Park, Se-Il;Moon, Young-Mi;Jeong, Jae-Ho;Jang, Kwang-Ho;Ahn, Myun-Hwan
Journal of Veterinary Clinics
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v.28
no.5
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pp.486-496
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2011
A special mesenchymal tissue layer called perichondrium has a chondrogenic capacity and is a candidate tissue for engineering of cartilage. To overcome limited potential for chondrocyte proliferation and re-absorption, we studied a method of cartilage tissue engineering comprising chondrocyte-hydrogel pluronic complex (CPC) and cultured perichondrial cell sheet (cPCs) which entirely cover CPC. For effective cartilage regeneration, cell-sheet engineering technique of high-density culture was used for fabrication of cPCs. Hydrogel pluronic as a biomimetic cell carrier used for stable and maintains the chondrocytes. The human cPCs was cultured as a single layer and entirely covered CPC. The tissue engineered constructs were implanted into the dorsal subcutaneous tissue pocket on nude mice (n = 6). CPC without cPCs were used as a controls (N = 6). Engineered cartilage specimens were harvested at 12 weeks after implantation and evaluated with gross morphology and histological examination. Biological analysis was also performed for glycosaminoglycan (GAG) and type II collagen. Indeed, we performed additional in vivo studies of cartilage regeneration using canine large fullthickness chondrial defect model. The dogs were allocated to the experimental groups as treated chondrocyte sheets with perichondrial cell sheet group (n = 4), and chondrocyte sheets only group (n = 4). The histological and biochemical studies performed 12 weeks later as same manners as nude mouse but additional immunofluorescence study. Grossly, the size of cartilage specimen of cPCs covered group was larger than that of the control. On histological examination, the specimen of cPCs covered group showed typical characteristics of cartilage tissue. The contents of GAG and type II collagen were higher in cPCs covered group than that of the control. These studies demonstrated the potential of such CPC/cPCs constructs to support chondrogenesis in vivo. In conclusion, the method of cartilage tissue engineering using cPCs supposed to be an effective method with higher cartilage tissue gain. We suggest a new method of cartilage tissue engineering using cultured perichondrial cell sheet as a promising strategy for cartilage tissue reconstruction.
Articular cartilage is a unique tissue with no vascular, nerve, or lymphatic supply. This uniqueness may be one of the reasons why chondral injuries will hardly heal and may progress to osteoarthritis over time. Currently, there are several surgical options for the treatment of articular cartilage lesions. Although there is some discrepancy as to which procedures work best in certain patients. The spectrum of treatment alternatives for articular cartilage defects can range from simple lavage and debridement, drilling, micro-fracturing, and abrasion to osteochondral grafting and autologous chondrocyte implantation. In 1984, for the first time, results of autologous chondrocyte implantation in a rabbit model were presented, showing hyaline cartilage repair. Clinical study using autologous cultured chondrocyte implantation in chondral defects of the human knee has been reported in 23 patients in 1994. In 14 out of 16 patients treated for chondral injuries on the femoral condyles, the results were good to excellent. It is important for the surgeon to understand the autologous chondrocyte implantation technique and to be aware on the postoperative management. Attention to surgical technique and selection of appropriate patient for the autologous chondrocyte implantation will provide with the best results.
This study was designed in the fabricated poly (L-Lactic-co-${\varepsilon}$-Caprolactone) (PLCL) scaffold using chitosan-alginate hydrogel, which would be more suitable to maintain the biological and physiological functions continuing three dimensional spatial organizations for chondrocytes. As a scaffold, hydrogels alone is weak at endure complex loading within the body. In this study, we made cell hybrid scaffold constructs with poly (L-Lactic-co-${\varepsilon}$-Caprolactone) (PLCL) scaffold and hydrogels to make a three-dimensional composition of cells and extracellular matrix, which would be a mimic of a native cartilage. Using a particle leaching technique with NaCl, we fabricated a highly-elastic scaffold from PLCL with 85% porosity and $300-500{\mu}m$ pore size. A mixture of bovine chondrocytes and chitosan-alginate gel was seeded and compared with alginate as a control on the PLCL scaffold. The cell maturation, proliferation, extracellular matrix synthesis, glycosaminoglycans (sGAG) production and collagen type-II expressions were better in chondrocytes seeded in chitosan-alginate hydrogel than in alginate only. These results indicate that chondrocytes with chitosan-alginate gel on PLCL scaffolds provide an appropriate biomimetic environment for cell proliferation and matrix synthesis, which could successfully be used for cartilage repair and regeneration.
Kim, Moo-jin;Lee, Seung-deok;Kim, Kyung-ho;Kim, Kap-sung
Journal of Acupuncture Research
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v.21
no.2
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pp.73-87
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2004
전통적인 면역억제제와 면역활동제인 녹용수용추출액(DAA)은 뼈의 재생에 있어서 중요한 역할을 한다고 여겨진다. 녹용약침이 비활성 연골세포의 분화를 야기시킬수 있는 지를 결정하기 위해, 융합된 세포 배양균을 녹용약침과 함께 24, 36, 48, 72, 120 시간동안 먼저 처리하였다. 이러한 처리후에 배양액을 10-10 ~ 10-8M 1,25-(OH)2D3를 포함하는 새로운 배양액으로 바꾸어 세포들을 추가로 24시간동안 배양했다. 앞선 연구에서 더 성숙된 활성연골세포가 이러한 Vit D3 대사산물에 반응한다는 것을 보여주었기 때문에 이러한 두 번째 처리를 선택하였다. 세포성숙에 있어서 녹용약침의 전처리 효과는 ALPase의 특이활동을 측정하는 것으로 확인하였다. 기질 단백질 합성의 변화는 35SO4 결합이 proteoglycan으로의 변화되는것과 collagen 합성을 측정함으로써 증명되었다. 비활성 연골세포가 녹용약침과 함께 120시간동안 전처리되고 다시 1,25-(OH)2D3를 추가한 처치에서 ALPase 특이활동과 collagen 합성이 농도 의존적으로 증가를 일으켰다. 그러나 proteoglycan의 생성에는 영향을 미치지 않았다. 1,25-(OH)2D3와 함께 전처리 된 비활성 연골 세포는 어떠한 전처리도 받지 않았던 비활성 연골세포처럼 반응했다. 이러한 결과는 녹용약침이 직접적으로 비활성 연골 세포를 활성 연골세포로 성숙시키는데 관여한다는 것을 알려준다. 그러므로 녹용약침은 연골내 골화과정에서 연골세포의 성숙을 조절하는데 중요한 역할을 하는 것으로 나타났다.
선천성 또는 외상등에 의한 후천성 기도 협착의 치료는 아직도 어려운 문제중 하나로서 해결하여야 할 많은 과제를 내포하고 있다. 특히 안정되고 유연한 구조적인 골격과 함께 호흡성상피로 피복되는 기관점막은 기관기능 보존에 있어 필수적 조건이다. 저자들은 현재까지 보고자에 따라 견해 차이가 있는, 이식연골막 및 이식점막의 운명에 대하여 시기에 따른 형태학적 변화를 관찰하고자 하였다. 즉 저자들은 혈행성 복합피판의 형태로 이식한 점막에 일어나는 변화를 형태학적으로 연구하였으며, 대조군으로는 혈행이 유지되지 않는 유리이식(free graft)으로 구성된 복합피판을 이용하였다. 또한 면역조직화학적 염색을 통해 이식 초기에 일어나는, 이식점막과 결손부 주변조직사이의 재생능의 차이를 비교하고자 하였다. 토끼 40마리를 두 군으로 나누어 각 군당 20마리씩으로 하였으며 술후 각각 2주, 4주, 6주 및 8주에 기관에 이식한 피판을 조직학적으로 분석하였다. 섬모의 재생상태는 주사현미경을 통해 관찰하였으며 각 군당 4마리의 토끼를 술 후 1일과 2일에 Brdu-Anti Brdu로 염색하여 결손된 점막의 주변부와 이식한 점막사이의 재생능이 복합피판의 구성에 따라 어떤 차이가 있는지 알아보았다. 1. 혈행성의 복합피판으로 구성된 구강점막은 원주상피로 화생(metaplasia)하는 경향을 보였으나 유리 연골막에 부착한 구강점막에서는 괴사가 진행되면서 주위의 점막에서 성장해 들어가는 양상을 보였다. 2. Brdu-Anti Brdu 염색의 결과, 복합피판의 구성에 따라 이식점막과 주위 기관상피의 염색양상에 유의한 차이를 나타내었다.
The palatine tonsils which are located in entrance of digestive and upper respiratory tracts are the most important organ in anatomical and functional structures of the pharyngeal lymphatic tissues. As for function of the tonsil, there have been many suspected theories that were included hematopoietic, hormonal, digestive function and production of vitamin, entry of bacteria with other antigenous materials and defence mechanism of which has taken charge by Virchow in 1860 in past. But among these theories, in recently, defence mechanism of the tonsil was strongly accepted immunologically. For the purpose of elucidating immune response of the tonsil, the author observed serum immunoglobulin levels, peripheral total lymphocyte counts and populations of T, B and Null lymphocytes before and after tonsillectomy in 30 cases of patients with chronic tonsillitis and 29 cases of healthy controls. The results obtained were as follows; 1) Serum Ig M level was significantly higher in patient group than in control group but was not significantly different preoperative from postoperative patient group. 2) Population of T-lymphocyte more significantly decreased in patient group than in control group but it was not significantly different preoperative from postoperative patient group. 3) Population of B-lymphocyte more significiantly increased in patient group than in control group but it was not significantly different preoperative from postoperative patient group. On the basis of these results, it may be suggested that tonsil play partially a role in the immune response of human.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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