The present sturdy was designed to determine the effect of the antiproliferation in human cancer cells using the ordinary vegetable soup (VS), the soup with broccoli (VSB) and the soup with tomatoes(VST). Human cancer cells identify the cancer cell growth with MTS, using stomach cancer cell line(AGS), human promyelocytic leukemia (HL-60) and lung cancer cell line (A549). VSB and VST are effective on the cancer cell growth inhibition activities of AGS and have a significance compared with VS. VST has a significance with HL-60 and VSB works well in A549 more than VS. Mixed vegetable soup is considered to applicate with functional materials and using for wellness life.
The present sturdy was designed to determine the effect of the antiproliferation in human cancer cells, using vegetable extract of Radish, Radish leaves, Burdock, Shiitake, Carrot of the ordinary vegetable soup. Human cancer cells identify the cancer cell growth with MTS, using stomach cancer cell line (AGS), human promyelocytic leukemia (HL-60) and lung cancer cell line (A549). Shiitake and Carrot are effective on the cancer cell growth inhibition activities of AGS. Radish leaves, Burdock, Carrot have a significance with HL-60 and Radish, Radish leaves works well in A549. The vegetable extracts which is effective for cancer cell growth inhibition is considered to applicate base line data for using functional materials and for wellness life.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.234-234
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1994
최근 새롭게 조명된 생약에 관한 여러 연구를 통해, 기존의 항암제 보다는 더 효과적이고 인체에는 부작용이 적은 항암제를 개발해내기 위해 국내 자생 생약중 총 103 종류( 95 손 98종 )을 채집하였다. 이들 생약을 암세포주( L1210, P333 D$_1$)와 장상세포주(Vero)을 대상으로 MTT colorimetric assay를 실시하여 항종양성에 대해 알아보았다. 이들 세포주에 대한 $IC_{50}$/ 값으로 세포독성능을 알아보았다. 그리하여 정상세포주에는 적은 세포 독성능을 나타내면서, 암세포주에는 높은 세포 독성능을 나타내는 생약제 6종( BuOH 추출물 2종, MeOH) 추출물 4종 )을 선정하였다. 이중 항암활성능이 가장 높은 미역줄나무(Tripteryrium regelii)를 선택하여 유기용매별로 추출, 그 각각에 대한 세포 독성능이 가장 높게 나타난 2분획을 선택하여 기존에 시판중인 Adriamycin과의 병용 투여시의 세포 독성능의 상승효과를 확인 하였다. 즉 Adriamycin과의 단독 투여보다 복합 투여시에 암세포주에 대한 세포 독성능이 높아졌고, 정상세포주에 대한 독성이 감소되는 효과가 나타났다. 또한 in vitro 에서는 세포 독성능이 다소 적더라도 in vivo에서 면역학적 활성이 기대되는 생약제 3종을 선정하여 항암성분의 분리 및 정제를 하여 항암성에 대하여 알아보았다.
In order to make in vivo model of human oral squamous cell cancer, we brought up BALB/C nude mice in specially designed housystem, and maintained some kind of human oral squamous cancer cell lines ; KB, SCC-4, SCC-9, SCC-15, SCC-25. Various concentration of cancer cells were inoculated subcutaneouly into flank area of nude mice. We observed each nude mouse more than 5 weeks after tumor inoculation. We appraised the results, measured the tumor size, and calculated the growing tumor volumes after tumor inoculation according to cancer cell line and concentration of cancer cells in media. Some cancer cell lines were rapidly growing in nude mice, but some cancer cell line couldn't grow in nude mice and resorbed completely. And in some cancer cell line, some nude mice showed continuously growing tumor, but other didn't show any tumor growing. And as a new try, we implanted specially disigned caps on the back of nude mice, and cancer cell lines were brought into the caps with media. We removed the cap after 1 week, and observed over 4 weeks. The shape and size of growing tumor were observed.
Background: Tumor necrosis factor(TNF) showed antitumor cytolytic effects on sensitive tumor cells in numerous in vivo and in vitro studies. But it could not be administered systemically to human because of severe systemic adverse effects at effective concentrations against tumor cells. Many studies showed that a high concentrations of TNF in the local milieu may evoke in vivo TNF-responsive mechanisms sufficient to suppress tumor growth. Recently developed technique of TNF gene transfer to tumor cells using retrovirus vector could be a good candidate for local TNF administration. TNF is also known to synergistically enhance in vitro cytotoxicity of chemotherapeutic drugs targeted to DNA topoisomerase II against TNF-sensitive tumor cell lines. In this study the in vitro chemosensitivity against DNA topoisomerase II targeted chemotherapeutic drugs was evaluated using some respiratory cancer cell lines to which TNF gene had been transferred. Method: NCI-H2058, a human mesothelioma cell line, A549, a human lung adenocarcinoma cell line and WEHI 164 cell line, a murine fibrosarcoma cell line were treated with etoposide and doxorubicin, which are typical topoisomerase II - targeted chemotherapeutic agents, at different concentration. The resultant cytotoxicity was measured by MIT assay. Then the cytotoxicity of the same chemotherapeutic agents was measured after TNF-$\alpha$ gene-transfer and the two results were compared. Results: The cytotoxicity was not increased significantly in WEHI164 cell line and A549 cell line but statistically significant increase was observed in H2058 cell line when TNF-$\alpha$ gene was transferred(p<0.05). Conclusion: These findings show that TNF-$\alpha$ gene transfer to respiratory cancer cell lines results in variable effects on chemosensitivity against topoisomerase II inhibitor among different cell lines in vitro and can be additively cytotoxic in certain selective tumor cell lines.
Callus growth of fusaric aicd-tolerance cell lines was different depending on fusaric acid concentrations. But callus growth on medium with fusaric acid was higher than that on medium without fusaric acid. Especially, RF-9, RF-11 and RF-15 showed high callus growth at $100\;{\mu}M$ fusaric acid. After subculturing on medium without fusaric acid for 5 weeks, fusaric acid -tolerant stability was investigated. Cell lines at $10{\mu}M$ fusaric acid were showed over 60% callus growth, callus growth rate at $100{\mu}M$ fusaric acid was decreased until 30-80% of control. Regeneration capacity of fusaric acid-tolerant cell lines was different depending on fusaric acid concentrations. Thirteen cell lines regenerated the shoot over at $50{\mu}M$ fusaric acid, and only two cell lines were not regenerated.
The Leydig cell found within the interstitium of the testis is important in the spermatogenesis. The differentiation of Leydig cell, even though relatively well known in animals, is not fully elucidated yet in human. In the present study, human fetal testes ($14\sim27$ weeks) obtained from artificially induced abortions legally without gross malformations were studied using light and transmission electron microscopy to make clear the differentiation process of Leydig cells in humans. Leydig cells could be classified as 4 types: fusiform, light, dark, and degenerating cells. The most immature cell was the fusiform cells found frequently at 14 weeks, which seemed to differentiate successively into light and dark cells. Light cells were most frequently found at 17 weeks and dark cells at 24 weeks. Light cells were found to have mitochondria and smooth endoplasmic reticuli (sER) most prominently than any other cell types. The lumen of sER became to be expanded with age. Some electron-dense inclusions were observed in the mitochondrial matrix of the dark cells. Lipid droplets found more in light cells than dark cells were most prominent at 16 weeks and gradually decreased after 20 weeks. Glycogen particles were rich in dark cells. Degenerating cells were most frequently found at 27 weeks. From the results, it is suggested that Leydig cells in human fetal testes undergo similar differentiation process af in animals.
사람 기관지상피세포주인 BEAS-2B에 담배연기농축액(CSC)을 처리하여 유도된 1198 세포주는 대조군 세포주인 1799에 비해 현저하게 낮은 glutathione 농도와 낮은 glutamate-cysteine ligase(GCL), glutathione peroxidase(GPx), glucose-6-phosphate dehydrogenase(G6PD), catalase 효소활성을 보였다. 두 세포주를 포도당 존재 하에서 4시간 hypoxia 처리 후 reoxygenation 하면서 시간에 따른 세포의 항산화계 활성을 측정한 결과, 1799 세포주에서는 의미 있는 변화가 관찰되지 않은 반면, 1198 세포주에서는 hypoxia 처리에 의해 glutathione의 농도 및 GSH/GSSG 비와 G6PD 활성이 감소되었고, reoxygenation 기에는 GPx, glutathione reductase(GRd), G6PD, superoxide dismutase 활성이 감소되었다. 그러나 reoxygenation 2시간 이후에는 GRd와 G6PD 활성의 회복이 관찰되었으며, 그 결과 GSH/GSSG 비율이 회복되었다. 이 실험 결과는 CSC가 능력을 현저히 저하시킬 수 있음을 보여준다. Glutathione은 hypoxia-reoxygenation에 의한 산화적 스트레스 하에서 항산화제로서의 역할뿐 아니라, 세포 내 GSH/GSSG 비의 변화를 통해 산화적 스트레스에 대한 항산화계의 적응 반응 여부를 결정하는 중요한 인자로 작용할 것으로 보여진다.
Purpose : 이 연구는 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대한 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb 추출물 (CWE) 의 증식억제, 항산화 작용 및 세포사 유발 효과를 검토하기 위해 이루어 졌다. Methods : SKBR3 세포주는 48시간 동안 다양한 농도 ($0-40\;{\mu}g/ml$)의 CWE를 첨가하면서 배양되었고, 세포의 생존 비율은 MTT 배양을 통해서 평가하였다. 또한 CWE의 증식억제 효과는 유방암 세포주의 세포사와 관련되어 있음을 형태학적인 변화와 올리고뉴클레오솜 DNA 분절을 통해 확인하였다. Results : CWE의 50%에서 효과를 나타내게 하는 약물농도인 $ED_{50}$ (effective dose 50%)은 $9.3+2.2{\mu}g/ml$이며, 약물의 농도에 의존하여 세포의 증식을 억제시켰다. 아울러, 다양한 농도와 배양시간에서 CWE가 ROS 생산을 억제하는 것을 밝힐 수 있었다. 따라서 이러한 작용과 항암예방효과는 농도와 노출 시간에 의존하였다. Conclusion : 이러한 관찰을 통해 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb의 열수 추출물은 SKBR3 인간 유방암 세포주에 대해 강한 증식억제 효과와 강력한 항산화효과 및 세포사의 유발 효과를 가지는 것으로 인식할 수 있다.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.191-191
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1994
본 연구는 D-galactosamine을 이용한 중기발암성 모델에서 세포성면역중의 하나인 natural killer (NK) 세포활성과 c-myc 종양단백의 발현을 알아보기 위하여 실시하였다. 수컷 6주령의 SPF SD랫드 50마리를 3개군으로 각 군당 20마리씩 나누어 배치하였다. 실험 0일에 제 1,2 군에서 DEN을 복강내로 체중 kg당 200mg 1회 투여하여 발암유발을 하였으며 대조군인 제 3군에는 saline을 투여하였다. 제 2주에 제 1군에는 강력한 발암촉진물질인 2-acetylaminofluorene (AAF)을 사료에 0.01% 투여하였으며, 제 2군은 미약한 발암촉진물질인 phenobarbital (PB)을 0.05%로 음수에 6주간 투여하였다 제 8, 15, 36주에 경시적으로 부검하였다. 제 8주에 부검시 GST-P$^{+}$ 병변이 잘 유도되어 전암병변의 유도가 잘 되었음을 확인하였다. 제 15주에 부검시 AAF를 투여한 군에서 glutathione S-transferase placental form (GST-p)에 대한 면역조직화학적 염색에서 AAF와 PB를 투여한 제 1군 및 제 2군의 간장에서는 주위조직과 한계가 명료한 GST-P$^{+}$ 증식성 결절과 병소를 관찰할 수 있었으나 기초 사료만을 투여한 제 3군은 어떠한 GST-P$^{+}$ 증식성 결절 및 병소를 관찰할 수 없었다. 랫드에서 natural killer세포는 사람이나 마우스에서 주로 자연살생능 (natural killing activity)을 보이는 LGL(lure granular lymphocyte)의 형태를 띄고 있었으며 LGL 이라고 부르는 것처럼 특징적으로 세포질 대 핵의 비율이 높고 azurophilic 과립을 세포질내에 함유하고 있으며 일반적으로 신장 형태의 핵을 가지고 있었다. 또한 세포의 크기는 small lymphocyte와 대식세포 (macrophage)의 중간 크기였다. 15주와 시험종료시 정상대조군인 제 3군의 랫드로 부터 분리한 NK 세포활성도 (% cytotoxicity)에 비하여 발암물질 투여군의 NK 활성도는 PB 투여군들의 NK활성도 보다 약간 낮았다. 랫드에서 c-myc 종양단백은 65KD 와 671KD 에서 band가 형성된 것이 관찰되었다. 시험 개시후 15주에 부검한 랫드의 간에서 c-myc 종양단백의 발현은 모든 처리군들이 대조군에 비하여 높게 발현되는. 것이 관찰되었으나 시험개시후 26주에 부검한 랫드의 간에서 c-myc 종양단백의 발현은 대조군에 비하여 차이가 거의 없었다. 따라서 랫드에서 화학적으로 유도한 간암발생 과정에서 NK 세포활성이 현저하게 억제되는 것으로 생각되며, c-myc 종양단백의 발현은 시험개시후 15주에 그 발현이 확실한 것으로 사료되어 진다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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