한 기본적인 특징과 정보, 심전도 소견, 합병증 발생, 심혈관 조영술 소견과 경색관련 혈관 수, 치료 및 치료결과 등에 대한 자료를 정리하여 분석하여 보았다. 이때 환자는 두 군으로 나누어 분석하였는데, 1군은 증가된 효소수가 1개 이하인 경우이고, 2군은 2개 또는 3개 및 좌주관상동맥을 포함한 경우로 하였다. 결과: 전체 130명의 환자가 대상이 되었고, 1군 40례, 2군 90례로 2군이 훨씬 많았다. 과거력에서 이전에 관동맥 성형술을 시술받은 경우가 2군에서 유의 있게 많았다(p<0.05). 이전의 약물 복용은 전체적으로 1군에서 많았으나 질산제 복용(p<0.05)을 제외하고는 의의가 없었다. 치료는 혈전용해제 사용이 오히려 1군에서 의의있게 많았으나(p<0.05), 합병증으로 쇽이나 폐부종을 동반한 경우가 2군에서 많았다. 하지만 본 연구에서는 6개월 추적 기간중의 사건 발생이나 합병증, 예후 결과에 대한 양군간의 차이를 발견하지 못했다. 결론: 급성 심근경색증 환자에게 다표지 인자를 이용한 접근법을 적용한 결과, 기본적으로 환자에 대한 몇 가지 정보, 즉 과거에 약물 투여 여부와 혈전용해제 사용, 혈관성형술을 시술 받은 경력과 같은 기초자료에 대한 제한적인 차이를 발견할 수 있었으나, 본 연구에서는 다표지 인자를 이용하여 추적기간중 환자의 상태와 예후를 평가하고 합병증을 조기에 예측한다든지 하는 중요한 역할을 발견하지 못하였다. 그래서 향후 이에 대한 제한점을 해결한 더 보완된 연구가 필요할 것으로 사료된다.
Park, Gab-Man;Younghun Jung;Kim, Jae-Jin;Chung, Pyung-Rim
The Korean Journal of Malacology
/
v.13
no.2
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pp.91-96
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1997
한국산 논우렁이(CIpangopaludina chinensis malleata)와 큰논우렁이 (C. japomica)는 형태학적으로 유사하여 그 감별이 용이치 않다. 본 연구는 이 두 종을 대상으로 28S rDNA DI유전자를 7종의 제한효소로 처리하여 PCR-RDLP기법으로 그 절편을 비교하였다. 절편 상호간에는 차이점을 관찰할 수 없었으나, 두 종으로부터 분석된 28S rDNA DI 유전자의 염기서열에서는 4 부위에서 종간 차이를 보였다.
한국산 조류 중 박새속(genus Parus)에 속하는 4종 Parus major wladiwostokensis (박새), P. ater amurensis(진박새), P. palustrius hellmayri(쇠박새) 및 P. varius varius(곤줄 박이)를 대상으로 이들의 계통적 유연관계를 구명하기 위하여 mtDNA분석을 실시하였다. 6 base를 인지하는 10개의 제한효소를 처리하여 얻어진 mtDNA의 크기는 16.6~17.0Kb였으며 Pst I과 Pvu II는 종간 차이가 뚜렷하였다. 각 종간의 절편양상을 비교하여 Parus속의 종 간 분화정도를 비교한 결과 P. m. wladiwostokensis와 P. a. amurensis의 유전적 근연관계 가 가장 가까웠고(p=0.073, F=0.294) P. a. amurensis와 P. v. varius는 비교적 현저한 유전 적 차이를 보였다.(p=0.119, F=0.143). Brown 등 (1979)의 공식을 이용하여 박새속 4종의 분 화시기를 추정한 결과 이들은 후기 선신세(Pliocene)와 초기 홍적세(Pleistocene) 사이에 분 화된 것으로 추정되었다.
Purpose : Respiratory syncytial virus(RSV) is the major cause of lower respiratory tract infection in infants and young children. This study was performed to analyze antigenic and genetic variation of G protein of subgroup A RSV. Methods : One hundred seventy-nine strains isolated at the Seoul National University Children's Hospital over 8 years-period from 1990 through 1998 were analysed for antigenic and genetic variability. Analysis was made by reactivity with monoclonal antibodies raised against RSV, and by restriction mapping and, for selected strains, nucleotide sequencing following amplification of full sequence of G gene by reverse transcription-polymerase chain reaction. Results : Restriction fragment analysis of the amplified G protein gene revealed 23 restriction patterns, 12 of which included more than 2 isolate, and the most frequent genetic type comprised 30% of the strains. Indirect immunofluorescent staining with monoclonal antibodies revealed 6 antigenic types with one predominant pattern accounting for 91% of the total strains. The most frequent antigenic type had 21 restriction patterns, and some viruses with same restiction pattern had different monoclonal antibody reaction pattern. Nucleotide sequence homology of subgroup A was 91~93% between reference(A2, Long) and Korean isolates, 93~99% among Korean isolates. Maximum-parsimony analysis demonstrated that Korean isolates were distinct from reference strains and subgroup A strains were clustered in 4 groups. Conclusion : The restriction analysis pattern of G protein gene identified greater diversity within subgroup A than was seen with the monoclonal analysis and a variety of antigenic and genetic types of RSV are circulating in Korea which are different from reference strains or strains isolated from other countries.
Phylogenetic studies were conducted to evaluate the taxonomic relationships among 27 taxa, including 2 outgroups of Korean Campanulaceae, using PCR-RFLP analysis and ITS sequences. In the PCR-RFLP analysis, 15 restriction endonucleases produced 244 restriction sites and size variations from the chloroplast DNA, and 59 restriction sites (24%) showed polymorphism. The length of the ITS regions ranged from 588 bp to 797 bp. The sequence divergence including the outgroups is 0-39.36%. Phylogenetic analyses based on PCR-RFLP and ITS data suggest that Campanulaceae is monophyletic; Codonopsis and Platycodon forms an independent clade; the Peracarpa and Asyneuma clade is a sister to the Adenophora-Hanabusaya clade; Campanula is monophyletic; and Wahlenbergia basally branches within the ITS tree, whereas they are placed between Campanula and the Codonopsis-Platycodon clade in the PCR-RFLP tree; Hanabusaya is placed within the Adenophora clade; and Adenophora is paraphyletic and shows discordance to the infrageneric classifications based on morphological data. The present results show two data sets, largely congruent at the generic level, but their phylogenetic positions, in particular the Wahlenbergia and Hanabusaya and the infrageneric classifications in Adenophora, show some incongruence.
Restriction fragment length polymorphism (RFLP) of a DNA has been a useful tool for analyzing genetic variation. This research was performed to establish an RFLP analytic method on the mitochondrial DNA (mtDNA) of the beet armyworm, Spodoptera exigua (Hiibner). To do this, total size of the mtDNA was measured and polymerase chain reaction (PCR) primers were selected. Its mitochondrial genome size was ca. 16kb. From a serial PCR test of 29 primers refered to the compilation of Simon et al. (1994), 22 primers were selected to amplify its mtDNA fragments. These primers resulted in short (300-700 bp) or long (1000-2000 bp) DNA products which represented a total or partial sequence of each of CO-I, CO-11, Cyt-B, ND-1, 12s rRNA, 16s rRNA, and some tRNAs. PCR-RFLP was performed in some variable mtDNA regions with 8 kinds of 4bp recognizing restriction enzymes. Different populations from Andong, Kyungsan, and Sunchun did not show any restriction site polymorphisms but had some length variation in certain regions of mtDNA.
미꾸리속 어류 2종의 유전적 차이를 알아보기 위하여 염색체 분석과 미토콘드리아 DNA(mtDNA) 분석을 실시하였다. 일반염색에 의한 핵형 분석 결과 미꾸리(2N=50)와 미꾸라지(2N=48)는 염색체수에 차이가 있었으며. N-banding 분석 결과 두 종간에는 인형성 부위의 위치와 크기에 차이가 있었다. C-handing 겪과 미꾸라지는 1번 염색체쌍 동원 체부위에 넓게 C-band플 갖고 있었다. 미꾸리속 어류 2종의 mtONA를 7개의 6-base cutting 제한효소로 처리하여 절편 양상을 비교. 분석한 결과 2종 공히 mtDNA의 genome 크기는 약 16.OKb였으며 fragment homology(F)에서 미꾸리의 종내 집단간의 F값은 0.674. 미꾸라지는 0.862로 유사하게 나타났으나, 종간 F값은 0.207(0.074-0.417)로 낮았다 염기치환율은 미꾸리가 p=0.021, 미꾸라지는 p=0.002로 미꾸라지가 미꾸리에 비해 매우 낮은 염기치환율을 보였고. 종간 평균 염기치환율은 p=0.104로 차이 를 나타냈다. MtDNA 분석과 핵형 분석 결과 미꾸라지는 Robertsonlan translocation의 결과 미꾸리로 부터 분화된 것으로 추정 되었다.
The FBJ murine osteosarcoma viral oncogene homolog B (FosB) gene is located at chromosome 19, and encodes 43 Kda protein. Functionally, the FosB gene is important for differentiation, development, and pathogenesis. Furthermore, the FosB gene is suggested as possible biomarker for tracing disease prognosis. In this study, we constructed plasmid containing a FosB promoter region and evaluate its promoter activity. We analyzed the putative promoter region in FosB genomic DNA using bioinformatics program, and we found important regulatory elements in 1 Kb upstream from transcription start site (TSS). Therefore, we performed polymerase chain reaction (PCR) amplification on region from-1,555 upstream to +73 of the FosB genomic DNA, and PCR product was inserted into TA vector to create the $TA-1^{st}FosBp$ plasmid. We then prepared the primer sets, which contain a restriction enzyme site for Kpn1 and Nhe1, in order to reinsert into the TA vector to prepare $TA-2^{nd}FosBp$ plasmid. It was finally subcloned into pGL3-luc vector after enzyme cutting. To evaluate whether the cloned plasmid is useful in cell based experiment, we performed luciferase assay with pGL3-FosBp-luctransfection. FosB promoter activity was increased compared to empty vector, and this activity was significantly increased by treatment of doxorubicin and taxol. We obtained consistent data on regulation of FosB gene expression after anticancer drug treatment using Western blot analysis. The results suggest that promoter cloning of the human FosB gene is very useful for studying gene expression and analyzing biomarkers.
Oh J. D.;Park M. H.;Kong H. S.;Lee H. K.;Jeon G. J.;Yeon S. H.;Sang B. D.;Choi C. H.;Cho B. W.
Korean Journal of Poultry Science
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v.32
no.1
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pp.29-34
/
2005
This study was conducted to estimate the effects of genotype for chicken major histocompatibility complex (MHC) B-LB genes on economic traits. To detect polymorphism, 400 bp fragments of MHC B-LB genes were obtained and sequenced. After digestions using restriction enzyme Hea III, two restriction enzyme sites were observed. There were two mutations at position 427 and 651 those were decided as Type I and Type II, respectively. Using RFLP analyses, type I were genotyped to TT, TC and CC, and type II to MM, Mm and mm. The relatively higher TC genotype frequencies (0.8) of Type I and Mm genotype frequencies (0.88) of Type II were observed in Korean native chickens. The effects of the genotype on 150 days body weight trait were investigated by the associations of CC and Mm genotypes (P<0.05) in Korean native chickens. This result suggests that a significant association exists between the SNP and 150 days body weight.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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