The purpose of the present investigation was to improve several procedures being used in the adherence assay of Streptococcus sanguis cells to hydroxyapatite (HA) beads and to study the effect of the beads on the counting of radioactivity. The standard adhere assay involved the adherence of radiolabeled bacteria to 40mg of HA beads. The beads were mixed with ['H]thymidine-labeled bacterial cells and incubated for 60 minutes at room temperature. Unadsorbed cells were removed, the beads with adsorbed cells were dried, and the radioactivity was monitered in a scintillation spectrometer. The 30 seconds sonication of cells in a form of long chains appeared to be adequate for obtaining mostly singlet or doublet cells. Unlike the counting of S. sanguis cell suspension, bacterial cells adhered to HA or saliva-coated HA(SHA) required smaller volume (2.5ml) of scintillaton fluid for better counting. Eighteen percent quenching of counts could be attributed to the beads. Among 3 procedures commonly used to equilibrate the beads for adherence assay, no differences were found in their effectiveness. The HA beads on which the bacteria remained attached in scintillant during the counting were found to be the source of sample self-absorption representing 34.5% of the total radioactivity counts resulting from the beads dissolved in HCl solution.
Chung, Man Pyo;Yoo, Chul Gyu;Han, Sung Koo;Shim, Young-Soo;Rhee, Chong H.;Han, Yang Chol;Kim, Young Whan
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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v.43
no.6
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pp.936-944
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1996
Background: Neutrophils or monocytes separated in vitro by the adherence to plastic surface are known to be activated by surface adherence itself and subsequent experimental data might be altered by surface adherence. Adhesion molecules and gene transcription of the inflammatory mediators are known to be associated in this process. To evaluate whether adhesion molecule and transcriptional activation of the inflammatory substances are also involved in the activation of human alveolar macrophage by the adherence procedure, we designed this experiment. Method : Bronchoalveolar lavage was performed in the person whose lung of either side was confirmed to be nonnal by chest cr and alveolar macrophage was harvested. To measure the expression of Interleukin-8(IL-8) mRNA, manganese superoxide dismutase(SOD) mRNA and CD11/CD18 mRNA in human alveolar macrophage of both adherence state and suspension state, Northern blot analysis was done at 0, 2, 4, 8 and 24hrs after the adherence to plastic surface and during suspension state. Then, phorbol myristate acetate(pMA) and N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine(fMLP) were added respectively in the same experimental condition. Result : 1) Human alveolar macrophages in the adherent state induced IL-8 mRNA and SOD mRNA expression which was maximal at 8 hours after the adherence to plastic surface. But we could not observe the upregulation of CD18 mRNA by surface adherence. 2) PMA induced these mRNA expression both in the adherent cell and the nonadherem cells, but the induction of mRNA expression by fMLP occurred only in the adherent cells. Conclusion: These results suggest that adherence of huamn alveolar macropahge is an important cell-activating event that may play a critical role in the modulation of lung inflammatory respones.
The adhesion of 16 bifidobacterial strains, including 10 isolates from Korea infants, to Caco-2 cells and their cell surface hydrophobicity were tested. The results of adhesion and cell surface hydrophobicity of for various bifidobacterial strains were obtained and correlations between adhesion and hydrophobicity were strain-dependent properties. Any correlations between species of tested strains were not observed. Among the tested strains, Bifidobacterim longum D6, B. longum H4, B. thermophilum ATCC 25525, B. suis ATCC 27533, and B. animalis subsp. lactis BB12 had higher adherent properties and B. bifidum B3, B. longum D6, B. longum stronger hydrophobicity, respectively. Due to the strain-dependant correlation between adhesion to Caco-2 cells and cell surface hydrophobicity of bifidobacteria, these results provide a possible method for preliminary selection of bifidobacteria potentially adherent to Caco-2 cells by means of cell surface hydrophobic properties.
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.20
no.1
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pp.51-56
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2004
이번 연구의 목적은 순수 타이타늄의 표면을 양극산화법으로 표면처리하여 표면의 특성변화를 연구하고, 이에 따른 세포부착 특성의 차이를 연구하는 것이다. 원반 모양의 타이타늄을 전해질용액에서 300V - 550V의 전압을 주어 양극산화 하고 표면특성을 관찰한 결과, 전압이 높아짐에 따라 표면의 분화구 크기가 커지는 양상을 보였으며 아울러 표면 거칠기도 증가되었다. 세포 부착 실험결과 전압이 증가함에 따라 세포부착 및 증식세포수는 감소하였다. 300V 이상의 양극산화 전압은 표면의 거칠기는 증가시키지만 세포증식은 오히려 억제되는 것이 관찰되었다.
Indole 3-carbinol (I3C), important component of cruciferous vegetables and its major acid-catalyzed metabolite, 3,3'-diindolylmethane (DIM) have been suggested to have an inhibitory effect on the tumor growth and metastasis. This study investigated the effect of DIM on the adhesion, migration and invasion of highly invasive PC3 and DU145 human prostate cancer cell lines. Cells were grown in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) supplemented with 3.0 g/L glucose, 3.7 g/L sodium bicarbonate and 10% fetal bovine and were incubated in a humidified incubator at $37^{\circ}C$ and 5% $CO_2$. DIM reduced the adhesion of PC3 and DU145 cells in a dose dependent manner. The pretreatment of PC3 cells with DIM reduced the adhesion dose dependantly, but inhibition was less effective than the treatment with DIM during the adhesion assay. The migration and invasion of PC3 and DU145 cells were reduced by DIM dose dependantly, and the inhibition of DIM was less effective in the DU145 cells than in the PC3 cells. The pretreatment of PC3 cells with DIM for 24 hr before the assay reduced invasion of PC3 cells by 37%. These results suggest that DIM inhibits adhesion, migration and invasion of the PC3 and DU145 cells and may be an effective antimetastatic therapy in addition to traditional chemotherapy.
In this study, we presented rapid and simple fabrication method of functionalized surface on various substrates as a universal platform for the selective immobilization of cells. The functionalized surface was achieved by using deposition of polyelectrolyte such as poly(allyamine hydrochloride) (PAH), poly(diallyldimethyl ammonium chloride) (PDAC), poly(4-ammonium styrene sulfonic acid) (PSS), poly(acrylic acid) (PAA) and fabrication of poly(ethylene glycol) (PEG) microstructure through micro-molding in capillaries (MIMIC) technique on each glass, poly(methyl methacrylate) (PMMA), polystyrene (PS) and poly(dimethyl siloxane) (PDMS) substrate. The polyelectrolyte multilayer provides adhesion force via strong electrostatic attraction between cell and surface. On the other hand, PEG microstructures also lead to prevent non-specific binding of cells because of physical and biological barrier. The characteristic of each modified surface was examined by using static contact angle measurement. The modified surface onto several substrates provides appropriate environment for cellular adhesion, which is essential technology for cell patterning with high yield and viability in the micropatterning technology. The proposed method is reproducible, convenient and rapid. In addition, the fabrication process is environmentally friendly process due to the no use of harsh solvent. It can be applied to the fabrication of biological sensor, biomolecules patterning, microelectronics devices, screening system, and study of cell-surface interaction.
To cause invasive disease, microorganism must attach firmly to the tonsillar epithelial cell. Once attached, the microorganisms can proliferated, form colonies and release extracillular toxins which can injure the underlying cells. The purpose of present study was to asertain whether or not there exist in vivo differences in bacterial attachment between patients with acute tonsillitis and healthy individuals as a control. This study was carried out on 20 patients suffering from acute tonsillitis and 20 healthy persons used as control. After scraping of the surface of tonsil, cellular mixture was stained with Acridine orange and the number of attached bacteria was calculated using a fluorescent microscope. The adherence rate was calculated as number of bacteria attached to each of 50 epithelial cells. simultaneously, we peformed conventional bacterial culture. Conclusively, the attachment of more than 10% bacteria to the tonsillar epithelial cell was significantly greater in acute tonsillitis group than control group, and there was a significant correlation between age and the number of the attached bacteria to the epithlium.
We evaluated the effects of various factors (e.g., serum, inhibitors of protein synthesis, and cytoskeleton and protein kinases) on early PMA-induced THP-1 cell adhesion using an adhesion assay with Sulforhodamine B (SRB) staining, which was used to assess the proliferation of the attached cells. THP-1 cell adhesion to a plastic substrate was detected 1 hr after exposure to Phorbol 12-Myristate 13-Acetate (PMA) and peaked after 18 hr. At concentrations > 25 nM PMA, the level of adhesion did not change. Based on our preliminary results, we used 25 nM PMA and 5 hr of culture as standard assay conditions. Early PMA-induced cell adhesion was not affected by the presence of serum or PD 98059 in the culture medium, but was affected by the addition of PKC inhibitors and cycloheximide. In the presence of actin inhibitor with PMA, the cell adhesion increased when comparing with PMA treatment only. Thus, early PMA-induced adhesion of THP-1 cells does not require serum in the culture medium, MAP-kinase activation, or actin polymerization, but does require de novo protein synthesis and PKC activation. Our SRB-based cell adhesion assay may be used to screen other PKC inhibitors.
The Sea:JOURNAL OF THE KOREAN SOCIETY OF OCEANOGRAPHY
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v.15
no.4
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pp.184-191
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2010
Epiphytic diatoms are very important organisms in the seagrass ecosystem because their colonization on leaves increases microtopography and provides attachment sites that make the leaves more hospitable for other epiphytes. Epiphytic diatoms were attached to the leaves in the following 3 manners: (1) parallel to the cells of the seagrass leaf or by molding the shape of the diatom along the cell shape of the leaf; (2) with increasing diatom density toward the leaf tip; (3) Cocconeis species as attaching species than the Naviculoid species as the second attaching species on the leaf tip. In addition, the epiphytic diatom communities on Zostera marina leaves differed from those on the Zostera japonica leaves, but were very similar to the epiphytic communities on Zostera caespitosa leaves. Our results suggest that the epiphytic community on seagrass leaves varied according to the leaf shape such as leaf length and width, but the leaf cell shape or size did not influence the dynamics of the diatom communities.
Asadisulphide were purified from Ferrula assafoetida by organic solvent extraction and chromatography. Its inhibitory effects on the TPA-induced adherence of HL-60 cells was analyzed. Since ethyl acetate extracts of F. assafoetida has the strongest inhibitory effect on adherence of HL-60 cells, it was re-extracted with ethyl acetate, hexane, and ethyl ether and chromatographed three times to isolate asadisulphide. At the minimum concentration of 2 $\mu\textrm{g}$/ml, asadisulphide inhibited adherence of 98% of HL-60 cells that have been treated with TPA. It also showed anti-cancer effect with no cytotoxity in the ED$_{50}$ value of 20 $\mu\textrm{g}$/ml.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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