• 미생물학회지
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• 제44권4호
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• pp.282-288
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• 2008

혈관이 좁아지거나 막혀서 생기는 허혈은 심장, 뇌, 다리와 같은 인체의 여러 장기에 영향을 미친다. 최근 혈관신생 분야에서 많은 진전이 있어 기존 치료법으로 치료가 되지 않는 허혈성 환자들의 치료 가능성에 대한 기대가 많아졌다. 혈관형성은 여러 개의 인자들과 세포들이 관여하는 복잡한 과정이기 때문에, 한 개의 인자보다는 여러 인자들을 병합하는 요법이 점점 많이 시도되고 있는데, 이런 병합요법의 한 예로 전사인자를 전달하는 전략을 생각할 수 있다. 이에 본 연구에서는 cardiac ankyrin repeat protein (CARP)의 유전자를 대상으로 그 혈관신생 능력을 혈관내피세포에서 조사하였다. 아데노바이러스 벡터 내에 human CARP의 cDNA를 클로닝하여 재조합 아데노바이러스를 제조하였으며, 이를 이용한 유전자 전달실험 결과, CARP 유전자 전달 군에서 유의하게 혈관내피세포의 중식과 모세관 구조 형성, 그리고 vascular endothelial growth factor의 발현 등을 증가시킴을 확인하였다. 본 연구 결과는 CARP가 혈관신생 연구의 새로운 목표 유전자로서 그 기능에 대한 많은 연구가 필요함을 뒷받침해준다.

• 한국동물위생학회지
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• 제34권2호
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• pp.139-148
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• 2011

Avian reovirus (ARV) and fowl adenovirus (FAdV) were evaluated for pathogenicity in specific pathogen free (SPF) chickens. ARV was isolated from the broilers with history of malabsorption syndrome (MAS). FAdV was isolated from the layer breeders with inclusion body hepatitis and hydropericardium syndrome. Total 6 inoculated groups including 1 un-inoculated group were organized and inoculated with the ARV and/or FAdV by oral route. The minimal pathological lesions and lower viral gene detection rates were present in the ARV inoculated groups compared to those of FAdV or ARV/FAdV inoculated groups. Common gross lesions in the ARV inoculated group were distended intestine with foamy contents and in the FAdV group there were foamy cecal contents and hydropericardium among the evaluation methods such as gross and histological lesion, viral gene detection, body weight and serum chemistry, histopathological lesion score was reliable especially in the liver lesions such as hepatic necrosis and lymphocytic infiltration. However, we did not success to evaluate the synergetic effect of mixed infection of ARV and FAdV in this study. Therefore, we need further study to reproduce malabsorption syndrome of ARV infection using different viral agent such as rotavirus and using different dose of virus.

• Toxicological Research
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• 제20권2호
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• pp.109-116
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• 2004

For the safety evaluation of adenovirus-mediated gene transfer, we investigated differential gene expressions after transfecting adenoviral vector containing p16 tumor suppressor gene (Ad5CMV-p16) into human non-small cell lung cancer cells. In the previous study, we showed adenovirus-mediated $p16^{INK4a}$ gene transfer resulted in significant inhibition of cancer cell growth. We investigated gene expression changes after transfecting Ad5CMV-p16, Ad5CMV (null type, a mock vector) into A549 cells by using cDNA chip and oligonucleotide microarray chip (1200 genes) which carries genes related with signal transduction pathways, cell cycle regulations, oncogenes and tumor suppressor genes. We found that $p16^{INK4a}$ gene transfer down regulated 5 genes (cdc2, cyclin D3, cyclin B, cyclin E, cdk2) among 26 genes involved in cell cycle regulations. Compared with serum-free medium treated cells, Ad5CMV-p16 changed 27 gene expressions, two fold or more on oligonucleotide chip. In addition, Ad5CMV-p16 did not seem to increase the tumorigenicity-related gene expression in A549 cells. Further studies will be needed to investigate the effect of Ad5CMV-p16 on normal human cells and tissues for safety evaluation.

• 한국동물위생학회지
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• 제33권1호
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• pp.7-12
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• 2010

There are several immunosuppressive viral diseases in chickens such as avian adenovirus (AAV), chicken anemia virus (CAV), infectious bursal disease (IBD) and Marek's disease (MD). In this study, we have investigated two broiler chicken farms suffered from high mortality in Jeonbuk in July to August 2009. Clinically high fever and growth retardation were observed in the diseased chicken. In necropsy, the hemorrhages in thigh leg and thymus, hemorrhages and enlargement of liver, kidney and proventriculus, and yellowish fluid in heart were seen. Histologically, necrotic foci and basophilic intranuclear inclusion bodies of hepatocytes, hemorrhages and infiltrated lymphocytes in kidney and proventriculus were observed. By using polymerase chain reaction (PCR), the genes of avian adenovirus, CAV and ND virus were detected in specimens. We suggested that these coinfection cases with high mortality were due to primarily infection of immunosuppressive diseases such as avian adenovirus, CAV, followed by secondary infection of Newcastle disease (ND) virus.

• 약학회지
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• 제54권1호
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• pp.8-12
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• 2010

Inositol 1,4,5-trisphosphate ($IP_3$) receptor ($IP_3R$)-mediated signaling pathway is involved in many cellular processes including fertilization, apoptosis and neuronal function. Although cardiac myocytes express the $IP_3R$, its pathophysiological role has not been clearly understood because of limited selectivity of currently available pharmacological blockers. In the present study we constructed shRNA-expressing adenovirus to knock-down the type 2 $IP_3R$ ($IP_3R2$), a major subtype in cardiac ventricular myocytes, and demonstrated that the virus successfully eliminated the expression and localization of the $IP_3R2$. These results may provide a reliable tool for probing pathophysiological roles of the $IP_3R2$ in isolated intact cardiac myocytes.

• 한국가금학회지
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• 제37권3호
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• pp.237-245
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• 2010

본 조사 연구는 종란을 생산하는 원종계, 종계, 백세미씨알 생산 농장을 대상으로 수직 감염(난계대전파)되는 전염성 질병인 추백리/가금티푸스, 닭마이코플라즈마증(MG, MS), 전염성 빈혈증, 조류아데노바이러스 감염증에 대한 항원 및 항체 검사를 실시하였다. 조사 기간은 2009년 8월부터 12월까지 5개월간 원종계 45계군, 종계 1,018계군, 백세미씨 알 생산 54계군에 대한 성적이다. 추백리/가금티푸스 항원검사에서는 모든 계군이 음성으로 확인되었으나, 항체 검사결과 종계 3.2%, 백세미씨알 생산계군 3.0%의 항체 양성율이 관찰되었다. 계종별 가금티푸스의 발생률은 종계군의 항원 검사 결과와 상반되어 육계 44.3.7%, 백세미 26.2%, 산란계 15.7%, 토종닭 12.6%, 육용 종계 1.08%였다. MG 항체 검사 결과, 원종계 71.1%, 종계 및 백세미씨알 생산계군 각 88.7% 항체 양성율이 확인되었으며, MS 항체 검사 결과도 비슷한 수준으로 나타났다. 닭 전염성 빈혈 바이러스 검사 결과, 원종계 42.2%, 종계 18.0%가 바이러스를 갖고 있는 것으로 나타났으며, 항체 양성율도 86% 이상이었다. 이와 함께 조류 아데노바이러스 항원 검사 결과에서는 원종계 4.4%, 종계 2.7%, 백세미씨알 생산계군 9.35%가 바이러스를 보유하고 있는 것으로 조사되었다. 결론적으로 국내 종계군은 닭 마이코플라즈마증과 닭 전염성 빈혈에 상당히 높은 수준으로 감염되어 있는 것으로 판명되어 질병별 적절한 예방책이 필요한 것으로 나타났다.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제3권1호
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• pp.76-85
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• 1996

Adenoviruses(Ad) are considered to be second only to rotaviruses as the most significant cause of gastroenteritis in young children in Korea and thus it is essential to know the full spectrum of Ad serotypes routinely present in stool specimens from symptomatic patients. Sixty-six Ad isolates and three questionable ones collected over a 2-year peiord were typed by standard microneutralization, restriction endonuclease digestion and PCR of viral DNA to be able to evaluate these assays comprehensively for their ability to identify Ad associated with gastroenteritis. A total of sixty-one isolates(88.4%) were typed: the predominant types were Ad type 41(Ad41)(26.2%), Ad2(19.7%), Ad40(14.8%), Ad5(9.8%), and Ad7(9.8%) which together accounted for almost 80% of the isolates. The remaining virus isolates were typed as Ad1, 31, 34, 3, 25 and a mixture of 40/41. The incidence of Ad31(4.9%) or Ad3(1.6%) was relatively insignificant. DNA restriction analysis(77.5%) proved to be better than serum neutralization but not so when compared to a PCR-based assay for identification of the enteric Ad serotypes(90%) in stool specimens. In this work, the PCR-based assay was evaluated as a tool for the rapid, yet highly sensitive identification of adenoviral DNA sequences in fresh clinical stool specimens.

• 한국융합학회논문지
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• 제13권1호
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• pp.161-166
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• 2022

HIF-2α는 저산소 조건에서 활성화되는 전사인자로 암, 대사증후군, 관절염, 간염 등의 발병 기전에서 핵심 역할을 한다고 보고된 바 있다. 이에 HIF-2α 저해제를 도출하고자 기존 약리활성 구조를 도입한 N'-arylisonicotinolyhydrazide를 골격으로 설정하고 화합물 라이브러리로부터 해당 화합물들을 선택하여 HIF-2α 저해활성을 측정하였다. 이를 위해 HRE-luciferase를 HTB-94세포에 transfection하고 아데노바이러스를 이용하여 HIF-2α를 세포 내로 도입하여 luciferase reporter gene assay를 수행하였다. 2-hydroxy-1-naphthyl 기를 포함한 화합물에서 저해활성이 발견됨에 따라 이 구조를 포함하는 골격을 다시 설정하고 해당 화합물들을 선정하여 활성을 측정하였다. 그 결과 HIF-2α 저해활성과 위양성 시험을 통하여 2 종의 HIF-2α 저해제를 도출하였다. 본 연구는 생물학과 화학의 융합연구로 수행되었으며 도출된 저해제는 후속 저해제 탐색 연구와 HIF-2α의 기능 연구에 활용될 수 있고 관련 질환의 치료제 개발에도 기여 할 것으로 사료된다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
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• 제49권2호
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• pp.189-197
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• 2000

연구배경 : 폐암은 진단 당시 이미 국소 침윤이나 원격 전이가 된 경우가 많고 이에 대한 적절한 치료법이 없기 때문에 예후가 불량하다. TIMP(tissue inhibitor of metalloproteinase)는 암세포의 침윤 및 전이에 중요한 역할을 하는 metalloproteinase를 억제하는 물질로서 생체 내에 존재하는 전이 억제 물질이다. 본 연구는 아데노바이러스를 이용한 TIMP 유전자 치료법을 개발하여 폐암의 치료에 응용하고자 하였다. 방법 : 폐암세포는 침윤 및 전이 능력이 큰 Calu-6를 사용하였다. TIMP-2 유전자를 pACCMVpLpA에 subcloning 한 후 pJM17과 함께 293 cell에 cotransfection 한 후 homologous recombination을 이용하여 Ad-TIMP-2를 제작하였다. Ad-TIMP-2를 Calu-6 cell에 이입하여 TIMP-2 protein 이 생산되는지를 TIMP-2 ELISA를 이용하여 확인하였고 TIMP-2의 생물학적 활성은 zymography로 확인하였다. Soft agar clonogenic assay로 종양형성능을 평가하였다. Ad-TIMP-2로 처리한 calu-6를 6주간 soft agar에서 키운 후 육안으로 보이는 colony 수를 측정하였다. Matrigel을 이용하여 invasion assay를 시행하여 calu-6의 침윤 능력의 변화를 평가하였다. 결과 : TIMP-2 ELISA 결과, 모세포 calu-6와 Ad-$\beta$-gal 이입 calu-6 그리고 Ad-TIMP-2 이입 calu-6는 각각 0.44, 0.43, 20.7 ${\mu}g/10^6$ cells/72hrs의 TIMP-2를 생산하였다. Zymography 결과 Ad-TIMP-2에 의해 생산된 TIMP-2는 matrix metalloproteinase-2의 gelatin 분해 효과를 억제하여 생물학적 활성을 확인할 수 있었다. Soft agar clonogenic assay 결과, 모세포인 calu-6는 453$\pm$53개, Ad-$\beta$gal과 Ad-TIMP-2 이입된 calu-6는 각각 332$\pm$35, 280$\pm$45개의 colony가 형성되어 유의한 감소를 보이지 못했다. Invasion assay 로 모세포 calu-6 에 대한 침윤율을 평가한 결과, Ad-$\beta$gal과 Ad-TIMP-2가 이입된 calu-6(10moi)는 각각 71$\pm$8.9%, 12$\pm$8.4%의 침윤율을 보였으며 $\beta$-gal 군에 비해 TIMP-2군이 유의하게 침윤율이 낮았다. 결론 : Ad-TIMP-2는 폐암 세포의 종양형성능을 억제하지 못하였으나 침윤은 억제하여 TIMP-2가 폐암 유전자 요법에 이용될 가능성을 제시해 주었다.

• Pediatric Infection and Vaccine
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• 제21권1호
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• pp.43-52
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• 2014

목적: 급성 위장관염으로 입원한 소아 환자들의 중증도를 여러 척도로 평가하여 각 척도간의 차이를 비교하고, 원인 바이러스가 밝혀진 예를 따로 분류하여 원인 병원체에 따른 임상양상 및 중증도의 차이를 알아보고자 하였다. 방법: 전향적으로 전국 8개 지역 9개 의료기관의 소아청소년과에 급성 위장관염으로 진단받아 입원한 5세 미만의 환자를 대상으로 Vesikari 척도, Clark 척도, 수정 Flores 척도로 중증도를 평가하였다. 연구군으로부터 수집된 분변 검체로 로타바이러스, 장 아데노바이러스는 효소면역법으로, 노로바이러스, 아스트로바이러스, 사포바이러스는 RT-PCR 방법으로 검출하였다. 결과: 최종 연구 대상군은 총 214례로 남녀비는 1.58:1이고, 연령층은 6개월 미만이 35명(16.4%), 6-23개월이 105명(49.1%), 24-59개월이 74명(34.5%)이었다. Vesikari 척도와 Clark 척도간 일치율은 0.521 (P<0.001)이고, '중증'인 경우가 Vesikari 척도는 60.7%, Clark 척도는 2.3%로 Clark 척도가 '중증' 평가에 더욱 엄격하였다. 결론: 급성 위장관염의 중증도를 평가하는 각 척도들간에는 차이가 있었다. 각 연구자들의 결과를 객관적으로 비교하기 위해서는 척도를 하나로 통일하거나 각 척도들의 평가기준을 모두 조사하여 각 척도의 중증도를 동시에 얻는 것이 필요하다.