흰쥐를 실험 동물로 하여 각간핵의 신경세포의 미세구조와 신경연접 기구를 확인하고, 고삐핵으로 부터 각간핵으로 투사되는 축삭종말의 형태를 밝히기 위하여 고삐핵을 전기적으로 제거(electrolytic lesion)한 후 간각핵에서 퇴행성 변화를 보이는 축삭종말을 전자현미경으로 관찰하였던 바, 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 흰쥐 각간핵에는 크기에 따라 대신경세포 ($27\\times12 \\mum$)와 소신경세포 ($15\\times10 \\mum$)가 구별되었다. 대신경세포는 그 세포질내에 잘 발달된 소기관들이 있었으며, 핵에는 약간의 핵막 함입이 형성되어 있었다. 소신경세포는 소기관들이 빈약하게 발달되어 있었고 핵은 매우 깊은 핵막의 함입이 이루어져 있었다. 이들 대, 소신경세포의 구성비는 3:7 정도로 소형세포가 많았다. 2. 각간핵의 신경종말의 현접형태는 그 종말내에 포함되어 있는 연접소포의 크기와 모양 및 분포 상태, 그리고 연접부에 형성된 연접치밀질의 발달에 기초를 두어 관찰한 결과 4형이 구별되었다. 제I형 연접은 작고 둥근 연접소포 (직경 40 nm)를 포함하여, 비대칭성 연접을 이루었고, 본연접이 가장 많이 출현하였다(40%). 제II형 연접은 크고 원형의 연접소포(직경 45 nm)를 포함하며, 대칭성인 연접치밀질을 형성하였고, 그 출현율은 18%였다. 제III형 연접은 원형 및 난원형 (직경, $25\\times40 nm$)이 섞여 있었으며, 대칭성인 연접을 형성하고 있었고, 33%의 출현율을 보였다. 제IV형 연접은 타원형의 연접소포 (직경, 25\\times50 nm$)를 갖고 있었으며 대칭성인 연접을 띠고 있었다.
실험동물에 xylene의 반복 투여가 이물질의 대사에 어떠한 영향을 미치는지를 알아보기 위하여 흰쥐에 m-xylene과 olive oil의 동량혼합액을 체중 100 g당 0.25 ml씩 2일 간격으로 1, 4, 8, 12 및 16회 복강으로 투여한 다음 마지막 투여 24시간 후에 처치하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 요 중 m-methylhippuric acid함량은 m-xylene 4회 투여군의 경우 1회 투여군에 비하여 약 56%의 유의한 증가를 보였으며 이후 12회 투여까지 유사한 결과를 나타내었으나 m-xylene 16회 투여시에는 xylene 1회 투여군 치와 유사한 치로 감소되었다. 그리고 간조직의 microsomal aniline hydroxylase와 alcohol dehydrogenase 활성은 m-xylene 12회 투여시 까지는 대체적으로 점진적인 증가를 보였으나 이후 16회 투여시에는 12회 투여군에 비하여 유의한 감소를 보였다. 또한 aldehyde dehydrogenase 활성은 m-xylene투여 회수에 비례해서 전 실험기간 동안 감소되었으며 특히 16회 투여군에서 본 효소활성의 현저한 감소를 보였다. 한편 본 실험조건에서 투여기간에 따른 전자현미경적 미세구조의 변화는 초기에 활면소포체의 증식이 보이다가 16회 투여군에서는 활면소포체가 감소되고 조면소포체가 증가되었다. 이상 실험결과는 흰쥐에 있어서 xylene투여 회수에 따라서 요 중 m-methylhippuric acid의 농도 변동이 초래되며 이는 효소단백 유도에 따른 xylene 대사효소 활성 변동에 기인된 결과로 생각된다.
The metabolism of Entamoeba histolytica would be affected by various environmental factors, and alteration of the environment was known to afEect the fine structure of 5. histolytica. The present study was designed electronmicroscopically to investigate the ultrastructure and enzyme activities in the aEonic and conventional strains of 5. histolytica. The trophozoites of axenically cultivated HK-9 strain and conventional YS-27 and YS-49 strains of 5. histolytica were collected and liKed with 4% paraformaldehyde/0.1M cacodylate buffier(pH 74), After washing them by centrifugation, 1% warm agar was added in the sediment. Solidified agar with the trophozoites was cut into $lmm^3$ cubes, and incubated in the various substrates to observe enzyme activities. Then, the specimen was post-fixed with 3% glutaraldehyde/0.1M cacodylate buffer (PH 7.4) and 1% osmium tetroBide/0.1M cacodylate buffier (pH 7.4) , dehydrated in ascending ethanol series and embedded in epoxy resin. These were sectioned on an ultramicrotome and observed with a transmission electronmicroscope. The procedures for the observation of the fine structure were same as the above, except for the incubation in the substrate. The sections were stained with uranyl acetate and lead citrate. For the observation of the surface of the amoebae, scanning-electronmicroscopy was carried out. The results obtained in the present study are summarized as follows: 1. The fuzzy coat around double-layered plasma membrane of 5. histolytica was more irregularly and densely distributed in the conventional strains (YS-27, YS-49 strains) than in the axonic strain (HK-9 strain). 2. The endosomes, button bodies and chromatin material were surrounded by a double-layered nuclear membrane having scattered nuclear fores. The paranuclear body, mono- or double-layered vacuoles, vacuolar membrane whorls, rosette-like cylindrical bodies, aggregation of cylindrical bodies and helical bodies were found in the cytoplasm of the amoebae. Helical bodies and glycogen granules were generally abundant, while a few smooth endoplasmic reticula were observed in the cytoplasm. 3. Alkaline phosphatase activity was mainly demonstrated in the plasma membrane, limiting membranes of vacuoles and smooth endoplasmic reticula. ATPase activity was observed in the nucleus, limiting membranes of vacuoles and vacuolar membrane whorls. 4. Acid phosphatase activity was commonly demonstrated in the limiting membranes an contents of vacuoles, Iysosome-like organelles, plasma membrane and the button bodies in the nucleus. The activity was more weakly demonstrated in the HK-9 strain than in the other conventional strains of 5. histolytica. No peroBidase activity was observed in the amoeba strains employed in the present study. 5. With a scanning electron-microscope, no distinct structural differences were observed between the amoeba strains. All the trophozoite forms of the amoebae showed crater-like depressions and rugged features on the outer surface.
최근 가시아메바 각막염의 치료제로 새롭게 주목을 받고 있는 polyhexamethylene biguanide (PHMB)의 가시아메바에 대한 작용 기전을 알기 위해 각막염 유래 가시아메바 4 분리주에 대한 PHMB의 최저 살충 농도 (minimal cysticidal concentration; MCC)를 결정하고, 이 MCC의 PHMB로 처리한 포낭의 형태학적 변화를 투과전자현미경으로 관찰하였다. PHMB의 8시간과 48시간에 대한 MCC를 결정하였는데, 8시간 MCC는 KA/E1 $14.32{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$. KA/E2 $22.45{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, KA/E3 $21.54{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, 및 KA/E4 $23.59{\;} {\mu\textrm{g}}/ml$였다. 48시간 MCC는 KA/El $3.97{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, KA/E2 $7.49{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, KA/E3 $6.40{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ 및 KA/E4 $4.92{\mu\textrm{g}}/ml$로 나타났다. PHMB를 처리한 포낭에서는 포낭 내 amoeb고가 심하게 수축되고 이로 인해 포낭 내벽과 분리되는 형태학적 변화가 관찰되었다. 세포막 아래의 subplasmalemmal lipid droplet의 모양이 불규칙해졌다 심한 경우 세포질이 응집되고. 미토콘드리아의 cristae도 크게 감소하는 등 세포 내 소기관들도 모양이 심하게 변하였다. 포낭 내외벽은 그 형태가 비교적 잘 유지되었다. 이상의 변화들로 볼 때. PHMB는 세포막에 주로 작용하며, 세포 내 소기관들의 막에도 영향을 미치는 것을 알 수 있었다 가시아메바의 세포막의 lipidcomposition은 아직 잘 알려져 있지 않지만 PHMB에 의한 가시아메바 포낭에 대한 살충 효과는 environmental biocide로서 Escherichia col거 세포벽에 있는 acidic prlospholipids에 작용하여 살균 효과를 나타내는 것과 유사한 기전으로 일어날 것으로 사료된다.
U. unicinctus 난세포를 인공수정한 결과 수정 시기는 germinal vesicle (2n)기였으며 정자 중앙부에서 돌출한 actomere와 난모세포의 미세융모 끝에서 세포막 융합이 시작되는 것으로 관찰되었다. Germinal vesicle기에 수정이 가능하였으므로 pre-mitotic spindle이 관찰되지 않은 것으로 사료되었다. 수정 후 난모세포는 제1, 2감수분열을 수행하였으며 각각의 감수분열 장치들은 감수분열 말기에 난모세포막과 밀접한 구조를 형성하였고, 이 부위에서 극체가 형성되는 것을 볼 수 있었다. 극체 형성시 난모세포막은 세포분열의 관점에서 형태가 없는 것이 아니라 항-튜블린-FITC에 대한 활성구조를 형성하였으며, 각 감수분열 장치의 한쪽 극 (pole)과 어떤 복합구조를 형성하는 것으로 보인다. 제2극체 형성도 제1극체와 유사한 방법으로 형성되었으나, 제2감수분열 장치는 난모세포막의 접선에 평행하게 생성된 후 세포막을 향해 이동하면서 방추사의 양극성이 회전 (shift-rotation)하였고 접선에 수직으로 정렬하는 것을 볼 수 있었다. 난모세포의 감수분열 장치에서 방추사의 활성은 강하였으나 aster의 활성은 비교적 약한 것으로 보였다. 제2감수분열이 진행되는 동안 난모세포질에 머믈고 있던 정자는 점차 미래의 자성 전핵 형성부인 난모세포막 근접부로 이동하는 것이 관찰되었다. 난모세포막 근접부로 이동하는 동안 정자 aster의 활성은 점차 강해지는 반면 난모세포의 aster에서는 활성이 미약한 것으로 보아서 자웅 전핵융합을 주도하는 것은 정자 유래의 aster인 것으로 사료되었다. 제1난모세포의 감수분열 장치가 활성화되는 시기에 제1극체의 방추사에서도 강한 활성을 관찰할 수 있었다.
제주도 남제주군 성산읍 성산리 성산일출봉 부근에서 생포된 천연기념물(天然記念物) 보호조인 흰꼬리 수리로 부터 Ixodes signatus 약충을 채취하여 생리학적(生理學的) 주요감각기관(主要感覺器官)에 대(對)한 표면미세구조(表面微細構造)를 주사(走査) 전자현미경(電子顯微鏡)으로 관찰(觀察)하였든 바, 영상관찰(映像觀察) 및 사진분석(寫眞分析) 결사(結査) 얻어진 소견(所見)을 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 충체(蟲體) 배면(背面) 및 복면(腹面)에 대(對)한 관찰(觀察)에서 지문상(指紋狀)의 수많은 표면(表面)주름과 다양(多樣)한 크기의 강모(剛毛)들을 볼수 있었으며, 특(特)히 구기부(口器部)에 있어서 크고 잘 발달(發達)된 강모(剛毛) 또는 강모군(剛毛群)을 확인(確認)할 수 있었다. 2. 복면하부(腹面下部)의 항문(肛門)과 항문(肛門)주위에 위로부터 아래로 뻗어내린 항문구(肛門溝)가 뚜렷이 패여져 있었으며 1쌍(雙)으로된 항문엽(肛門葉)에는 각각(各各) 3개씩의 감각성(感覺性) 강모(剛毛)가 위치(位置)하고 있음을 확인(確認)하였다. 3. 측면(側面)에 부착되어 있는 기문판(氣門板) 관찰(觀察)에서 중앙부(中央部)에 단추모양의 구조물(構造物)이 있었으며 변연부(邊緣部)에는 수많은 기공(氣孔)들이 뚫려 있음을 확인(確認)하였다. 4. 사지(四肢)에 대(對)한 관찰결과(觀察結果), 기절(基節)의 외측돌기(外側突起)가 특징적으로 관찰(觀察)되었으며, 각(各) 마디 표면(表面)의 많은 강모(剛毛)와 제1지(第1肢)의 부절에서 화학수용기(化學受容器)의 기능(機能)을 갖고 있는 홀러씨 기관(Haller's organ)을 관찰(觀察)하였다. 5. 타원형(楕圓型)으로 열려있는 홀러씨 기관 주변에서 2종류(種類) 크기의 강모군(剛毛群)을 관찰(觀察)할 수 있었으며, 기관내부(器官內部)에는 갈쿠리 모양의 돌출형(突出型) 감각성(感覺性) 간상체 7개가 정렬되어 있음을 확인(確認)할 수 있었다.
1992년 1월 부터 12월 까지 노래미, Hexagrammos agrammus의 생식주기(生殖周期)에 따른 정소내(精巢內)의 cyst 세포(細胞)와 간질세포(間質細胞)의 미세구조적(微細構造的) 변화(變化)를 알기위해 전자현미경 및 광학현미경적 조사를 하였다. 성숙(成熟)한 정소내(精巢內)의 cyst 세포(細胞)들은 haematoxylin에 미약하게 염색되나 세포의 크기는 커진다. 이때 이들 세포는 여러개의 미토콘드리아와 소포체, 글리코겐 입자들 및 소수의 지방적(脂肪滴)들이 cyst 세포의 세포질내에 나타나고 있어, 성장기(成長期)의 cyst 세포들 보다 기능이 더 활발하게 보여 본(本) 종(種)의 cyst 세포는 영양공급, 분비 및 스테로이드 합성기능(合成機能)이 큰것으로 추정된다. 성숙(成熟) 및 산란기(産卵期)에 잘 발달된 간질세포(間質細胞)들은 관상의 크리스테를 갖는 간상(杆狀) 또는 구상(球狀)의 미토콘드리아들과 다수의 활변소포체들, 그리고 소포내(小胞內)의 미확인된 전자밀도 물질을 함유하고 있다. 따라서 본(本) 종(種)의 간질세포(間質細胞)들에는 포상(胞狀)의 핵(核)과 관상의 크리스테를 갖는 미토콘드리아와 활면소포체가 나타나고 있어 steroid간질세포(間質細胞)의 특징을 보이고 있으나, 간질세포(間質細胞)들의 Sudan black B에 대한 조직화학적 반응은 음성반응을 나타낸다.
요꼬가와흡충의 표피 미세구조 변화를 연구하기 위하여 탈낭된 피낭유층과 실험감염시킨후 2일, 1주, 4주에 횐쥐의 소장으로부터 회수한 충체의 표피를 주사전자현미경을 사용하여 관찰하였다. 1. 탈낭된 피낭유충의 표피는 가로로 얕게 주름져 있었으며, 전반부는 끝이 7∼8분지된 비늘모양의 가시로, 후반부는 2∼3분지된 가시로 덮혀 있었다. 감각유두는 두가지 형태가 관찰되었는데 제 I형 감각유두는 주로 구흡반과 복흡반주위에서, 제 II형은 구홉반에서만 발견되었다. 2. 감염 제 2일의 유약충은 원형질돌기의 골이 깊어지고 전반부에서는 혹모양으로, 후반부에서는 자갈모양으로 발달하였다. 전체적으로 가시의 크기가 커지고 간격이 넓어졌으며 배면전단에 끝이 9분지된 가시가 많이 출현하였다. 감각유두의 크기는 커졌으나 분포에는 변화가 없었다. 3. 감염 1주된 성충의 복흠반 표면은 융단모양으로 발달했으며, 후반부의 원형 질돌기는 후모양으로 되었다. 구흠반을 겅계로하여 전반부에는 끝이 7∼9분지된 가시가, 후반부에는 2∼4분지된 가시가 분포하는 것이 뚜렷해졌다. 감각유두가 더 커졌으며, 배면에는 제 I형 감각유두가 좌우대칭적으로 분포하였다. 4. 감염 4주된 성충의 표피는 더욱 분화되었으며 후반부는 융단모양의 원형 질돌기로 덮혀 있었다. 가시가 췰씬 길어졌으며 감각유두의 크기도 커졌다. 구흡반의 내면에서 능선형의 원헝질돌기들이 융기된 제 III형 감각유두가 관찰되었다. 이상의 결과에서 볼 때 요꼬가와흡충의 표피는 감염 첫날부터 4주까지 원헝 질돌기와 가시의 분화가 계속되는 것을 알 수 있었다. (이 연구를 위해 좋은 사진을 찍을 수 있도록 배려해 주신 주식회사 한국 ISI 이만희사장님과 관계직원 여러분께 감사드립니다.)
갈색띠매물고둥, Neptunea (Barbitonia) arthritica cumingii의 난자 형성과정 중 난황 형성, 생식주기 및 군성숙도를 광학 및 전자현미경적 관찰에 의해서 조사하였다. 초기 난황 형성 단계의 난모세포에서 골지복합체와 미토콘드리아가 지방적 및 난황 과립의 형성에 관여되었다. 후기 난황 형성 단계의 난모세포에서는 조면소포체와 다포체가 세포질 내에서 단백질성 난황 과립 형성에 관여되었다. 성숙 단계 난모세포에서 성숙 난황 과립은 주소체(중앙중심), 표면층, 그리고 이들을 둘러싼 한계막의 3가지로 구성되어 있다. 산란기는 5월과 8월 사이이고, 주 산란은 수온이 대략 $18{\sim}23^{\circ}C$로 상승하는 6월과 7월 사이에 일어나고 있다. 암컷의 생식주기는 초기 활성기($9{\sim}10$월), 후기 활성기($9{\sim}2$월), 완숙기($2{\sim}6$월), 부분 산란기($5{\sim}8$월), 회복기($6{\sim}8$월)의 연속적인 5단계로 구분할 수 있다. 군성숙도는 각고 $51.0{\sim}60.9mm$에서 53.1%이었고 각고 61.0mm 이상에서는 100%를 나타내었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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