A rigid polymer, cellulose triacetate (CTA) dissolved in a combination of trifluoroacetic acid (TFA) and methylene chloride (MC) solution are liguid crystalline above a certain concentration. A flexible polymer, polyethylene terephthalate (PET) also dissolves in TFA/MC, but does not form liguid crystal phase. Ternary solutions, CTA/PET/TFA-MC which CTA and PET were mixed in a same solvent TFA/MC (6/4 : v/v) showed phase separation and mesophase formation.
암모니움 썰페이트 분획분리법. 초미량여과. DEAE - 셀루로오즈 및 젤 여과 크로마토그라피법 등을 사용하여 사람의 정액에서 베타 글룩유로니다아제를 분리하였다. 이 효소는 pH4.4와 온도 50${\sim}$$54^{\circ}C$에서 최고의 활동도를 나타내었다. 파라-나이트로페닐-디-글룩유로나이드를 기질로 사용하였을때 Km치는 0.59mM이었다. 또한 이 효소는 수은이온, 구리이온, 은이온에 의해 활동도가 방해되고 반면에 망간이온 및 코발트 이온에 의해서 효소의 활동도가 증가되었다. 세파댁스 G-200 젤여과법에 의해 측정된 사람의 정액 베타글룩유로니다아제의 분자량은 400,000 이었다. 이렇게 정제된 효소는 수정과정 중에서 카페시태시션의 연구에 도움을 주리라고 본다.
C.I. Reactive Blue 19에 대한 hydroxylethylsulfonyl type의 수용액에서의 용해성과 안정성을 조사한 결과 이온강력 0.15, pH 5.8과 9.2에서 초기의 용해도를 4시간 동안 유지했으며, 이온강력을 증가시키면 용해도의 단정성이 감소했다. 그러나 용액의 교반하면 안정성이 증가하여 이온강력 0.30에서 초기용해도가 하루 동안 유지되었다. 셀로판 필름을 원주형태의 롤로 만들어 확산과 흡착 거동을 조사한 결과 hydroxylethylsulfonyl type의 용액 농도가 증가하면 표면농도, $C_0$가 증가했으나 확산계수, D는 일정한 값을 유지했다. Bis(arylsulfonylethyl)ether type의 셀룰로우스와의 반응성은 vinylsulfonyl type에 대해 겉보기 반응속도가 1/6 정도였다.
Odontoglossum ringspot virus (ORSV) was finally purified from ORSV-infected orchid plants by diethylaminoethyl (DEAE) cellulose anion exchange column chromatography. The virus was reliably eluted by potassium chloride at the concentration from 0.1 M to 0.13 M. Partial purification was done by solubilization with Triton X-100 (allkylphenoxypolyethoxy ethanol) and precipitation with polyethylene glycol (PEG; MW 8,000). The finally purified ORSV represented one distinct homogeneous band and the molecular weight of its capsid protein was about 17,500 Dalton in electrophoretic analysis. Electron microscopy showed not only intact particles ranged from 280 nm to 340 nm in length, but also segmented particles that final 140 nm to 220 nm and even disks. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed that final yield was 12 mg/100 g of the infected leaves. Bioassay demonstrated that the purified ORSV had the normal infectivity to orchid plants and Nicotiana glutionsa. Based on these data, anion exchange column chromatography could be efficiently applied to the purification of ORSV and other viruses similar to ORSV.
퇴비 제조시 유용한 수분조절제로 각광받고 있는 코코피트를 대상으로 섬유소 분해능을 지닌 세균을 분리 동정하였다. 각기 다른 코코피트를 시료로 하여 섬유소 분해세균을 분리한 결과 각 시료로부터 다양한 세균들이 검출되었으며 이들을 동정한 결과 Burkholderia sp., Bacillu subtilis, Sphingomonas sp., Rhodotorula sp.를 비롯하여 여러 Pseudomonas sp. 등이 동정되었다. 이들 중 4종류의 균주, 즉 B. subtilis, P. aeruginosa, P. stutzeri, P. luteola 를 선별하여 이들의 생화학적 특성을 분석하였으며 배양액을 대상으로 섬유소 분해효소의 일종인 CMCase의 활성을 비교 분석하였다. CMCase의 활성비교를 위한 표준균주로 Cellulomonas sp.를 사용하였으며 비교결과 P. aeruginosa, P. stutzeri, B. subtilis, P. luteola 균주에서 각각 표준균주 효소활성의 83%, 40%, 8%, 6% 정도인 것으로 분석되었다.
황소의 정액에서 베타 굴룩유로니다아제를 부분적으로 정제하였다. 이 정제과정에는 $(NH_4)_2SO_4$ 의 분획분리법, 두개의 연속적인 DEAE-셀루로오즈 콜럼 및 등전초점화법(pH4-6) 및 세파덱스 G-200의 절여과 방법이 쓰여졌다. 등전초점화(lsoelectric focusing)법을 사용했을때 pH5.13에서 베타 굴룩유로니다아제는 한 형태의 단백질로 존재하였다. 고도로 정제된 베타 굴룩유로니다아제는 전기영동법에 의해 한개의 주된 띠와 약간의 불순물의 띠로 나타났고 특수활동도는 34Units/mg 단백질로 나타났다. 이 효소는 pH 5.2 와 $48^{\circ}C$ 에서 가장 높은 활동도를 나타냈다. 알부민이나 0.15M 소금용액에서 베타 굴룩유로니다아제는 활동도가 상승됐다. 페놀프타레인-모노-베타-굴룩 유로닉산을 기질로 사용했을때 km값은 2.9mM 이었고 Vmax값은 $0.8{\mu}$mole/min 이었다. 대두의 콘카나발린 A에 흡착하는 것으로 보아 이 효소는 당단백질임이 확인됐다. 토끼, 사람의 정자 아크롬좀 추출물 및 정액에서 이 효소는 높은 활성도를 나타냈다.
본 논문에서는 감마선 조사가 NaOH 전처리를 이용한 우드칩의 당화에 미치는 영향을 살펴보았다. 당화량은 전처리된 우드칩에 효소를 이용하여 가수분해한 후 생성된 환원당과 포도당 양을 측정하여 확인하였다. 10 g/L NaOH 처리한 우드칩을 각각 50, 100, 200 kGy 세기의 감마선을 조사하여 당화량을 측정하였다. 우드칩의 가수분해 수율을 비교했을 때, 200 kGy 감마선 조사한 우드칩에서 가장 높은 환원당 함량 12.2 g/L이 얻어졌다. 또한 전처리 과정에서의 감마선 조사 단계의 영향을 평가하기 위하여 우드칩을 먼저 50, 100, 200 kGy 감마선 조사한 후, 10 g/L NaOH 로 전처리하였다. 200 kGy 감마선 조사 후 NaOH 전처리를 수행했을 때 환원당 함량은 13.4 g/L로 전처리 이후의 감마선 조사구보다 증가하였고, 7.9 g/L 포도당을 얻을 수 있었다. 이러한 결과로부터 감마선 조사가 셀루로오즈 바이오매스 전처리에 활용 가능할 것으로 기대된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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