• Title/Summary/Keyword: 세포분리기

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유채박의 사료화를 위한 유해성분(Glucosinolate) 개량육종에 관한 연구 IV. 5-vinyl-2-oxazolidinethione 함량의 유전

  • Jung-Il Lee
    • KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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    • v.32 no.2
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    • pp.196-200
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    • 1987
  • 유채박의 사료화를 위한 성분개량을 목표한 육종의 기초자료를 얻고자 유채박의 OZT함량이 낮은 영산유채와 그 함량이 고함유인 품종들을 정역교배하여 얻은 F$_2$세대의 종실을 대상으로 OZT함량에 관여하는 유전자수와 세포질의 영향에 관하여 조사분석한 결과는 다음과 같다. 1. F$_2$세대에서 OZT함양을 영산유채에 기준한 낮은 개체의 출현율은 OZT함량이 저함유인 품종을 모본으로 교배한 조합에서 높게 나타났다. 2. OZT함량의 분리비는 63 : 1에 가장 적중도가 높아 3쌍의 열성유전자가 OZT생성에 관여하고 있는 것으로 추정되었다. 3. OZT함량의 유전에 세포질의 영향이 인정되었다.

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Neuroprotective effects of phenolic compounds isolated from Spiraea prunifolia var. simpliciflora (조팝나무(Spiraea prunifolia var. simpliciflora)로부터 분리한 페놀 화합물의 신경세포 보호효과)

  • Oh, Seon Min;Choi, Doo Jin;Kim, Hyoung-Geun;Lee, Jae Won;Lee, Young-Seob;Lee, Jeong-Hoon;Lee, Seung-Eun;Kim, Geum-Soog;Baek, Nam-In;Lee, Dae Young
    • Journal of Applied Biological Chemistry
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    • v.61 no.4
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    • pp.397-403
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    • 2018
  • The leaves of Spiraea prunifolia were extracted with 80% aqueous MeOH and the concentrates were partitioned into EtOAc, n-BuOH, and $H_2O$ fractions. The repeated $SiO_2$ or ODS column, and medium pressure liquid chromatographies for the n-BuOH fraction led to isolation of two phenolic glucosides. The chemical structures of these compounds were determined as isosalicin (1) and crenatin (2) based on spectroscopic analyses including Nuclear magnetic resonance and MS. Extracts were analyzed using UPLC-MS/MS providing a short analysis time within 5 min using MRM technique. The concentration of crenatin was higher as 9.53 mg/g and isosalicin was lower as 0.65 mg/g. Neuroprotective effects of these compounds against hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced neurotoxicity were evaluated. The results showed that exposure to $H_2O_2$ induced morphological changes, cell death and neurotoxicity in SK-N-MC cells. However, pretreatment with crenatin resulted in inhibition of morphological change, reduction of loss of cell viability and attenuation of neuronal damage. These results suggested that neuroprotective effect of crenatin isolated from S. prunifolia can be a good candidate for the development of health beneficial foods which can ameliorate the degenerative neuronal disease caused by oxidative stress.

Mathematical Analysis of a High Density Animal Cell Culture with a Spin-Filter (회전식 여과기를 이용한 고농도 동물세포배양의 수학적 해석)

  • 박흥우
    • KSBB Journal
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    • v.9 no.2
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    • pp.230-237
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    • 1994
  • Spin-filters are used as cell separation devices for achieving high cell density and high productivity in animal cell culture. We have proposed a model for the cell growth in a spin-filter perfusion culture and examined the effects on cell growth by several parameters including ammonia inhibition, specific growth rate, specific feeding rate, and cell retention. Results from computer simulation and sensitivity analysis indicate that the cell retention affects the cell growth mostly while there is a significant inhibition on cell growth by the ammonia accumulated during the culture. The specific feeding rate has minimal effects on cell growth, which is consistant with the fact that the cell growth with a step feeding is quite similar to that with a continuous feeding.

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Development of Continuous Clean Bioprocess for Kasugamycin Production (Kasugamycin 생산을 위한 연속 청정생물공정 개발)

  • Kim, Chang Joon;Park, Sun Ok;Chang, Yong Keun;Chun, Gie-Taek;Lee, Jong-Dae;Kim, Sangyong
    • Clean Technology
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    • v.4 no.1
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    • pp.45-59
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    • 1998
  • Continuous immobilized-cell culture was carried out for the production of kasugamycin, a secondary metabolite by a filamentous bacteria, Streptomyces kasugaensis, with an intention of reducing waste generation. A sporulation medium was developed for production of bulk amounts of spores, and the spores were entrapped into celite biosupports for immobilization. It was possible to effectively keep the immobilized-cells inside the reactor during the continuous culture by an efficient immobilized cell separator of decantor type on the outlet of the fermentor. Using this continuous immobilized-cell fermentor system, we investigated the effects of feed substrate and phosphate concentrations on kasugamycin production and chemical oxygen demand(COD). Comparing with the conventional suspended-cell batch culture, the kasugamycin productivity was observed to increase by 2.5 times, whereas COD per unit kasugamycin production decreased by 2.3 times in the continuous immobilized-cell culture. Based on these results, the continuous immobilized-cell system was considered to be a cleaner bioprocess than the conventional batch suspended-cell system.

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식물세포의 관류배양을 위한 초음파 분리기의 개발

  • Gu, Yeong-Han;Jo, Gyu-Heon
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 2000.11a
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    • pp.402-404
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    • 2000
  • In this study, we have developed an ultrasonic separation system for plant cells and its operating conditions in terms of voltage, flow rate and concentration were examined. For plant cell, the operation of ultrasonic separator highly depended on concentration of cells. Holding capacity highly depended on flow rate in chamber. Optimum voltage was 30V in high density culture

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천연물로부터의 다당류에 의한 항종양효과에 관한 연구 I. 형광기표지와 HPLC에 의한 당의 분석

  • 김영식;박호군
    • Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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    • 1993.04a
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    • pp.132-132
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    • 1993
  • 정상세포의 암세포로의 전환에 수반하는 세포표면상에 당구조 변화가 주목을 받고 있으며 이에 탄수화물이 세포간의 상호작용, 성장 등에 중요한 역할을 하리라고 생각된다. 따라서, 당구조 변화를 야기 시키는 당분해소효소나 전이활성 효소의 활성이 주요한 임상적 지표가 될 수 있다. 또한 천연물에서 유래된 다당류 등이 면역증강 효과를 나타내면서 항종양 효과를 보여준다. 이와같은 일을 원활히 수행하기 위해서는 당을 분석하는 기술이 필요하다. 당을 분석하는 방법으로 많이 이용된 것 중의 하나가 유도체를 만들어 GC에 의해서 확인하는 것이고 또한 당은 chromophore가 없기 때문에 굴절율의 검출기를 이용한 HPLC에 의해서도 분석이 가능하다. HPLC에 의한 또 다른 방법으로 당의 환원당 말단에 형광기를 결합시켜 감도를 매우 높게하여 역상 칼람을 이용해 당을 분리할 수 있다. 환원당에 결합시킬 수 있는 물질로는 대부분 amine기를 띄고 있고 결합하여 형광을 나타내는 특징을 지니고 있다. 본 연구는 형광기를 결합시켜 전기영동과 HPLC에 의해 동시에 추적이 가능한 물질을 결합시켜서 분석을 용이하게 한 방법을 이용하여 단당류를 $C_{18}$ column에 의해서 분리하였고 또한 모델로서 면역증강제로 사용되는 운지버섯 및 영지버섯 다당류와 생약에서 분리한 지유의 당을 분석하였다. 현재까지의 결과로 가장 좋은 방법은 $C_{18}$-->phenyl column을 연결하여 isocratic 방법으로 분리하였을 때이었다. 버섯의 당은 대부분이 glucose로 이루어졌고 지유는 arabinose가 주 구성성분이었다. 위의 분석 기술을 이용하면 피코몰 범위내에서 정확한 구조를 가진 항암효과의 올리고당 및 암세포의 발현에 따른 당단백질의 당의 구조를 규명하는데 도움을 줄 수 있다.aeonol이 aspirin과 같거나 강한 사망 억제 효과가 있었다.cyclopropyl-7-(2-furanyl) -6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinoline carboxylic acid (compound 4), 1-cyclopropyl-7-(2-thiophenyl)-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinoline carboxylic acid (compound 6) ,1-cyclopropyl-7-(3-pyridinyl)-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinoline carboxylic acid (compound 8), 1-cyclopropyl-7-(2-fluoro-3-pyridinyl)-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinoline carboxylic acid (compound 10)를 합성하였다.10^{-7}$ M)에 의한 단백인산화에 대하여는 더 미약한 억제-효과를 나타내었다. 이상의 결과는 PDE-1과 항우울약들의 항혈소판작용은 PKC-기질인 41-43 kD와 20 kD의 인산화를 억제함에 기인되는 것으로 사료된다.다. 것으로 사료된다.다.바와 같이 MCl에서 작은 Dv 값을 갖는데, 이것은 CdCl$_{4}$$^{2-}$ 착이온을 형성하거나 ZnCl$_{4}$$^{2-}$ , ZnCl$_{3}$$^{-}$같은 이온과 MgCl$^{+}$, MgCl$_{2}$같은 이온종을 형성하기 때문인것 같다. 한편 어떠한 용리액에서던지 NH$_{4}$$^{+}$의 경우 Dv값이 제일 작았다. 바. 본 연구의 목적중의 하나인

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미토콘드리아 미세구조의 변형과 생쥐 초기 배아의 발생능력과의 연관성에 대한 연구

  • 전진현;임천규;궁미경;고경남;김문규
    • Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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    • 2002.11a
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    • pp.106-106
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    • 2002
  • 미토콘드리아는 세포내의 에너지대사에서 중요한 역할을 수행하는 세포내 소기관이며, 자체의 유전물질이 모계를 통해 유전되는 특징을 가지고 있다. 포유류 초기 배아의 발생과정에서 미토콘드리아의 역할과 기능에 대한 연구는 미진한 상태이다. 본 연구에서는 생쥐 초기 배아의 발생과정에서 관찰할 수 있는 미토콘드리아 미세구조의 변화 양상을 살펴보고, 이와 초기 배아의 발생 능력과의 관련성을 밝혀보고자 하였다. 과배란 유도된 ICR 생쥐로부터 배란된 난자와 2-세포기 배아를 수획하여 76 배양액으로 포배기까지 체외배양하면서, 각각의 발생단계에 따라 시료를 수획하였다. 미토콘드리아 미세구조의 변화는 일반적인 투과전자현미경방법(TEM)을 이용하여 관찰하였다. 미토콘드리아의 미세구조는 배란 난자에서 4-세포기 배아까지는 구형이고 크리스타가 발달하지 않은 원시형태였지만, 포배기로 발달함에 따라 크리스타가 발달된 막대형의 전형적인 미토콘드리아로 분화됨이 관찰되었다. 체외배양 중에 발생이 지연되거나 정지된 배아에서 관찰한 미토콘드리아의 미세구조는 공포화 (vacuolization), 크리스타 발달 지연, 손상된 미토콘드리아의 세포막 등과 같은 비정상적인 변형을 관찰할 수 있었다. 또한, 극체에 존재하는 미토콘드리아의 미세구조는 정상적인 핵내의 유전자와의 상호작용이 없어 미분화 상태로 포배기까지 유지되는 것을 관찰하였다. 이상의 결과를 통해 미토콘드리아의 정상적인 분화 과정이 초기 배아의 발생능력과 관련되어 있음을 알 수 있었으며, 포유류 초기 배아의 체외배양시스템을 개선하는데 미토콘드리아 미세구조의 관찰과 변화에 대한 고려가 있어야 될 것으로 생각된다. buffer A 용액으로 세척하여 유리 petri dish의 바닥에 부착된 macrophage만을 cell scraper로 분리하였다. 분리한 macrophage는 0.5-1 $\times$ $10^{6}$ cells/$m\ell$가 되게 조정하여, IL-I 을 0.001, 0.01, 0.1 또한 1 ng/$m\ell$를 첨가하여 농도에 따른 효과를 조사하였고, 각각 24, 48, 72, 96 또한 120시간을 배양하여 시간에 의한 효과도 실시하였다. 각 배치구에서 얻어진 배양액은 TGF-$\beta$를 조사하기 전까지 -2$0^{\circ}C$에 동결 보존하였다. TGF-$\beta$의 측정은 TGF-$\beta$ kit(promega, USA)를 이용하여 실시하였으며, 통계학적 분석은 Anova test를 Statview program을 이용하여 분석하였다. 시험의 결과 대조구에 비해 IL-I 첨가구는 2-3배의 TGF-$\beta$생산을 보였으며, 배양시간에 따른 생산은 시간이 지남에 따라 약간 상승하는 경향을 보였으나, 유의적인 차이를 보이지는 않았다. 또한 IL-I의 농도에 따른 생산의 변화는 IL-I의 농도에 따라 약간의 차이를 보였고 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 임신 및 비임신의 경우 임신우의 비장 macrophage가 비임신보다는 약간 상승하는 거스로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 IL-I $\alpha$$\bet

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Effects of Taeumin Chungsimyeunjatang on the Cerebral neurons injured by Hydrogen Peroxide (태음인(太陰人) 청심연자탕(淸心蓮子湯)이 Hydrogen Peroxide에 손상(損傷)된 백서(白鼠)의 대뇌신경세포(大腦神經細胞)에 미치는 영향(影響))

  • Ok, Yun-young;Ryu, Do-gon;Kim, Kyung-yo
    • Journal of Sasang Constitutional Medicine
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    • v.11 no.2
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    • pp.251-266
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    • 1999
  • 1. Purpose : The purpose of this study was to determine the effects of Chungsimyeunjatang on the cerebral neurons injured by hydrogen peroxide($H_2O_2$). 2. Methods : I observed cell viability in mouse cerebral neurons exposed to hydrogen peroxide by NR assay and MTT assay and determined lipid peroxidation and amounts of LDH release in mouse cerebral neurons exposed to hydrogen peroxide. After administration of Chungsimyeunjatang water extracts, I observed significant changes of cell viability, lipid peroxidation and amounts of LDH release in mouse cerebral neurons exposed to hydrogen peroxide. 3. Results : Hydrogen peroxide showed neurotoxicity. Cell viability in mouse cerebral neurons exposed to hydrogen peroxide decreased in NR assay and MTT assay. Lipid peroxidation and amounts of LDH release in mouse cerebral neurons exposed to hydrogen peroxide increased. Chungsimyeunjatang was very effective in blocking hydrogen peroxide-induced neurotoxicity.

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Ultrastructural Changes of Epididymal Epitheliurn during Sexual Maturation in Mouse (성적 성숙에 따른 생쥐 부정소 상피세포의 미세구조 변화)

  • 윤현수;최규완;김종흡;김문규
    • The Korean Journal of Zoology
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    • v.33 no.1
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    • pp.78-93
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    • 1990
  • The ultrastructure of epididymal epithelium of 10, 20, 35 and 80 day-old mouse was observed to study the differentiation and function of the epithelial cells in connection with the absorption and secretion during sexual matruation. The differentiation of epididymis was divided into three phases of, 1) undiflerentiated phase until the day 20 after birth, 2) growing and differentiating phase between the day 20 and 35, and 3) maturating phase up to the adult. Each phase was closely related with the lumination of seminiferous tubule and the influx of spermatozoa within testicular fluid from testis. In adult, the ultrastructural features appeared an absorptive function in the principal cells of proximal caput epididymis, and a strong activity of protein synthesis and secretion in distal caput, corpus and cauda epididymis. Clear cells were predominantly located in corpus and cauda epidiymis, and plenty of absorption vesicles including membranous particles assumed to be the cellular residues from spermatozoa were observed at apical region. Therefore, the distribution of various cell types of epithelium and the ultrastructure even in the same type of epithelial cell, were different according to the epididymal regions.

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A Continuous Cell Separation Chip Using Hydrodynamic Dielectrophoresis Process (유체동역학적 유전영동법을 이용한 극소형 연속 세포분리기)

  • Doh Il;Cho Young-Ho
    • Transactions of the Korean Society of Mechanical Engineers A
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    • v.29 no.1 s.232
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    • pp.53-58
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    • 2005
  • We present a high-throughput continuous cell separation chip using hydrodynamic dielectrophoresis (DEP) process. The continuous cell separation chip uses three planar electrodes in a separation channel, where the positive DEP cells are moved away from the central streamline while the negative DEP cells remain in the central streamline. In the experimental study, we use the mixture of viable (live) and nonviable (dead) yeast cells in order to obtain the continuous cell separation conditions. For the conditions of the electric fields frequency of 5MHz and the medium conductivity of $5{\mu}S/cm$, the fabricated chip performs a continuous separation of the yeast cell mixture at the varying flow-rate in the range of $0.1{\sim}{\mu{\ell}/min$.; thereby, resulting in the purity ranges of $95.9{\sim}97.3\%\;and\;64.5{\sim}74.3\%$ respectively for the viable and nonviable yeast cells. present chip demonstrates the constant cell separation performance for varying mixture flow-rates.