소의 수정란이식에 있어서 성공적인 임신을 위해서는 수란우의 적절한 영양상태, 양질의 수정란, 이식 시술자의 기술력과 수란우와 수정란의 적절한 동기화가 필수 요인이라 사료된다. 특히, 적절한 동기화를 위해서 발정관찰은 필수적이지만 번거롭고 장시간동안 관찰을 해야 하는 단점이 있다. 따라서 본 연구에서는 이러한 단점을 보완할 수 있도록 발정동기화 처리방법을 비교, 검토하여 수정란이식에 있어서 효과적인 발정동기화 방법을 모색하고자 실시하였다. 발정동기화 방법은 Fig 1과 같이 CIDR처리방법(A군)과 GnRH 처리방법(B군)을 사용하였으며, 황체의 등급은 직장검사와 초음파 진단기를 이용하여 직경이 2cm 이상, 1~2cm와 1cm 미만의 황체를 각각 1등급, 2등급과 3등급으로 분류하였다. 또한 본 실험에 공시된 수정란은 체외 생산된 한우 배반포기의 수정란을 사용하였으며, 1등급의 황체를 가진 수란우만을 선별하여 비외과적인 방법으로 황체가 존재하는 자궁각심부에 이식하였다. 임신진단은 이식 후 45~60일에 직장검사와 초음파진단을 이용하여 실시하였다. 발정동기화처리결과는 Table 1에서 보는 바와 같이 A군과 B군에서 발정발현율이 각각 100%와 96%로 나타났으며, 이식하기에 적합한 1등급 황체의 출현율이 65.4%와 56%로 A군에서 다소 높게 나타났다. 발정동기화 처리방법에 따른 수정란 이식 후 수태율은 A군에서 신선란과 동결란일 때 각각 66.7%와 60%로 나타나 B군의 22.2%와 0%의 결과보다 유의적으로 높은 결과를 나타내었다. 따라서 본 연구의 결과로 미루어 볼 때 수정란 이식을 위한 발정동기화 방법은 CIDR 처리방법을 적용하는 것이 GnRH 처리방법 보다 효율적이라 사료된다.다. 특히 기능황체에서의 특이적 발현 spot을 확인할 수 있었다. 이러한 결과들로부터 황체의 progesterone분비기능의 역할을 수행하기 위한 단백질들이 전, 중기에 발현된다는 것을 알 수 있고 퇴행황체에서는 발현이 안되고 있는 것을 알 수 있다. 이러한 결과를 토대로 다른 양상을 띤 spot을 분리하여 어떤 단백질인지를 분석하여 각각의 황체단백질의 특성을 규명할 수 있을 것으로 사료된다.적율(HCT)을 이루고 있음을 알 수 있었다. 적혈구 평균용적(Mean Corpuscular Volume ; MCV), 평균적혈구혈색소량(Mean Corpuscular Hemoglobin ; MCH), 평균적혈구혈색소농도(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration ; MCHC) 그리고 혈소판(Platelets) 분석결과 형질전환돼지가 일반돼지보다 약간 높은 수치를 나타냈으며 변화양상 또한 유사한 결과를 나타내었다. 이와 같은 시험분석결과를 토대로 사람 조혈촉진유전자(hEPO)가 형질전환된 돼지는 유즙으로 발현할 수 있도록 형질전환 되었음에도 불구하고 헤모글로빈 및 적혈구가 증가함으로서 형질전환돼지 개체의 혈장으로도 사람 조혈촉진인자가 분비하고 있음을 간접적으로 알 수 있었다. 정상돼지 보다 형질전환돼지가 약 30% 높은HCT 수준을 보였으며 이러한 현상은 사람에서는 적혈구증다증(erythrocytosis)으로 분류되고 있다. 이에 대한 고찰은 형질전환돼지 자체의 생리적 문제점(side effects)에 대한 해결과 더불어 기존의 인간질병에 대한 모델동물로서의 이용 가능성을 제시할 수 있는 것으로 사료된다.mu\textrm{m}$ 300BG는 56.32$\mu\tex
Background: There are no ideal substitutes for tracheal replacement. Therefore we investigated the possibility of clinical use of cryopreserved tracheal homograft with special interest in the viability and rejection of the epithelial cell and cartilage. Material and Method: Rabbit's trachea was sected and stored in liquid nitrogen tank for 1 month. Tracheal replacement was done in 45 rabbits with autograft(n=15, Group 1), fresh allograft(n=15, Group 2) and cryopreserved homograft(n=15, Group 3). After 7, 14, and 30 days, 5 rabbits in each group were sacrificed and the regeneration of epithelium and cartilage and the degree of rejection were assessed by counting the monocellular infiltration. Result: Investigation at day 7, showed no difference in epithelial regeneration, however, at days 14 and 30, Group 1 showed better regeneration of epithelium than groups 2 and 3. There was no difference of epithelial regeneration between group 2 and 3. There was little rejection at day 7, but at days 14 and 30, there was significant rejection in group 2 and group 3.(P<0.05). Group 3 showed lesser rejection than group 2 at days 14 and 30, but it was not statistically significant. Cartilage showed no rejection and maintained its viability in groups 2 and 3. Conclusion: Cryopreserved tracheal homograft can maintain its viability, therefore it may represent a possibility of clinical application for tracheal replacement. However, cryopreservation can not eliminate the antigenicity of the trachea completely. Furthere studies for lowering the antigenicity and rejection should be performed for an ideal substitute for tracheal replacement.
The intracardiac axial flow pump has been developed This device has several advantages: it fits well anatomically, its blood-contacting surface is small, and it is implanted as easily as an artificial heart valve replacement. The axial flow pump consists of an impeller and a motor, both of which are encased in a housing. Two types of impeller with 4 vanes and 6 vanes are used. Sealing of the motor shaft is achieved by means of a ferrofluidic seal. A flow of 5$\ell$/min was obtained at a differential pressure of 100mmHg with a motor speed of 7091rpm with the 4-vane impeller and 6402rpm with the 6-vane impeller. Sealing was kept against a pressure of 150mmHg at 7000rpm with the 4-vane impeller and 6402rpm with the 6-vane impeller. Sealing was kept against a pressure of 150mmHg at 7000rpm over 24 hours. The index of hemolysis was 0.056 with the 4-vane impeller and 0.214 with the 6-vane impeller. The intracardiac axial flow pump is a very promising circulatory support.
배경: 이번 연구의 목적은 체내이식형 양심실 보조장치의 개발을 위한 안전하고 간편한 동물실험 모델을 확립하는 것이며 이동작동형 완전 인공심장의 양심실 보조장치로의 사용 가능성을 알아보는 것이다. 대상 및 방법: 7마리의 Corridale 양을 대상으로 실험하였다. 5번째 늑간극을 통하여 좌측 개흉술을 시행하고 좌측 유출로 캐뉼라는 하행 대동맥에 Dacron graft을 사용하여 연결하였고 유입로 캐뉼라는 좌심방에 삽입하였다. 우측 유출로 캐뉼라는 하행 대동맥과 같은 방법으로 주폐동맥에 연결하였으며 유입로 캐뉼라는 혜동맥을 하방으로 젖혀 우심방이를 노출시킨 다음 우심방이에 삽입하였다. 4마리에 있어서는 양심실 보조장치를 전복막강(preperitoneal space)에 위치시켰으며 2마리에 촤측흉강 내에, 1마리에서는 외부에 위치시켰다. aPTT는 수술전 aPTT의 2∼2.5배로 맞추어 주었다 결과: 수술중 또는 수술직후 사망한 경우는 없었으며 7마리 모두 인공호흡기 이탈이 가능하였고 스스로 기립하고 음식물 섭취도 가능하였다. 1마리는 술후 2일째 혈전 색전증 및 인공호흡기 작동 잘못으로 사망하였으며 2마리의 겨우는 술후 2일째 각각 양심실 보조장치의 작동 잘못 및 호흡부전으로 사망하였고, 3마리의 경우는 술후 4일째 혈전색전증으로 인한 급성신부전 및 호흡부전 등으로 사망하였다. 1마리에 있어서는 28일간 생존하였으며 양심실 보조장치의 구동 장치에 연결된 라인의 마로로 인해 양심실 보조장치의 작동이 정지되었으나 바로 양심실 보조장치를 제거하고 살릴 수 있었다. 모든 경우에 있는 캐뉼라를 삽입하고 양심실 보조장치를 작동시키는데 큰 어려움이 없었다. 7마리 중 4마리에서 혈전이 발견되었으며 특히 판막을 연결한 부위에 혈전생성이 많았다. 그러나 캐뉼라에는 혈전생성이 없었다. 결론: 양에 있어서 좌측 개흉술 및 전복막강 공간에 양심실 보조장치를 위치시키는 이번 동물실험 모델은 체내 이식형 양심실 보조장치 개발을 위한 좋은 동물실험 모델이라고 생각된다. 또한 디동 작동기형 완전 인공심장의 혈전생성을 억제할수 있는 방법들의 연구개발이 지속된다면 장기간의 체내 이식형 양심실 보조장치로 사용할 수 있을 것으로 생각된다.
This experiment was conducted at Sangji university in Wonju, Korea from 2005 to 2006. The results obtained were summarized as follow; The Chung-ju local variety was tested to find out the possibility of transplanting of seedling as a after-barley crop. When transplanting of seedling for a after-barley crop was test, this short-day plant flowered from september 1 to september 3, showing no connection with sowing time nor seedling periods. The yield of seeds per 10a was affected by both the sowing time and the seedling periods and its peak in the plots sowed on May 15 and transplanted on June 24(40 days seedling).
이식 전 수정란의 성판정은 많은 축산인의 소망이었다. 많은 방법이 제기되었지만, 세포유전학적 분석방법은 ET의 상용화에 거의 무의미할 정도로 한계가 많았고, 이후 개발된 응성 특이적 항원이나 X-염색체에서 발현되는 효소의 활동을 통한 성판정 방법은 흥미롭기는 하나 산업적 적용에 제약이 많았다. 80년대 중반 Y-염색체 특이적인 DNA 탐침자의 개발과 PCR을 통한 DNA증폭기술의 개발은 수정란 성판정을 획기적으로 개선시켰다. DNA기술을 통한 수정란의 성판정은 분자생물학을 현장으로 진출시킨 첫 경우이기도 했다. 90년대에 세포유전학적 분석에서 FISH가 소개되었으며, 염색체 특이적 library는 다른 기초적이고 응용세포유전학적 연구에 유용한 도구가 되었다. 최근에는 사람에서는 착상전 수정란의 성판별 및 유전진단을 위해 실시되고 있는 형광직접접합법(fluorescent in situ hybridization, FISH)은 효소적 유전자 증폭(polymerase chain reaction; PCR)에 비해 높은 민감도와 정확성을 보이고 있으나 hybridization 및 washing 과정에 매우 긴 시간이 소요되고, 절차도 까다로워 현장에서의 적용이 용이치 않았다. 그러나 direct labelled probe의 이용, heat programmable instrument의 개발, denaturing chemical의 사용배제 등을 통해 소요시간 및 절차의 대폭적인 간소화를 이루어 현장의 적용 가능성을 한층 높이고 있다. 현재 사람의 세포유전학 및 종양학에서는 FISH의 다양한 기술이 많이 이용하고 있으나 소에서는 탐침자(probe)가 개발되어 있지 않아 그 이용이 미미하다. 본 연구는 FISH를 이용하기 위한 탐침자의 개발을 궁극적인 목표로 삼았으며, 이를 위해 접근이 용이한 방식을 개발하여 기존의 방식과는 다른 소 배아세포의 성을 판별 할 수 있는 접근방법을 소개 하고자한다.
Background: The replacement of the narrowed long-segment trachea with various prosthetic materials or tissue grafts remains a difficult and unsolved surgical problem. Homologous cryopreserved tracheal transplantation has been considered to treat the irreversibly-damaged organs, such as in the lung or heart transplantation and also to overcome the limited supply of donor organs. We examined the morphological changes and the immunosuppressive effects of the cryopreserved trachea after the heterotopic transplantation in the rats. Material and Method: Sixty tracheal segments harvested from 30 donor Wistar rats were heterotopically implanted into the peritoneal cavity of 20 recipient Wistar rats and 40 Sprague Dawley rats. The 60 recipient rats were divided into 6 groups(10 rats/ group). In groups I, II, and III, 30 tracheal segments were implanted immediately after the harvesting and in groups IV, V, and VI, the segments were implanted 28 days after the cryopreservation. Groups I and IV were Wistar syngeneic controls. Groups II and V were Sprague Dawley recipients receiving no immunosuppression and Groups III and VI, were Sprague Dawley recipients receiving immunosuppressive agents. At 28 days all rats were sacrificed and the tracheal segments were evaluated grossly and histologically. Result: Immunosuppression of the tracheal segments had a significant influence on the changes of the tracheal lumen and tracheal epithelial cells, irrespective of the cryopreservation of the trachea(p<0.001). In groups III and VI receiving immunosuppressive agents, the tracheal lumen was patent and the normal epithelial cells were observed, however in the other groups not receiving the immunosuppressive agents, there were almost luminal obliteration by the proliferation of the fibrous tissues and a loss of the epithelial cells, the findings were similar to those in the case of obliterative bronchiolitis after a lung and a heart-lung transplantation. Conclusion: With the appropriate immunosuppressive agents, the lumen and the respiratory epithelium of the transplanted tracheal segment were well preserved, even after the cryopreservation of the tracheal segment, which shows the possibility of the long-term preservation and homologous transplantation of the trachea. But fibroproliferative obliteration of the tracheal lumen and the loss of the normal respiratory epithelial cells, characteristic findings of obliterative bronchiolitis, were observed in the groups without the immunosuppression. This experiment using the rat trachea may be useful in studying the pathogenesis, treatment, and prevention of obliterative bronchiolitis after a lung and a heart-lung transplantation.
Backgound: It has been shown that the endothelium of cardiac valves and adjacent great vessels have a reduced immune reaction compared to other vessels. We investigated the clinical feasibility of using immunologically untreated xenogenic valves, in a pig-to-goat pulmonary valve conduit implantation model. Material and Method: Porcine pulmonary valve conduits were prepared without specific immunologic treatment and implanted into the right ventricular outflow tract of goats while undergoing cardiopulmonary bypass. Two goats each were assigned to the following observation time intervals: one day, one week, three months, six months and twelve months. Echo-cardiographic examinations were performed prior to sacrifice of the goat to evaluate pulmonary valve function. After the xenograft specimens were retrieved, histological changes were evaluated microscopically. Result: Ten of the twelve animals survived the predetermined observation time intervals. Aneurysmal dilatations, of the anterior wall of the implanted pulmonary artery, were observed at each of three and twelve month-survival animals. A variable degree of pulmonary valve regurgitation was observed on echocardiography. However, valve stenosis, thrombotic occlusion and vegetation were not seen. Microscopically, the nuclei of the donor tissue disappeared as a result of pyknosis and karyolysis; however the three components of the implanted xenografts (the pulmonary artery, the valve and the infundibulum) were gradually replaced by host cells over time, while maintaining their structural integrity. Conclusion: Immunologically untreated xenogenic pulmonary valve conduits were replaced by host cells with few observed clinical problems in a pig to goat pulmonary valve implantation model. Therefore, they might be an alternative bioprosthesis option.
Several factors need to be considered for a successful anterior cruciate ligament (ACL) reconstruction, such as preoperative planning, operation technique, and postoperative rehabilitation. Graft choice, fixation, preparation method, maturation, incorporation to host bone, and graft tension should also be considered to achieve a good outcome after an ACL reconstruction. Factors to consider when selecting a graft are the graft strength, graft fixation, fixation site healing, and donor site morbidity, as well as the effects of initial strength, size, surface area, and origin of the graft on its potential for weakening during healing. There are two types of graft for an ACL reconstruction, autograft or allograft. Several autografts have been introduced, including the bone-patellar tendon-bone, hamstring tendon, and quadriceps tendon-bone. On the other hand, each has its advantages and disadvantages. The recent increased use of allografts for an ACL reconstruction is the lack of donor site morbidity, decreased surgical time, diminished postoperative pain, and good availability of source. Despite this, there are no reports suggesting that an allograft may have a better long-term outcome than an autograft. Allografts have inherent disadvantages, including a longer and less complete course of incorporation, remodeling, biomechanically inferiority to autograft, the potential risk of an immunogenic reaction and disease transmission. Higher long-term failure rates and poorer graft maturation scores were reported for allografts compared to autografts. An autograft in an ACL reconstruction should remain the gold standard, although the allograft is a reasonable alternative. If adequate length and diameter of autograft can be obtained for an ACL reconstruction, an autograft with adequate graft fixation and postoperative rehabilitation should be chosen instead of an allograft to achieve better results.
The present study was conducted to examine some factors affecting in vitro development and fecundity of embryos recloned with somatic cell nuclear transfer (SCNT). Fibroblast cells retrieved from the ear of a 3-week-old, cloned Korean goat (Jinsoonny) were used as karyoplast donors and serum-starvation was conducted in tissue culture medium (TCM)-199 supplemented with 0.5% FBS. Recipient oocytes were surgically collected by flushing the oviducts 35 h after hCG injection following FSH priming. The zonae pellucidae of the oocytes were partially perforated with a laser drill and a donor cell was transferred into an enucleated oocyte. The couplets were electrically fused and activated by ionomycin (5 min) and 6-DMAP (4 h). The reconstructed embryos were cultured in mSOF medium containing 0.8% BSA at $39^{\circ}C$ in an atmosphere of 5% $CO_2$, 5% $%O_2$, 90% $N_2$ for 12 to 15 h. Re-cloned embryos (2- to 4-cell stages) were surgically transferred into the oviducts of the recipients and pregnancy was subsequently diagnosed by progesterone assay and ultrasound on Days 21 and 63 of pregnancy. The fusion rate following 1st fusion pulse was higher (p<0.05) in 2nd cloning (65.9%) compared to 1st cloning (51.0%), but it was not different in the other groups. The rate of cleavage after fusion was significantly higher (p<0.05) in 1st (77.7%) than in 2nd cloning (56.0%). A total of 175 re-cloned embryos were transferred into 28 recipients. On day 21 and 60 after transfer, 11 (39.3%) and 4 recipients (17.4%) were pregnancy, respectively. In comparison of pregnancy rate by estrous synchronization, a total of 66 and 109 re-cloned embryos were transferred into 11 recipients in natural estrus and 17 recipients in induced estrus, respectively. Five (45.4%) and 2 recipients (18.2%) in natural estrus were pregnant on days 21 and 63 while 6 (35.3%) and 2 (11.8%) recipients in induced estrus were pregnant, respectively. These results show that recloning of goat can be achieved by SCNT and estrous synchronization between donor and recipient animals may be one of the major factors affecting success rate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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