본 연구에서는 저령(Grifola umbellata)의 균핵을 끓여 추출물을 얻어 이것이 실험용 생쥐에 미치는 영향을 조사하였다. 생쥐에 저령 열수 추출물(100 mg/kg 체중)을 1일 1회 2일간 복강투여 했을 때 암 발생의 원인이 될 수 있는 superoxide radical의 생성은 대조군에 비해 약 22% 가량 억제되었으나, 지방과산화는 대조군과 별다른 차이를 보이지 않았다. 반면에 항피로능은 대조군에 비해 추출물 투여군의 유영기간이 약 1.8배 가량 증가되어 저령의 열수 추출물에 항피로 효과성분이 있음을 알 수 있었다.
저령의 균획으로부터 3개의 알카로이드와 2개의 스테로이드 화합물을 분리하였다. 단리된 물질들은 NMR, MS 등의 기기분석에 의해 9-β-D-ribofuranosyladenine (adenosine)을 비롯하여 1-β-D-ribofuranosyluracil (uridine), 그리고 2, 4-pyrimidinedione (uracil)과 ergosta-4, 6, 8 (14), 22-tetraen-3-one, ergosta-5, 7, 22-tritene-3β-ol (ergosterol)으로 각각 동정하였다.
본 연구에서는 다양한 기능성을 가지는 저령을 80% methanol로 추출한 후 그 농축액을 ehyl acetate와 water로 순차 분획하고, 각 분획물을 이용하여 인간유래 위암세포인 SNU668의 생장 저해 효과와 항산화 효과 및 각종 위장질환의 원인균으로 보고된 H. pylori에 대한 항균활성을 조사하였다. 인간유래의 위암세포인 SNU668에 대한 저해 효과는 methanol fraction 1 mg/$m\ell$의 농도에서 가장 강한 암세포 저해 활성을 보였고, water fraction 1 mg/$m\ell$의 농도에서는 43.9%의 저해 활성을 보였다. 그러나 ethyl acetate fraction에서는 23.7%로 비교적 낮은 저해율을 보였다. 반면에, 성인 남성의 정상 임파구는 분획종류에 관계없이 모두 90% 이상의 높은 생존율을 보였다. 한편, 저령 추출물의 항산화 효과는 생존을 75.2%를 보인 methanol 추출물이 43.7%의 생존율을 보인 water 분획물 보다 높았고, ethyl acetate 분획물은 항산화 효과 역시 가장 낮게 나타났다. H. pylori에 대한 저령의 항균활성은 1mg/disk의 농도에서 80% methanol 추출물 및 모든 분획물에서 H. priori에 대해 항균활성을 나타냈으며, 그중 water 분획물이 12mm의 inhibition zone을 형성하여 가장 우수한 항균활성을 보였다. Methanol 추출물과 ethyl acetate 분획물은 각각 11 및 9.5 mm의 inhibition zone을 형성하였다. H. pylori로부터 분리된 urease의 활성은 urea broth에서의흡광도와 pH의 변화를 조사한 결과, 23$^{\circ}C$에서 반응 1시간 동안 560 nm에서의 흡광도가 0에서 0.93까지 증가하였으며, pH는 7.0으로부터 8.1까지의 증가를 보였다. H.pylori로부터 분리된 urease의 활성은 80% methanol 추출물과 모든 분획물에 의해 억제되었으며, 각 분획물의 억제능은 항균실험 결과와 유사한 유형으로서 역시 10mg/$m\ell$의 농도에서 1시간 후 55%의 억제를 보인 water분획물의 억제능이 가장 우수했다.
저령의 에틸아세테이트 추출물에서 4개의 분획을 제조한 후 백혈병 세포인 K-562, L-1210, HL-60와 U-937 세포의 세포생존 억제효능을 관찰하였다. Fr. 2는 L-1210, HL-60 세포 억제효능이 미비하였고, Fr. 3은 4종의 백혈병 세포주에 대하여 세포생존 억제효능이 있었다. 이 효능은 L-1210 세포에 대하여 가장 강하게 나타났다. 세포사멸 작용을 증명하는 DNA분절 현상을 L-1210 세포에서 관찰하였을 때, fr. 3을 30 $\mu\textrm{g}$/mL, 100 $\mu\textrm{g}$/mL로 처리한 군에서 만 DNA분절 현상이 관찰되었다. Fr. 3에 대한 DNA합성 억제능을 [$^3$H]thymidine incorporation test로 관찰하였을 때 50 $\mu\textrm{g}$/mL, 100 $\mu\textrm{g}$/mL로 처리한 군에서만 [$^3$H]thymidine incorporation이 저하되었다. 결론적으로 저령에는 백혈병세포인 L-1210과 HL-60의 세포생존 억제성분이 포함되어 있으며, 억제작용은 L-1210에 가장 뚜렷이 나타내었다. Fr. 3은 L-1210 세포에 대하여 DNA 합성능을 저해시켰고, Fr. 3가 L-1210 세포에 대하여 세포생존 억제작용을 나타내는 것은 계획된 세포사멸현상인 apoptosis에 의한 것으로 사료된다. 따라서 fr. 3에 대한 성분 연구가 요구되어진다.
본 연구에서는 방사선에 방호효과를 보이는 물질을 탐구하기 위하여 약용버섯인 저령(Grifola umbellata)의 균핵을 끓여 추출물을 얻어 이것이 실험용 생쥐에 미치는 영향을 조사, 연구하였다. 생쥐에 ${\gamma}$-선을 전신에 조사(5.0 Gy)하기 24시간 전 복강에 열수 추출물(100 mg/kg 체중)을 주사하면 조사된 생쥐의 40일째 생존율이 65.5%에서 78.6%로 증가되어 방사선 방호효과가 있음을 알 수 있었다. 방사선 조사 40일 후 방사선 처리군의 생쥐는 대조군과 열수 추출물 전처리군보다 상대적으로 체중 증가가 지연되었는데, 특히 방사선 처리군의 경우 흉선과 비장의 무게가 대조군에 비해 현저히 감소한 반면 열수 추출물을 처리한 투여군의 해당 기관은 대조군과 별다른 차이를 보이지 않았다. 고환의 경우 방사선 처리군과 열수 추출물 전처리군에서 모두 무게가 현저히 감소하였는데 후자의 경우에 전자에 비해 현저히 감소 폭이 적었다. 상기한 기관들과는 대조적으로 심장, 신장 및 간의 무게는 3개의 군에서 별다른 차이를 보이지 않았다. 혈청 내 대사물질 및 혈액세포에 미치는 영향을 조사한 결과 열수 추출물 투여군의 백혈구 수는 방사선 처리군 보다 좀더 서서히 감소되었으나 7일 이후 백혈구 수 회복은 두 개의 군 간에 유사한 것으로 나타났다. 적혈구의 감소경향은 두 개의 군 간에 유사하였으나 회복 현상은 열수 추출물 투여군에서 신속히 일어났다. 방사선 처리군의 림프구 수는 방사선 처리 후 7일간 현저히 감소되었고, 이후로 서서히 회복된 반면 열수 추출물 투여군의 림프구 수는 방사선 처리군 만큼 현저히 감소하지 않았고 그 회복 현상도 보다 신속하였다. 방사선 조사된 생쥐의 혈청 내 당 함량이 방사선 처리 1일째부터 현저히 증가하였고, 방사선 처리 후 7일 째와 14일째에는 1일째보다는 낮아졌으나 여전히 정상값(120 mg/dl)보다는 높았다. 그러나 열수 추출물 투여군의 혈당은 조사된 기간동안 별다른 변화를 보이지 않았다. 혈청 내 콜레스테롤 함량은 방사선 처리 1일째에는 세 군 간에 별다른 차이가 관찰되지 않았으나 7일째에는 방사선 처리군과 열수 추출물 투여군 모두 대조군 보다 높았다. 혈청 내 총단백질 함량은 세군 모두 연구 기간 동안 별다른 차이를 보이지 않았다. 수용성 단백질의 양상은 심장, 신장, 고환, 흉선에서는 각 군간에 별다른 차이가 없었으나, 간의 경우 방사선 처리군과 방사선 처리전 추출물 투여군에서 분자량 90, 53, 32 kDa 크기의 단백질이 감소하였고, 방사선 처리군에서는 감소하였으나 추출물 투여군에서는 감소되지 않은 단백질도 관찰되었다. 따라서 본 실험을 통해 생쥐에 방사선을 처리했을 경우 저령의 열수추출물을 투여한 생쥐 군이 투여하지 않은 군에 비해 생존율이나 내장 장기무게의 감소에 있어서 생존율은 20% 증가하였고 비장의 무게는 44.4%, 고환의 무게는 66.6%, 그리고 흉선의 무게는 66.6% 증가한 방호효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.
전신 ${\gamma}$-선 조사전 Grifola umbellata(Gu) 추출물의 단일 투여가 생쥐의 생존율, 체중, 기관 무게 및 혈액세포에 미치는 효과를 조사하였다 ${\gamma}$-선 조사 24시간 전에 Gu 추출물을 복강 투여하였을시, ${\gamma}$-선을 조사한 생쥐의 40-day 생존율을 65.5%에서 78.6%로 증가시켰다. Gu 추출물의 투여는 ${\gamma}$-선 조사에 의한 비장과 흉선의 무게 감소를 완전히 막아주었다(P<0.05, P<0.01) 또한 이와 유사하나 다소 적은 방사선 방호효과가 Gu 투여군의 고환에서도 관찰되었다(P<0.05). Gu 추출물의 투여는 ${\gamma}$-선 조사시 나타나는 조사 후 7일째까지의 백혈구와 림프구수의 현저한 감소를 지연시켰고, 회복속도를 촉진시켰다. 또한 21일째후의 적혈구수의 회복을 촉진시켰다. 이와 같은 결과에서 Gu 추출물의 방사선 방호효과를 알 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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