• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2003.06a
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• pp.41-41
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• 2003

본 연구는 한우 복제수정란의 이식에 의해 고능력 복제한우를 생산할 수 있는 효율과 산자의 성장능력을 검정하기 위해 수행되었다. 고능력 한우의 귀세포를 이용하여 체세포복제수정란을 생산하였고 그 신선수정란을 대리모에 이식한 결과는 다음과 같다. 2000년 (n=35)과 2001년 (n=121)에 이식한 복제소의 분만율은 각각 5.71%, 8.26%로 나타났다. 복제송아지의 임신기간은 평균 287일 (279~295일)이었으며 같은 기간내 인공수정 우군의 평균 임신기간인 287일 (255~293)과 동일하였다. 복제송아지의 분만시 사산율은 6.67%였으며, 인공수정시의 94.44%와 비슷하였다. 그러나 분만후 복제송아지의 생존율은 36.67%로서 인공수정의 100% 보다 매우 낮았다. 그리고 태어난 후 200일 이상 생존한 송아지의 생시 평균체중은 28.25kg (AI 23.67kg)이었고, 복제송아지의 경우 생시체중이 표준체중보다 적거나 (<20kg) 또는 거대체중 (>35kg)의 경우는 분만후 대부분 사망하였다. 상기 결과에 의해 현재의 복제기술에 의한 한우 생산효율은 아주 낮고 분만 후 거대체중등 비정상인 경우가 많아 생존율이 낮음을 알 수 있었다. 따라서 이에 대한 원인구명에 관한 기초연구의 확대가 요망된다.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.20 no.1
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• pp.19-26
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• 1996

In the present study, we investigated devel-opmental ability and transgene expression of IVM/IVF derived porcine embryos following microinjection with SV40-LacZ. A total of 412 IVM/IVF derived embryos were used to examine developmental ability and transgene expression following DNA microinjection. After centrifugation, pronuclei were visible in 60.3% when examined between 18~21h after IVF. Development and transgene expression were assessed after 9 days in culture. The percentages of injected embryos reaching to the morula and blastocyst were significantly lower (P<0.05) than those of non-injected control embryos. However, the percentages of DNA microinjected embryos and non-injected embryos that developed to the blastocyst or hatched blastocyst stage in dual culture systems (NCSU23 and EMEM) were significantly higher (P<0.05) than those in NCSU23 medium alone. As the resuIt of X-gal staining, the proportion of positive embryos was 40~43% in morula and blastocyst stage embryos, however, mosaicism has been observed in the most putative transgenic morulae and blastocysts. In the PCR analysis, the percentages of embryos integrated gGH gene were 45.0 and 44.4% in morula and blastocyst stage, respectively. These results suggest that improved IVM /IVF system and culture condition increased the embryo viability and ex-pression of a microinjected transgene.

• Korean Journal of Veterinary Research
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• v.30 no.4
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• pp.355-360
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• 1990

Single nuclei from two-, four- and eight-cell mouse embryos were transplanted into enucleated two-cell embryos by micromanipulation and Sendai virus mediated fusion. The developmental potential of these reconstituted embryos in vitro and in vivo was examined. It was found that the single nuclei which were transplanted to enucleated two-cell embryos were not only able to develop to the blastocyst stage in vitro(two-cell nuclei, 76.5%; four-cell nuclei, 68.4%; eight-cell nuclei, 48.3%), but also able to develop to full term in vivo after transfer to recipient mice(two-cell nuclei, 37.1%; four-cell nuclei, 29.6%; eight-cell nuclei, 16.3%). Although the proportion of live young produced after transfer of nucler of nuclear transplant embryos which received eight-cell nuclei was significantly (p<0.05) reduced, it would be suggested that the overall efficiency in producing identical offspring is greater when eight-cell embryos were selected for nuclear donor than two- or four-cell embryos were selected.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.24 no.1
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• pp.97-108
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• 2000

The objectives of this study were performed to increase the efficiency of the culture conditions of embryos produced in vitro, and to assess the developmental potential after transfer of those embryos into recipients. The mean number of folliclular oocytes recovered from an ovary was 10.7. The rates of maturation and fertilization in Grade I oocytes were significantly (P＜0.05) higher than Graden and III. Developmental rate into blastocyst in the culture group of TCM-199 with BOEC were significantly higher (P＜0.05) than the groups of TCM-199 and conditioned medium (24.7% vs. 12.4% and 18.2%). The survivability of post-thawed blastocysts equilibrated for 3 min in EFS solution was significantly (P＜0.05) lower than l0 for 1 and 2 min (32.1% vs. 82.9% and 73.3%). Significantly higher (P＜0.05) survival rate in blastocysts was seen after freezing than in morulae stage embryos. Out of all 105 recipients, 49 (46.7%) were confirmed in pregnant. On pregnancy of cattle, 48 calves were born from 40 recipients. The ratio of twin and single calves was 30.5% (32/40 and 7.6% (8/40), respectively. However, the others composed of abnormal, as judging as 6 (12.2%) for abortion and 3 (6.1%) for stillbirth during the pregnant period.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2003.10a
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• pp.127-127
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• 2003

본 연구의 목적은 젖소에서 다배란유기법의 확립을 위해서 호르몬을 처리법을 달리한 결과이다. 난포의 발생을 자극하는 FSH 호르몬을 하루에 2번의 호르몬 주사를 하는 데, 이는 혈액내에 난포자극호르몬의 농도를 연속적으로 유지하여 난소에서 다난포 발생의 목적을 달성하고자 하는 방법이다. 하지만 빈번하게 호르몬을 주사하는 방법은 처리하는 노력이 필요하고 공란우도 스트레스로 작용한다. 이러한 단점을 극복하기 위해 한번에 많은 난포의 성숙을 유도하는 다배란처리법에 대한 보고가 많이 있어, 본 연구에서 이 다배란처리 효과를 비교하고자 젖소를 이용하였다. 방법으로는 다회주사법(8회)과 일회주사법(1회)에서 황체수와 수정란의 생산수 등을 조사하였다. 다회주사법은 생리식염수에 융해한 FSH를 1일 50mg씩 2회(12시간 간격)주사하는 법으로 CIDR 질내 주입 9일째부터 4일간 주사하였으며, 질내에 CIDR를 주입하고 11일째되는 날에 PG(25mg, 루텔라이스, 한국)를 주사하고, 12일째는 CIDR를 제거하여 일회주사법과 주기를 맞추었다. 일회주사법은 CIDR를 질내에 주입하고 나서 9일째 되는 날에 400mg의 FSH을 생리식염수에 융해하여 일회주사를 하고 다회주사법과 같이 인공수정과 채란시간을 맞추었다. 인공수정은 황체퇴행제(PG)를 주사하고 나서 48, 72시간에 2회 인공수정을 실시하여 1주일 후 수정란을 채란하였다. 인공수정시는 반드시 GnRH(2.5mg)를 동시에 주사하였다. 채란은 인공수정 후 7일째 되는 날에 비외과적으로 채란을 실시하여 우수한 수정란은 동결을 실시하였다. 다회주사법에서 14두, 일회주사법에서 14두를 공시하여 황체수, 회수수정란수, 배반포수, 동결란수를 조사하였다. 다회주사법에서는 황체수는 8.07$\pm$6.62개, 회수정란수는 6.78$\pm$5.96개, 배반포율은 58.9%, 동결란 생산율은 52.6%의 성적을 얻었으며, 일회주사법에서 황체수는 12.07$\pm$8.07개, 회수수정란수는 10.0$\pm$9.24개, 배반포율은 27.1%, 동결란 생산율은 25.0% 수준의 결과를 얻었으나 결과에 대한 통계분석시 다회주사법과 일회주사리법 간에 유의적인 차는 인정되지 않았다(student T-test, P<0.05). 본 실험의 결과에서 나타나듯이 생리식염수를 용매로 이용한 FSH 1회 주사법이 다회주사법과 비교하였을 때에 수정란 생산효율에서 유의적인 차이가 없으므로 이 방법을 이용한 다배란유기는 노동력과 공란우에 대한 스트레스를 경감할 수 있을 것으로 사료된다.

• Korean Journal of Animal Reproduction
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• v.24 no.1
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• pp.69-76
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• 2000

This study was carried out to improve of effective culture system on development of IVM/IVF/IVC bovine embryos. The cumulus-oocyte-complexes (COCs) collected from Korean cattle ovaries harvested at a local abattoir were matured in 50 ${mu}ell$ of TCM199 supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and hormones (35 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ FSH, 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ LH, 1$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ estradiol 17 $\beta$ under paraffin oil at 39$^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_2$in air. At 24 hrs after culture, matured oocytes were fertilized in vitro for 22~24 hrs with motile semen in which obtained by centrifugation of a frozen thawed semen on Percoll-density gradients (45% vs. 90%) at 500 g for 20 min. The presumptive zygotes were divided into three experimental groups. Single egg (Group 1), 25 (Group 2) or 50 eggs (Group 3) were cultured on cumulus cell in 50 ${mu}ell$ TCM199 supplement with 10% FBS for 6~9 days after fertilization. In vitro developmental rates into the blastocysts in the groups 2 and 3 were significantly (P＜0.05) higher than those of group 1 (37,27 vs. 6%, respectively). Cell number of blastocysts obtained in groups 2 and 3 at day 8 were significantly (P${mu}ell$) resulted in higher developmental competence and cell number of bovine blastocysts produced in vitro than those the culture of single embryos with cumulus cells.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2002.06a
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• pp.44-44
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• 2002

본 연구는 돼지의 미성숙 난포란을 체외에서 성숙, 수정시킨 후, 생산된 체외 수정란을 NCSU 23 체외배양액에 항산화제(NAC, ebselen 및 glutathione) 와 성장 인자 (EGF, PDGF)의 첨가가 돼지 체외 수정란의 체외 발육에 미치는 영향을 검토하였다. NAC을 0, 0.5, 1.0 및 2.0 mL 첨가하여 체외배양한 결과, 상실배기 이상 발육된 체외발육성적이 1.0mL과 2.0 mM 첨가구가 여타구보다 유의하게 높은 체외발육성적을 나타냈다.(p〈0.05). (중략)

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 1997.10a
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• pp.45-45
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• 1997

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2006.10a
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• pp.118-118
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• 2006

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2004.10a
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• pp.87-87
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• 2004