The effect of physiological factors of beet armyworm, Spodoptera exigua (Hubner), on esterase variation was analyzed by comparing electrophoretic esterase isozymes. Each esterase isozyme was also characterized by substrate and inhibitor specificities. A total of 28 esterase isozymes were separated on 10% nondenaturing polycarylamide gel electrophoresis (PAGE). These isozymes were denoted from El to E28 according to cathodal migration distances. There was a variation in esterase isozymes among developmental stages. Larvae and pupae had more isozymes than did adults. Eggs had only eight isozymes. The isozymes of El and E2 were specific only in the first instar larvae. Esterases also showed variation according to different tissues. More kinds of esterase isozymes were found in epidermis and gut tissues than in hemolymph and fat body. Some isozymes were specific in epidermis (from El to E6), gut (E10, El 1, E25, E26, and E27), and hemolymph (E18). Among 10 naphthyl esters, a-naphthyl propionate was the most reactive substrate to the esterase isozymes. The isozymes were classified into cholinesterases (El0 and E24), arylesterases (E4, E9, E17, E19, E21, and E23), and carboxylesterases (the others) on the basis of inhibition by the esterase inhibitors-eserine, dichlorovos, moncrotophos, and paraoxon.
General esterases were analysed quantitatively and qualitatively to see their role in deltamethrin resistance mechanisms of the diamondback moth, Plutella xylostella L. Selection with 0.1 g of deltamethrin in each generation induced the moth to decrease susceptibility to the insecticide and to increase esterase activities of the fourth instar larvae. Both characters were highly correlated so that the correlation coefficient (r) between LDSo @g) of deltamethrin and esterase activities (~M/min/pg) was 0.9918 (P=0.0082). Nondenaturing PAGE (6%) separated 17 esterase bands from the whole body extracts of the fourth instar larvae. Deltamethrin-selected populations had fewer esterase bands than had the unselected. Four esterase bands (E3, E4, Ell, and E13) were, however, specific to deltamethrin-selected populations.
Journal of agricultural medicine and community health
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v.25
no.1
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pp.23-27
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2000
적혈구 콜린에스테라제 활성도와 성, 연령, 키, 몸무게, 음주 및 흡연력 등 인구학적 특성과의 관련성을 살펴보기 위해서, 두 곳의 농약 사업장 근로자 52명과 의과대학생 51명 등 총 103명을 대상으로 현장 검사용 기계를 이용해 2000년 1월부터 2월까지 적혈구 콜린에스테라제 활성도를 측정하였다. 조사 대상자는 남성이 89명(86.4%), 여성이 14명(13.6%)였으며 평균 연령은 각각 $31.8{\pm}11.4$, $27.1{\pm}10.1$ 세였다. 측정된 적혈구 콜리에스테라제 활성도의 평균값은 남성에서 $34.7{\pm}3.9$ U/g hemoglobin, 여성에서 $34.0{\pm}4.0$ U/g hemoglobin으로 군간 유의한 차이가 없었다. 한편 적혈구 콜린에스테라제 활성도와 조사된 모든 인구학적 변수들간에는 유의하지 않은 매우 낮은 상관성만이 관찰되었다. 결론적으로 적혈구 콜린에스테라제 활성도는 혈장 콜린에스테라제 활성도와는 달리 성, 연령, 키, 몸무게 등 인구학적 변수와 상관성을 보이지 않는다고 판단되었다.
Background: Anticholinesterase drug inhibits acetylcholinesterase(AChE), induce accumulation of acetylcholine(ACh) near cholinergic receptors and cholinergic stimulation. This experiment was performed to study the effects of anticholinesterase drugs on gastric motility and the effect of ethanol on anticholinesterase drug-induced motility change. Materials and Methods: After excision of stomach, $2{\times}10mm$ circular muscle strips were made, which were then fixed to the isolated muscle chamber. An isometric tension transducer was used to measure the contraction change of the gastric smooth muscle strips after drug addition. Results: Fenthion, an irreversible anticholinesterase drug, increased ACh induced contraction of gastric smooth muscle strips and PAM, a cholinesterase activator, antagonized this action. Physostigmine, a reversible anticholinesterase drug, also increased the ACh induced contraction. The gastric motility was decreased by PAM. Ethanol, which is known to induce smooth muscle relaxation, inhibited the increase of contraction by fenthion. Conclusion: These results indicate that irreversible and reversible anticholinesterase drugs increase gastric motility and antagonized by cholinesterase activating drugs. And when exposed to both ethanol and anticholinesterase drug, gastric motility was decreased by the smooth muscle relaxation effect by ethanol.
There was a great variation in insecticide susceptibilities among field and laboratory populations of the beet armyworm, Spodoptera exigua (Hiibner). Unselected laboratory population, which had been reared for 6-7 generations in our laboratory without exposure to insecticides, was more susceptible than its parental field population in all tested insecticides. Two selected laboratory populations with parathion or deltamethrin showed much higher insecticide tolerance than did the unselected laboratory population in their own selection insecticide. The variation of the insecticide susceptibilities was highly correlated with esterase and acetylcholinesterase activities. Field and the selected laboratory populations had lower acetylcholinesterase activities and higher esterase activities than did the unselected laboratory population. Acetylcholinesterase of the field and the selected laboratory populations had higher Km values than did that of the unselected. In a population, Km values were varied among different developmental stages; acetylcholinesterase of the fifth instar larvae had the highest Km value among those of the other larval stages. Twenty one esterase bands were separated on 6.5% nondenaturing polyacrylamide gel from the whole body extracts of the fifth instar larvae. E2, E7, E8, Ell, El6, and El7 esterase bands were developed more frequently in the insecticides-selected populations than in the unselected population. These results suggest that the variation of insecticide susceptibilities of the beet armyworm includes both biochemical mechanisms: target site insensitivity and enhanced activity of detoxification enzyme.
The juvenile hormone(JH) titers and juvenile hormone esterase (JHE) activities were mea¬sured in larval homogenates of the chestnut gall waL,J, Dryocosmus kuriphilus Yasumatsu, parasiting a susceptible and two resistant chestnut ( Cheuk-Pa, and Dan- Tak) varieties by GLC, Galleria wax test and Liquid scintilation counter. JH of the chestnut gall wasp was identified as JH- I. Their juvenile hormone titers were 35,800 GU/g(Cheuk-Pa), 30,900 GU/g (Dan-Tak), and 28,600 GU/g(susceptible variety). The juvenile hormone esterase activities were 1.48 n mole/min/ml(Cheuk-Pa), 1.63 n mole/min/ml(Dan- Tak), and 1.89 n mole/mini ml(susceptible variety). JH titer activity of the chestnut gall wasp parasiting resistant varie¬ties were higher than that from susceptible, whereas their JHE activity was higher in those from susceptible variety than those from resitant varieties. JH titer and JH specific esterase activity was inversely proportional.
벼멸구의 카보후란에 대한 저항성 기작을 구명하기 위해 실내에서 카보후란으로 30세대 도태하여 얻은 저항성계통($LD_{50};\;20.3{\mu}g/g$)과 약제를 12년 동안 처리하지 않은 벼멸구 감수성 계통($LD_{50};\;0.3{\mu}g/g$)을 완충용액과 마쇄하여, 105,000g에서 2시간 원심분리하여 얻은 상등액(에스테라제층)과 침전물(P450-산화효소층)을 효소액으로 하여 $^{14}C$-카보후란을 반응시켜 계통 간 대사물 량의 차이를 조사한 바 저해제(piperonyl butoxide; 산화효소저해제, diethylmalate; 글루타치온 전이효소 저해제, iprobenfos; 에스테라제 저해제)와 보조인자 (NADPH; P-450 산화효소, 글루타치온; 글루타치온전이효소)에 상관없이 카보후란의 대사물과 그 양이 계통간 차이가 없었다. 이상의 결과로부터 저항성 벼멸구에서 일반적으로 곤충에서 생화학적 저항성 기구로 잘 알려진 가수 분해 효소의 일종인 에스테라제와 p-450 산화효소, 글루타치온 전이효소의 활성 증가가 저항성 발달에 관여하지 않음을 알 수 있었다.
Simple diagnostic kits for monitoring insecticide susceptibility of beet armyworm, Spodoptera exigua (Hiibner) were developed and applied to the field populations. The operation of the kits was based on the correlations between enzyme activities of esterase (EST) and acetylcholinesterase (AChE) and the insecticide susceptibilities. Four different kinds of diagnostic kits (ED, EM, AD, and AM) were designed and classified by diagnostic enzymes (E for esterases and A for acetylcholinesterase) and inhibitors (D for dichlorvos and M for monocrotophos). Diagnostic inhibitor concentrations were 1 mM for ED, 10 mM for EM, 100 mM for AD, and 100 mM for AM. Resistant larvae which were not inhibited by the diagnostic amounts of insecticides developed positive staining (red color), but susceptible~ s howed negative (no color). An insect was used for both EST and AChE diagnostic kits, but different in their samples: hemolymph for EST and the head for AChE. These four diagnostic kits were applied to 1 1 different populations which showed variations of insecticide susceptibilities. Four kits were different in the capability discriminating the insecticide susceptibilites according to insecticides: ED to bifenthrin, AD to methomyl, and ED and AM to chlorpyrifos-methyl. These diagnostic devices can be used for insecticide-resistance management program for this insect pest. It also provide a technical guide to insect pest management for farmers, directors, and researchers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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