사람의 체세포가 분열수명에 한계가 있다는 것은 1960년대 초기에 보고되었으며 이것은 artifact가 아니며 세포자신이 가지는 프로그램에 의한 것임이 보고된 것은 최근의 일이다. 그러나 이 프로그램 안에 체세포가 실지로 증식을 정지하는 시기, 모든 세포노화의 타이밍이 어떻게 설정되는가\ulcorner 에 대해서는 아직 알 수 없다. 한편 노화세포가 왜 증식할 수 없는가\ulcorner 에 대해서는 세포주기를 조절하는 유전자에 관한 최근의 연구에 의해 상당부분 밝혀졌다. 또한 분열회수를 인식하는 분열시계의 진행은 세포증식을 억제하는 유전자의 발현을 촉진하여 증식을 정지시킨다. 분열시계를 정지시킨 세포는 기본적으로 무한히 분열하는 것이 가능하다. 분열시계를 정지시키는 주역은 telomerase이다. 정상 세포에서는 생식소(生殖巢)에 존재한다. 대부분의 정상체세포, 세포조직에는 없으나 대부분의 암에서 존재한다. 본 논단에서는 전반부에 노화를 후반부에 암에 관해서 분자세포생물학 차원에서 최근 연구성과를 중심으로 살펴보고자 한다.
This study was performed to investigate the effect of iron ion on the mesophyll protoplast culture of Arabidopsis thaliana. Mesophyll protoplasts were isolated and cultured in a modified IMH medium supplemented with various concentrations of Fe-EDTA. Relatively low concentration of Fe-EDTA (<0.02 mM) induced the low level (4.8%) of cell division. In addition the cell division and microcallus growth were dose-dependently stimulated by 0 to 1 mM of Fe-EDTA. In 0.5 to 1 mM concentration range of Fe-EDTA, microcolonies were readily formed and the plating deficiency (8.5%) also showed maximal rate. However more than 1 mM of Fe-EDTA inhibited the initial growth of protoplase. The overall results suggest that Fe2+ion concentration plays an important role at the early developmental stage of protoplast regeneration.
기주식물 (토끼풀, Trifolium repens L.)에 기생하는 실새삼(Cuscuta australis R. Brown)의 흡기내 목부의 개체발생 과정을 광학현미경으로 조사하였다. 흡기의 목부 분화를 암시하는 최초의 해부학적 특징이, 흡기 자체내에서가 아니라, 그 흡기가 형성되어 있는 실새삼 줄기에서 나타났다. 즉 실새삼 줄기의 중심주의 유관속 내부 및 유관속 사이에서 세포분열 활성이 관찰되었다. 이 분열로부터 유도된 세포들은 짙게 염색된 세포질과 뚜렷한 핵을 갖고 있었다. 흡기가 기주조직에 침입하여 생장함에 따라, 실새삼 줄기의 중심주에서 시작된 세포분열 활성은 유관속 사이를 거쳐서 흡기의 기부를 향하여 구정적으로 확장되었다. 이와 동시에, 실새삼 줄기의 목부에 인접해 있던, 짙은 세포질 밀도를 갖는 세포들이 목부요소로 분화하기 시작하였다. 결국, 이미 형성되었던 짙게 염색된 세포들을 따라서 흡기의 목부는 구정적으로 분화하였다. 실새삼 줄기의 중심주에서 일어나는 유조직 세포들의 분열활성 및 이로부터 흡기의 목부 분화를 구정적으로 유도할 수 있는 가능성에 대하여 논의하였다.
Microtubules와 micrfilaments는 포유동물 난자이 주요한 세포 구조물들로, 이들은 난자의 성숙, 수정 및 배발달시 핵질의 이동과 세포질 분열에 직접 관여하는 것으로 알려져 왔다. 난자내 세포구조물의 정확한 움직임은 정상적인 배 발달을 위해 필수적이다. Microtubules는 $\alpha$, $\beta$- bubulin이 서로 연결되어 이루어져 있으며, 수정시 웅성.자성전핵 움직임과 세포분열시, 유사 및 감수분열시 그 역할을 한다. 생쥐를 제외한 대부분의 동물에서 microbubules의 역할은 수정시 정자가 centrosome을 난자내로 이전하여 sperm aster를 형성함으로써 시작된다고 보고되고 있다. 따라서 정자의 도움없이 배발달이 일어나는 단위발생시 microbubules의 형성은 연구들 사이에 흥미로운 연구대상이 되고 있다. 한편 microfilaments는 세포분열시 세포질을 분할하는 기계적인 역할을 하는 것으로 알려져 있으며, 최근 생쥐 난자에서는 정자의 난자내 융합과 웅성 및 자성 전핵의 이동에 관여한다고 보고되고 있다. 포유동물 난자의 체외성숙, 체외수정을 유도할 때 여러 가지 비정상적인 핵움직임과 세포분열이 관찰되어지고, 낮은 배발달율이 보고되고 있는데, 최근 연구자들은 세포구조물, 즉 microtubules와 microfilaments의 비정상적인 역할에서 기인한다고 보고 있다. 따라서 포유동물 난자의 성숙.수정 및 단위발생시 세포구조물의 움직임과 역할 및 상호관계에 대한 정확한 이해는 체외수정율 및 배발달 향상에 중요한 기초자료로 이용되리라고 본다.
Sister chromatid exchanges (SCEs) observed by means of bromodeoxyuridine substitution and fluorescence plus Giemsa (FPG) technique were proposed as a sensitive and quantitative assay for mutagenicity and cytotoxicity in short-term cultures of phytohaemagglutinin (PHA)-stimulated human lymphocytes. Therefore, this study was carried out to investigate the relation between anticancer agents and cytotoxic effects. Chromosomal analysis was performed on metaphase cells that had divided one, two, or three or more times after treatment for SCEs, mitotic indices (MI) and cell cycle kinetics by FPG technique. The results indicate that anticancer agents led to a dose dependent increase in SCE frequency except methotrexate. But, highly inhibited mitotic indices and delayed cell cycle kinetics were observed except for cyclophosphamide. The author suggest that the difference of SCE frequency is due to the differences in the cytotoxic action of anticancer agents, but although the induction of SCEs has a correlation with cell cycle delay, in some cases the induction of SCEs is not always related to cell cycle delay because of different cytotoxic action of anticancer agents.
Proceedings of the Korean Society for Agricultural Machinery Conference
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2003.07a
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pp.427-433
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2003
숙주세포가 분열될 때, 재조합 DNA 분자의 복제물이 자손에게 전달되며 거기서 벡터 복제가 일어난다. 수많은 세포 분열이 일어난 후, 동일한 숙주세포의 콜로니(colony), 혹은 클론(clone)이 생성된다. 이때 숙주세포의 분열은 배양액을 담은 용기에서 이루어진다. 박테리아 속의 배양된 콜로니에 재조합 DNA가 포함되어 있지 않으면 푸른색을 띠고, 재조합 DNA가 포함되어 있으면 흰색을 띠게된다. 이 흰색의 콜로니만을 추출해 내는 것이 바로 콜로니 픽킹(picking)이라 한다. (중략)
In Vitro fertilization of U. unicinctus eggs observed by immunofluorescence and electron microscopes revealed an overview of the meiotic pattern of the tide animals. The eggs have been fertilized early at germinal vesicle stage, followed by germinal vesicle break down (GVBD), but pre-mitotic aster like structure could not be resolved by the methods employed in this work. The meiotic features, such as rotation-shift movement of spindle fibers, behavior of spermatozoonmonaster in the egg cytoplasm and active spindle fiber of the 1st polar body, have been observed. The antitubulin-FITC fluorescence show the 2nd meiotic apparatus appeared firstly parallel to the tangential line of the oolemma, proceeding the meiosis, its bipolarity is rotated and shifted towards the oolemma. The polar bodysite of the oolemma was not amorphous, but active in a sense of anti-tubulin-FITC reactions during the extrusions of the polar bodies. The immunofluorescence reactions of the spermatozoon centriole appeared at a later stage of the 2nd meiosis. During the time periods, the fertilized spermatozoon resided in the egg cytoplasm. Activating the centrioles, spermatozoon approaches towards the chromosomal materials of the 2nd oocyte. This suggests that spermatozoon centrioles initiate and play a roll to fuse male and female pronuclei.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1993.04a
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pp.56-56
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1993
새로운 cell cycle 특이적 억제제의 스크리닝 방법의 확립과 이를 이용하여 cell cycle 억제제의 검색 및 세포분열 및 성장을 억제하는 작용의 분석과 이들의 항암작용 및 세포성장 및 분열 억제 작용의 signal transduction mechanism을 규명한다. 이상의 연구를 수행하기 위해 흰쥐 재생간 조직 및 흰쥐 일차 배양 간세포를 연구 모델로 하여 스크리닝 방법을 확립하고, 세포 분열 및 성장 억제제의 연구 대상 약물로는 기존의 천연물 및 미생물의 2차 대사 산물을 분리 정제한 물질등을 사용하여 그 작용 효능을 연구한다. 1) 흰쥐 부분 간 절제 수술 26시간 후 핵 단백질을 분리 2) MPF activity 측정 3) MPF 활성 저해제 생산 균주의 1차 탐색
The effects of X-irradiation on the mitotic activity, the chromosome aberration and the DNA synthetic pattern in synchronized human kidney cells treated with 5-AU were measured in the present experiment. When 5-AU was added, mitotic activity was markedly suppressed. After removal of the cells from the chemical, its activity proceeded synchronouly and reached peaks at hours 10. In 5-AU+100R groups, it was observed the X-ray caused mitotic delay, the irregularity of the time when mitotic peak appeared and the inhibiton of mitotic activity. In the control group, chromosome aerrations per cell was 0.030, whereas 0.147 in 5-AU treated group. In 5-AU+100R and 5-AU+200R groups, chromosome aberrations per cell were 0.583 and 0.669 respectively and the average chromosome aberrations per cell per R was 0.0035. 5-AU increased the frequency of labeled metaphases together with labeling intensity, and this is thought to be due to the accumulation of cells by 5-AU at S stage. On the contrary, X-ray decreased the labeling intensity and the frequency of labeled metaphases.
Purpose : We investigated the temporal alterations of apoptosis and mitotic death following irradiation in the rat's small intestinal crypts. Materials and methods : Male Sprague-Dawley rats were irradiated 2 Gy by 6 MV linear accelerator and sacrified at 2, 4, 8, 24, 48 hours after irradiation. The mean numbers of the apoptotic cells and mitotic cells per their small intestinal crypts were measured in the unirradiated control and irradiated groups. To compare with H & E staining, ISEL (In Situ End Labelling) were peformed in the group having the highest apoptotic count. Results : The mean number of the apoptosis per crypt in the control group was 0.14 and those at 2, 4, 8, 24, 48 hours after irradiation were 1.43, 3.19, 1.15, 0.26, 0.17, respectively. So the apoptosis development was increased upto 4 hours and then normalized around 24 hours following irradiation. The mean number of the mitotic cells per crypt in the control group was 1.29 and those at 2, 4, 8, 24, 48 hours after irradiation were 0.56, 0.47, 0.23, 0.65, 1.19, respectively. The mitotic cell counts following irradiation was decreased to 8 hours and recovered to the normal level about 48 hours. So the increment of apoptotic cell count was occurred earlier and more remarkable than the decrement of mitotic cell count after irradiation. According to the staining time, false positivity was found in the ISEL staining. Conclusions : The cell death in the small intestinal crypt developed by acute radiation damage was usually decreased to the normal level within $24\~48\;hours$ after irradiation and the apoptosis was thought to be more important process than the mitotic death.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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