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Hamster test를 이용한 가축정자의 수정능력 검정 II. 정액배지 및 X-선조사가 돼지정자의 Hamster test에 미치는 영향 (Assessment of the Fertilizing Capacity of Domestic Animal Spermatozoa by Hamster Test II. Effects of incubation medium and X-ray irradiation on hamster test for boar spermatozoa)

  • 김용준;지동범
    • 한국임상수의학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.373-390
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    • 1992
  • To assay the fertilizing capacity of domestic animal spermatozoa by hamster test, semen were collected from 13 boars(Duroc. Landrace and Yorkshire) which had been proved to be fertile in the past. then, were preserved in BWW medium or in raw state at 18$^{\circ}C$ or at room temperature. The preserved semen were given each different treatment according to the experimental design and coincubated with zona-free hamster ova for 5 hours. The ova were stained by lacmoid and examined under phase contrast microscope to investigate the rates of ova bound with sperm(sperm binding). ova penetrated by sperm(penetration) and formation of a male pronucleus(pronucleus formation) and also numbers of both bound and penetrated sperm per ovum. Between BWW and TBM medium for boar sperm. no difference in the results of hamster test was obtained. The boar spermatozoa in BWW medium, BWW with caffeine, BWW with heparin, and BWW with both caffeine and heparin showed no difference in the results of hamster test. The boar spermatozoa in BWW medium containing both calcium and RSA showed considerably higher rates of sperm binding, penetration and pronucleus formation as well as higher numbers of both bound and penetrated sperm than those not containing calcium with or without BSA( p<0.01) and also the same results higher than that containing calcium without BSA( p< 0.05). The boar spermatozoa irradiated by X-ray(70 KVP, 20mA) for 3 seconds. then, maintained at 18$^{\circ}C$ for 18 hours showed considerably lower rate of sperm binding than all the other groups including the control and X-ray groups irradiated by smaller dose or maintained for shorter period(p<0.01), and also showed lower number of bound sperm than the other groups(p<0.01, p<0.05). All the control groups of both raw and diluted sperm in BWM medium showed higher rates of sperm binding, penetration and pronucleus formation as well as higher number of penetrated sperm than all the X-ray groups irradiated for 3 seconds(70KVP, 20mA) and maintained for either 3 or 18 hours (p<0.01, p<0.05). At the same time the control groups of diluted sperm showed considerably higher rates of sperm penetration and pronucleus formation than the control group of raw sperm( p<0.01). These results indicates that fertile boar sperm showed considerably lower rates In the results of hamster test, when incubated in the medium without calcium and irradiated by X-ray than when incubated in the medium with calcium and not irradiated by X-ray, respectively, to prove consequently that hamster test would be of great value in assaying the fertilizing capacity of boar spermatozoa.

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삼투질농도와 $Ca^{2+}$이 문치가자미 (Limanda yokohamae) 정자의 운동성에 미치는 영향 (Effects of Osmolality and $Ca^{2+}$ on Sperm Motility in Marbled Sole, Limanda yokohamae)

  • 고강희;장영진;임한규
    • 한국수산과학회지
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    • 제30권5호
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    • pp.809-815
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    • 1997
  • 문치가자미의 성숙한 수컷 15마리를 재료로 하여 삼투질농도와 $Ca^{2+}$이 정자의 운동성에 미치는 영향을 파악하였다. 문치가자미 정자는 전해질 및 비전해질 용액에서 정장의 삼투질농도인 $351{\pm}23.4mOsm/kg$ 이하의 저장액에서 운동이 억제되었으나, 삼투질농도 $466\~l,185mOsm/kg$에서는 활발한 운동을 보였으며, 1,698 mOsm/kg 이상에서 다시 운동이 중지되었다. 인공해수를 희석액으로 하여 pH를 달리하였을 때, 정자는 $pH\;5\~9$에서 운동지수 $3.75\~4.00$로 운동성이 활발하였으나, pH 4에서는 운동지수 2.50로 미약하였다. $Ca^{2+}$의 특이 chelator인 EGTA가 포함된 $Ca^{2+}$ 결여 인공해수 (tris-HCl, pH 7.4)에 정액을 희석하였을 때, EGTA의 농도 증가에 따라 정자 운동성이 낮아졌으며, 3mM 이상의 농도에서는 완전히 정지되었다. 운동이 억제된 정자에 $Ca^{2+}$을 서서히 첨가한 결과, $Ca^{2+}$ 농도 0.25mM 이상부터 운동이 재개되었다. 또한 인공해수속의 정자는 calmodulin 억제제인 TFP의 농도의 증가에 따라 운동성이 감소하여 0.5mM에서 완전히 정지하였다.

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자기장이 웅성 생쥐의 정액성상과 장기무게에 미치는 영향 (Effect of Magnetic Field Exposure on Semen Characteristic and Organ Weight in Mice)

  • 김용배;박동헌;박춘근;김정익;정희태;양부근
    • 한국가축번식학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.53-59
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    • 2002
  • 웅성 생쥐에 자기장을 15일 동안 1일 5시간씩 60G의 강도로 노출시킨 결과, 정자농도는 대조구와 자기장 15일 처리구가 각각 25.1$\pm$6.5$\times$$10^{6}$$m\ell$와 15.7$\pm$5.3$\times$$10^{6}$$m\ell$로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 낮게 나타났다(P<0.05). 생존율은 대조구와 자기장 15일 처리구가 각각 34.4%와 29.3%로서 처리구가 대조구에 비하여 낮게 나타났지만 유의적인 차이는 인정되지 않았다(P〉0.05). 기형율은 대조구와 자기장 15일 처리구가 각각 11.7%와 18.0%로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 높은 성적을 나타냈다(P〉0.05). 체중과 번식기관 무게는 대조구와 자기장 처리구간에 차이가 인정되지 않았다. 장기무게중 간, 신장은 대조구와 자기장 처리구간에 차이가 인정되지 않았으나, 비장은 대조구와 자기장 15일 처 리구가 각각 0.116g과 0.227g으로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05).

Bisphenol A 투여가 웅성 생쥐의 정액성상과 장기무게에 미치는 영향 (Effect of Bisphenol A Administration on Semen Characteristic and Organ Weight in Mice)

  • 김용배;박동헌;박춘근;김정익;정희태;양부근
    • 한국가축번식학회지
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    • 제26권1호
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    • pp.25-32
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    • 2002
  • 웅성생쥐에 일정량의 BPA를 15일과 30일간 투여한 결과, 총정자수는 15일과 30일 대조구가 각각 25.1$\pm$6.5$\times$$10^{6}$$m\ell$ 및 23.7$\pm$6.7$\times$$10^{6}$$m\ell$, BPA 15일과 30일 처리구가 각각 17.0$\pm$6.6$\times$$10^{6}$$m\ell$ 및 19.3$\pm$5.7$\times$$10^{6}$$m\ell$로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 낮게 나타났다(P<0.05). 생존율은 15일과 30일 대조구가 각각 34.4$\pm$12.1% 및 34.0$\pm$9.7%, BPA 15일과 30일 처리구가 각각 25.6$\pm$7.6%와 28.6$\pm$5.8%로서 처리구가 대조구에 비하여 낮게 나타났지만 유의적인 차이는 인정되지 않았다(P〉0.05). 기형율은 15일과 30일 대조구가 각각 11.7$\pm$3.5% 및 15.1$\pm$3.8%, BPA 15일과 30일 처리구가 각각 18.5$\pm$6.4% 및 22.2$\pm$4.5%로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 높게 나타났다(P〉0.05). 체중과 번식 기관 무게는 BPA 15일과 30일 처리구에서 처리구간에 차이가 인정되지 않았다. 장기무게중 간, 신장은 BPA 15일과 30일 처리구에서 처리구간에 차이가 인정되지 않았으나, 비장은 15일과 30일 대조구가 각각 0.116 $\pm$0.0169 및 0.117$\pm$0.016g, BPA 15일과 30일 처리구가 각각0.216$\pm$0.0789 및 0.222$\pm$0.1149로서 처리구가 대조구에 비하여 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05).

한국의 호스피스완화의료정책 (Hospice & Palliative Care Policy in Korea)

  • 김창곤
    • Journal of Hospice and Palliative Care
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    • 제20권1호
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    • pp.8-17
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    • 2017
  • 종합적인 보건시스템을 지원하기 위한 완화의료정책의 개발과 강화가 세계적으로 강조되고 있다. 우리나라에서는 암정복 10개년 계획과 국가암관리종합계획의 기틀 하에 암정책의 일환으로, 호스피스완화의료정책이 시행되어왔고, 2003년 암관리법(Cancer Control Act)을 제정하여 법적 근거를 마련하였으며, 최근 호스피스 완화 의료 및 임종과정에 있는 환자의 연명의료결정에 관한 법을 제정하여 시행할 예정이다. 호스피스완화의료정책의 대상은 최근 관련법의 제정에 따라, 말기암환자에서 암(Cancer), 후천성면역결핍증(Acquired immune deficiency syndrome, AIDS), 만성 폐쇄성 호흡기질환(Chronic Obstructive Pulmonary Disease, COPD), 만성간경화(Chronic Liver Disease/Live Cirrhosis) 등으로 확대되었고, 급여체계는 2015년에 모든 의료기관에 일당 정액수가와 행위별 수가의 복합지불방식으로 완화의료 건강보험제도가 시행되었다. 전달체계관련 건강보험제도는 입원형과 자문형, 그리고 가정형으로 구분되고, 완화의료전문기관의 지정 평가 지원제도가 운영되고 있으며, 재원체계는 건강보험기금과 국가지원금으로 조달되고 있다. 호스피스 완화의료 관련법의 시행에 앞서, 정책대상의 사회적 합의가 요구되며, 낮은 급여체계의 현실화, 민관협력을 통한 호스피스완화의료 표준설정과 전문요원양성, 질 관리 및 평가체계정립, 그리고 장기요양보험과 호스피스기금 등을 활용한 안정적인 재정체계를 마련해야 할 것이다.

제주흑우 동결정액 제조 시 Low Density Lipoprotein (LDL)의 첨가가 동결 융해 후 정자의 성상에 미치는 영향 (Effect of Low Density Lipoprotein (LDL) on Motility, Viability, Membrane Integrity and Acrosome Integrity of Frozen-thawed Sperm in Korean Jeju Black Bull)

  • 오신애;최선호;고민희;강태영;오영미;정영호;조원모
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제27권3호
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    • pp.155-162
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    • 2012
  • This study was designed to determine whether low-density lipoporoteins (LDL) extracted from egg yolk in extender improve the function of Korean Jeju Black Bull semen. The semen was cryopreserved with 5% ethylene glycol (EG) or 7% glycerol (G) extenders containing 10% egg yolk (EY), 4% LDL and 5% EY or 8% LDL. Frozen-thawed sperm were evaluated sperm motility, viability, membrane integrity and acrosome integrity. Post-thawed sperm motility has been significantly higher (p<0.05) in 4% LDL + 5% EY ($69.00%{\pm}4.18$; EG and $63.00%{\pm}9.75$; 7% G) than 8% LDL ($57.00%{\pm}5.70$; EG and $52.00%{\pm}4.47$;G). Treatment of 4% LDL + 5% EY-EG ($66.85%{\pm}5.06$) has been significantly improved sperm viability compared to other treatments except 10% EY - EG. Moreover, in membrane integrity, swollen sperm ratio has been only significantly increased (p<0.05) in 4% LDL + 5% EY - EG ($64.65%{\pm}6.10$) among all treatments. In assess to detect acrosome integrity, especially, AR pattern ratio has been significantly decreased (p<0.05) in 4% LDL + 5% EY - EG among all treatments. In sperm viability as time passes, between 4% LDL + 5% EY and 10% EY, there was no significant difference, but 8% LDL was significantly decreased sperm viability in EG (1 and 2 hrs) and G (30 min, 1, 2, 5 and 12 hrs) extender. However, there were no significant differences among all treatments except 8% LDL-G in sperm membrane integrity. 8% LDL-G has been significantly decreased swollen sperm ratio at 5 hrs after thawed. It is concluded from these results that 4% LDL + 5% EY to the freezing extender showed more positive effect on the frozen-thawed spermatozoa in Korean Jeju Black bull.

돼지 난모세포의 성숙과정에서 Phosphatidylinositol 대사의 기질 및 억제인자의 영향 (Influence of the Substrate and Inhibitors Related to Phosphatidylinositol Metabolism in the Maturation Processes of Porcine Oocytes)

  • 강승률;양보석;조인철;이성수;정진관
    • 한국수정란이식학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.91-98
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    • 2001
  • 본 연구는 phosphatidylinositol 대사의 기질 및 억제물질이 돼지 난모세포의 체외 성숙·수정에 미치는 영향에 대하여 실험을 하였다. 난모세를 inositol (250 mM) 첨가 또는 무첨가한 mTLP-PVA 배양액에서 46시간 체외배양하였다. 성숙이 완료된 난모세포는 신선 돼지정액을 이용하여 6시간 동안 mTALP-PVA 배양액에서 체외수정을 시켰다. 수정 후 6시간에 이들 난모세포를 10% 혈청을 첨가한 TCM-199 배양액에서 추가로 12시간 배양하였다. 제 2성숙분열중기로 성숙한 남모세포의 비율은 대조구 (67.3%)에 비하여 inositol (81.4%)을 첨가하여 46시간 체외성숙시킨 난모세포에서 더 높았다 (P<0.05). 체외수정 후 18시간에 웅성전핵 형성율은 대조구의 27.3%보다 inositol (42.0%)을 첨가한 배지에서 성숙시킨 난모세포에서 더 높게 나타났다 (P<0.05). 난모세포의 성숙에 대한 inositol의 작용을 조사하기 위하여 LiCl (10 mM) 또는 dbcAMP (0.5 mM)를 첨가한 배지에서 난모세포를 배양하였을 때, 이들 두 약제는 난모세포의 성숙을 억제하였다 (P<0.05). 그러나 이 두 약제의 억제작용은 inositol 첨가에 의해 해제되어 대조구 수준까지 성숙율이 개선되었다. DbcAMP와 verapamil은 상승작용을 하여 난모세포의 성숙을 억제하였다. Verapamil을 단독으로 첨가하였을 때, 난모세포의 성숙분열 개시에는 영향이 없었으나 제 2성숙분열중기로의 성숙은 억제되었다. 이상의 결과로부터, inositol 첨가에 의해 PI-Cycle이 활성화되어 간모세포의 핵 및 세포질 성숙과 막의 변화가 유도되어 난모세포의 성숙이 inositol 첨가에 의해 개선되었다는 것이 시사되었다.

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육용종웅계의 사양방법이 체성장 및 성 성숙에 미치는 영향 (Effects of the Feeding Methods on Body Growth and Sexual Maturity in Broiler Breeder Males)

  • 연성흠;이규승;정일정;정선부
    • 한국가금학회지
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    • 제13권2호
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    • pp.197-208
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    • 1986
  • 본 시험은 6가지 다른 사양방법이 White Plymouth Rock 육용종 웅계의 생체중, 정소, 계관 그리고 뇌하수체의 발육 및 성성숙에 미치는 영향을 구명하기 위하여 부화후부터 22주령까지 2주간격으로 생체중, 정소, 계관 그리고 뇌하수체의 중량이 조사되었으며, 또한 정소조직과 정액성상이 조사되었다. 그 얻어진 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 생체중, 정소, 계관의 발육은 10주령 이후부터 무제한급이군들이 제한급이군들(무제한급이군들의 70%급이)보다 2주 더 빠름을 나타내었다. 정소 및 계관의 급증시기는 무제한급이군들에서 20주령이었고, 제한급이군들에서 22주령이었다. 2. 뇌하수체의 무게는 부화후부터 22주령까지 4주령, 14주령, 16주령을 제외하고 각 주령별, 각 처리군간에 유의성이 나타나지 않았다. 뇌하수체의 중량은 주령이 경과하면서 완만한 증가를 나타내었다. 3. 22주령까지에서 주령, 생체중, 정소, 계관 및 뇌하수체간에는 고도의 유의적인 상관관계를 나타내었다. 4. 세정관의 관경과 강경은 부화후부터 10주령까지 점진적으로 증가되다가 무제한 급이군들에서는 12주령부터 제한급이군들에서는 14주령부터 급증하기 시작하였고, 그 후에도 22주령까지 계속증가되었다.

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개에서 Hamster test의 이용을 높이기 위한 정액처리조건 (Semen treatment to enhance the use of hamster test in the dog)

  • 김용준;이해이
    • 대한수의학회지
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    • 제33권2호
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    • pp.337-343
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    • 1993
  • To determine the test conditions to enhance the use of hamster test in dogs, semen were collected from four dogs which had been proven to be fertile in the past and then preserved in BWW (Biggers, Whitten, Whittingham) medium for about 20 hours. The semen were given each different treatment according to the experimental design and coincubated with zona-free hamster ova for 5 hours. The ova were stained by lacmoid and examined under phase contrast microscope to investigate the rates of ova bound with sperm(sperm binding) and ova penetrated by sperm (penetration), and also numbers of both bound and penetrated sperm per ovum. In comparison of different concentrations of canine sperm, the rate of sperm binding was higher in $1.5{\times}10^8$, $1{\times}10^8$, and $5{\times}10^7$ sperm concentrations than $5{\times}10^5$ concentration(p<0.01), and also than $5{\times}10^6$ concentration(p<0.05), respectively. The number of bound sperm per ovum was considerably higher in $1.5{\times}10^8$ sperm concentration than $5{\times}10^7$, $1.5{\times}10^6$, and $5{\times}10^5$ concentrations(p<0.01). The rate of penetration was considerably higher in $1.5{\times}10^8$ and $1{\times}10^8$ sperm concentrations than $5{\times}10^5$ concentration,(p<0.01), and also the higher result of penetration was shown in $5{\times}10^7$ than $5{\times}10^5$ (p<0.05). The number of penetrated sperm per ovum was considerably higher in $1.5{\times}10^8$ sperm concentrations than $5{\times}10^5$(p<0.01), and also the higher number was shown in $1{\times}10^8$ than $5{\times}10^5$ (p<0.05). In comparison of the different preincubation period of canine spermatozoa, no difference was obtained in the results of hamster test among the preincubation periods of 4 hours, 18~24 hours and 48 hours. The canine spermatozoa in BWW medium with $Ca^{2+}$(1.3mM) and without FCS(fetal calf serum), with both $Ca^{2+}$(1.3mM) and FCS, with $Ca^{2+}$(2.6mM) and without FCS, and with both $Ca^{2+}$(2.6mM) and FCS showed no difference in the results of hamster test.These results indicated that the appropriate concentration of sperm should be given in hamster test for dog sperm.

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물리.화학적 처리에 의한 소 정자세포구성분의 분리 (Isolation of Bovine Spermatozoal Components by Physical or Chemical Treatments)

  • 최승철;천장혜;이상호
    • 한국가축번식학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.339-346
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    • 1994
  • 정자의 구조와 기능을 이해하기 위해서는 정자세포구성분의 분리가 필요하다. 본 실험은 동결융해된 한우정액에 다양한 물리·화학적 처리를 하여 효과적인 정자세포구성분의 분리방법을 확립하고자 실시하였다. 물리적 분리방법으로는 vortexing 처리, 26 gauge needle 또는 strained 26 gauge needle을 1ml 주사기에 부착시킨 후 반복된 pumping, 동결보존액없이 반복된 동결융해처리등을 시행하였다. 또한, 화학적인 분리를 위해 trypsin, dithiothreitol, sodium dodecylsulfate, mercaptoethanol 등을 사용하였다. 모든 처리구중에서 가장 효과적인 정자두부와 미부의 절단을 strained 26 gauge needle이 부착된 주사기를 사용한 반복된 pumping에 의해 얻어졌다. 이러한 처리에 의해 95∼100%의 높은 정자구성분의 분리가 이루어졌다. 분리된 정자구성분의 두부표면의 보존여부를 알아보기 위해 250g/ml FITC-UEA 1 염색을 실시하였지만 특별한 두부표면변화는 관찰되지 않았다. 다른 물리적 처리방법들도 높은 정자구성분의 분리결과를 보여주었지만, strained 26 gauge needle를 사용한 방법에 비해서는 분리효율, 시간등 여러면에서 비효율적이었다. 화학적 처리에 의한 정자구성분의 분리결과는 물리적 처리에 비해 효과적이지 못했다. 분리된 정자두부와 미부를 각각 회수하기 위해 sucrose 용액을 2M, 1M, 0.5M, 0.25M 순으로 시험관에 넣은 후 1,000rpm에서 15분간 원심분리한 결과, 1M과 2M의 경계부분에 형성된 정자두부층을 얻을 수 있었다. 정자구성분의 효과적이고 간편한 분리방법이 본 실험에 의해 확립되어졌으며, 위의 방법에 의해 분리, 회수된 정자구성분은 생화학적 연구, 난자활성화기작의 이해등 다양한 응용연구의 기초자료로서 이용될 수 있을 것이다.

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