• Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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• 2003.10a
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• pp.53-53
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• 2003

참가자미, Limanda herzensteini는 가자미목 (Pleuronectiformes), 가자미과 (Pleuronectidae)에 속하며, 우리나라의 동해, 일본의 세토내해 이북, 중국 및 사할린 근해에 분포하는 어종이다. 본 종은 연안정착성 어종으로 동해안에서 낚시 및 저인망 어업에 의해 어획되는 산업적 가치가 큰 고급어종이며, 저수온에 강하여 한류성 해역에서의 양식 가능성이 매우 높다고 할 수 있다. 또한 최근에는 참가자미의 자원량 감소가 두드러지고 있으므로 자원증강이 절실히 요구된다. 이 연구에서는 주 어획지역인 강원도 주문진 인근해역에서 1998년 9월부터 1999년 10월까지 자연산 참가자미의 연간 생식소중량지수의 변화를 조사 하였으며, 조직학적 조사에 의한 생식소 발달과정과 생식주기를 밝혔다. 정소는 정소엽 형태이며, 각각의 정소엽은 여러개의 소낭구조를 가진다. 각 소낭내의 생식세포들은 같은 단계의 발달상태를 보인다. 난소는 원추형의 낭상으로 체강벽에서 연결되는 난소간막에 의해 부착되어 있으며, 내부는 결체성 조직인 다수의 난소박판으로 구성되며, 이곳에서 난원세포가 유래한다. 수컷의 GSI는 1월에 가장 높았으며, 암컷의 GSI는 3월에 가장 높은 값을 보였다. 생식주기는 성장기(6~9월), 성숙기(10~12월), 완숙 및 산란기(1~3월) 그리고 회복 및 휴지기(4~5월)로 나눌 수 있었다. 난모세포의 발달양식은 난군동기발달형에 속하였다.

• Journal of Aquaculture
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• v.17 no.2
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• pp.128-132
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• 2004

Reproductive cycle of the brown sole, Limanda herzensteini was investigated by means of histological methods. The testis showed the presence of seminiferous tubule. The tubule consisted of many testicular cysts, each of which contained numerous germ cells - all at the same developmental stage. The ovary consisted of several ovarian lamellae and the oogonia originated from the inner surface of the ovarian lamella. Oocyte development was group-synchronous. Gonadosomatic index (GSI) of the male and female was the highest in January and March, respectively. Reproductive cycle could be classified into the growing (June-September), maturation (October-December), ripe and spent (January-March), and recovery and resting (April-May).

• Journal of Animal Science and Technology
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• v.55 no.5
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• pp.427-434
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• 2013

This study was conducted to establish methods for preserving chicken primordial germ cells (PGCs) for long-term storage in liquid nitrogen and for developmental engineering or preservation of species. The purpose of this study is to clarify the effects of fetal bovine serum (FBS) or chicken serum (CS) treatment on the viability of cryopreserved PGCs from Korean Native Chicken (Ogye). PGCs separated from a germinal gonad of an early embryo at day 5.5-6 (stage 28) were suspended in a freezing medium containing freezing and protective agents (dimethyl sulfoxide (DMSO), ethylene glycol (EG) and glycerol). The values from 0, 5, 10, and 15 % DMSO plus FBS treatment were 21.6, 30.36, 36.42, 50.39, and 48.36 %, respectively. The viability of PGCs after freeze-thawing was significantly higher for 10% EG plus FBS treatment than for 10% EG + FCS treatment (p<0.05) (64.36% vs. 50.66%). This study establishes a method for preserving chicken PGC that enables systematic storage and labeling of cryopreserved PGC in liquid nitrogen at a germplasm repository and an ease of entry into a database. In the future, the importance for this new technology is that poultry lines can be conserved while work is being conducted to improve the production of germline chimeras.

• Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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• v.24 no.5
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• pp.327-339
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• 1991

The present paper is a histological study of neurosecretory cells in the brain and the thoracic ganglion with the gonadal development in Palaemon serrifer. The reproductive cycle includes the successive stages of the growing period (February-March), the mature period(April-May), the ripe and spent periods(June-August) and the degenerative and resting periods(September-January). The neurosecretory cells are grouped into four types based on Matsumoto(1958) : A-,A'-, B- and E-cells. A- and A'-cells are $80-90{\mu}m,\;B-cell\;is\;30-40{\mu}m$ and E-cell is $10-15{\mu}m$. A- and B-cells are the positive to CHP and AF, while B-cell is the positive only to AF. The secretory grannules of a A-cell are transported to the axon, and at the same time they are discharged through the peripheral membrane. Of the four neurosecretory cells, A- and I-cells show the difference of secretory activity according to the gonad developmental process. In the female, A-cells show secretory activity for the ripe and spent periods, while I-cells show for the mature, ripe and spent periods. In the male, A-cells show secretory activity for the mature, ripe and spent periods, while I-cells show for the growing, mature, ripe and spent periods.

• Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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• 2003.10a
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• pp.21-21
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• 2003

경골어류의 뇌하수체에서는 두 종류의 생식선자극호르몬 (FSH, LH)이 생산되며, 이 호르몬들은 공통적인 α 쇄와 특이적인 β 쇄를 가진다. 연어과 어종들에서, FSH는 난황형성과 정자형성의 역할을 하며, LH는 배우자의 최종성숙을 조절한다. 냉수성 고유어종인 열목어 (Brachymystax lenok)의 멸종을 방지하고 종묘생산을 원활히 하기 위하여 먼저 열목어의 GTHα, FSHβ 및 LHβ 쇄를 cloning하여 염기서열을 결정하였다. 열목어 GTHα, FSHβ 및 LHβ의 cDNA는 산천어의 해당 cDNA와 높은 상동성 (각각 84, 95, 98%)을 보였다. 다음으로 기능적인 생식선자극호르몬을 제작하기 위해서 2개의 쇄를 single-strand로 연결하여 진핵세포를 숙주로하는 시스템에서 생식선자극호르몬을 생산할 수 있는 구조체인 FSHβ-GTHα (235 amino acids) 와 LHβ-GTHα (240 amino acids)를 각각 재조합하였다. 또한 각각의 융합단백질 생산용 구조체의 3'-말단에는 단백질추출이 용이하도록 histidine×6 구조를 첨가하였다. 이상의 단일쇄 FSH와 LH 유전자재조합 산물을 포유동물 유래의 세포 (CHO-K1)에 liposome chemical을 사용하여 유전자도입 후 세포에서 분비되는 단백질을 모니터링하였다. 배지를 부분정제한 후 SDS-PACE로 조사한 결과, LH 재조합 유전자를 도입한 후 48-60 시간째에 약 25 kDa의 단백질로서 관찰되었다. 현재 FSH 재조합 유전자에 대해서도 조사중이며, 향후 이를 재료로 하여 기능형 생식선자극호르몬을 생산하고 추출하기 위한 연구가 계속적으로 수행 될 것이다.

• The Korean Journal of Malacology
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• v.11 no.2
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• pp.123-134
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• 1995

한국산 산민달팽이 (Incilaria fruhstorferi)의 자성 생식기관을 조직화학적 방법을 이용, 광학현미경으로 관찰한 결과는 다음과 같다. 알부민선(albumen gland)은 대자웅동체관 위에 있으며, 산성 점액다당류와 중성 점액다당류 그리고 단백질성 분비물을 형성하는 세포들로 구성되어 있었다. 수정실(fertilization chamber)을 구성하는 내강 상피는 불규칙한 단층섬모원주상피와 위중층섬모원주상피세포가 3대 1의 비율로 구성되어 있으며, 결합조직에서 형성된 산성점액다다류성 과립들이 상피세포를 거쳐 내강 속으로 분비되었다. 또한 수정실의 외측표면은 기능은 알 수 없으나 산성 점액다당류를 분비하는 대형 세포들로 둘러싸여 있었다 . 수란관(oviduct)의 내강은 크로 작은 돌기로 인해 별모양을 나타내었다. 내강은 위중층원주상피세포로 구성되었으며 그들 사이에서 분비세포의 존재는 확인되지 않았다.질(vagina)의내강은 덮은 세포는 해면조직 형태의 세포와 단층섬모원주상피세포 그리고 위중층섬모원주상피세포 등 다양한 종류로 구성되어 있었으며, 잘 발달된 두터운 근육층은 질의 신축성을 높여 주었다. 정자낭(spermatheca)은 그 형태와 크기, 색깔 등이 종에 따라 다양하고, 질과 연결되는 자성생식기관으로 알려져 있다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• v.32 no.2
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• pp.121-132
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• 2005

연구목적: 본 연구에서는 비폐쇄성 무정자증 환자에서 나타나는 정자형성과정의 이상과 고환세포의 세포자연사와의 연관관계 여부를 확인하였다. 또한 SELDI-TOF MS 분석을 통하여 고환 내 단백질 발현 양상을 확인하고, 질환에 따른 효과적인 biomarker 개발 가능성 여부를 확인하였다. 재료 및 방법: RT-PCR 및 면역조직화학법을 사용하여 고환에서의 Fas, FasL, Bcl-2, Bax와 Caspase-3의 발현 양상을 확인하고, in situ DNA 3'-end-labelling 방법으로 고환세포의 세포자연사 양상을 확인하였다. SELDI-TOF MS 분석법에 의한 고환의 병리학적 소견에 따른 단백질 발현 변화는 소수성 칩 ($H_4$)을 사용하여 분자량 10~100 kDa 범위 내에서 분석하였다. 결 과: 정상적인 정자형성과정을 보이는 폐쇄성 무정자증 환자의 고환에 비해 지주세포 증후군 (Sertoli cell only syndrome)과 성숙정지 (maturation arrest)를 보이는 고환 내 생식세포와 지주세포에서 세포자연사가 현저하게 증가한 것을 확인할 수 있었다. 세포자연사 관련인자들의 발현 양상을 확인한 결과, 지주세포 증후군과 성숙정지 환자군에서 Fas와 FasL mRNA의 발현이 증가하였으나, bcl-2, bax와 caspase-3 mRNA 발현의 경우에는 두 질환 모두에서 유의한 차이를 확인할 수 없었다. FasL 단백질 발현의 경우, 세포자연사의 증가가 관찰되었던 지주세포 증후군과 성숙정지를 보이는 환자의 간질세포와 지주세포에서 증가하는 양상을 나타내었다. SELDI-TOF MS 분석 결과에서 폐쇄성 무정자증 환자군에 비해 전체적인 단백질 발현양이 지주세포 증후군과 성숙정지 환자의 고환에서 감소하는 양상을 보였으며, 특히, 16.730 kDa 단백질의 현저한 감소를 확인할 수 있었다. 결 론: 본 연구결과를 통해 비폐쇄성 무정자증 환자에서 나타나는 정자형성과정의 장애는 생식세포의 비정상적인 세포자연사와 연관되어 있으며, 고환 내 Fas와 FasL의 비정상적인 발현이 주된 원인인 것을 확인할 수 있었다. 또한, SELDI-TOF MS 분석법을 통한 단백질 발현 양상의 연구는 무정자증 환자에서의 다양한 병리학적 소견을 쉽게 파악할 수 있는 biomarker 발굴뿐만 아니라 질환의 원인규명을 위한 연구에도 유용하게 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

• Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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• v.13 no.4
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• pp.125-134
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• 1980

The dovelopment of the gonads, gametogenesis and the reproductive cycle of the topshell, Turbo cornutus Solander, which is one of valuable food animals fom Korean waters were studied by photomicroscophy. The materials were monthly collected from Bangeojin, Jeongjari and Dangweol, all these places being located in the south-eastern part of Korea, for one year from March 1979 to February 1980. Topshell is dioecious and oviparous. Gonad is situated on the surface of liver, which lies posteriorly. The surface of ovary and testis is covered with a fibrous membrane, membrane of connective and muscular fibers and then an outermost layer of simple-columnar epithelial cells which are composed of cuboidal and columnar mucous gland cells. Primordial germ cells develop on the germinal epithelium of ovarian and testicular lobuli which are originated from the fibrous membrane and extend toward hepatic gland. Undifferentiated mesenchymal tissue and pigment granular cells are abundantly distributed between the growing oocytes and spermatocytes in the early development stages. With the further development of the ovary and testis these tissue and cells gradually disappear. Then the undifferentiated mesenchymal tissue and pigment granular cells are considered to be related to the growing of the oocytes and spermatocytes. Early multiplicating oogonium is ca. $10\mu$ in diameter and nucleushaving a central nucleolus is ra. $8\mu$. As the oocytea grow to ca. $50-60\mu$ by the increase of cytoplasm, the oocytes become look like bunches of grapes which are attached to ovarian lobuli. Mature eggs are ca. $180-210\mu$ in diameter and it is surrounded by a gelatinous membrane of ca. $10\mu$ in thickness. After spawning, undischarged ripe eggs and spermatozoa remain in the ovary and testis respectively for some time. Then they finally degenerate, and proliferation of new oogonia and spermatogonia occur along the germinal epithelia of newly developed ovarian and testicular lobuli. Reprocuctive cycle of Turbo cornutus could be classified into five successive stages: multiplicative, growing, maturer spent and recovery stages. Spawning occurs from August to November with Peak spawning from early September to late October.

• Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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• 2001.11a
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• pp.71-73
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• 2001

In this study, we could improve transmission efficiency of germline chimeras by transfer of gonadal PGCs (gPGCs) cultured in vitro. Of hatched recipient chicks, 301 chickens (141 males and 160 females) were brought up to sexual maturity and these WLs (KOC) were mated with KOCs for testcross, resulting in 27 germline chimeras (15 males and 12 females) identified by black feather color of their progenies. The production efficiency of germline chimera production of experimental groups was observed (P=0.6831). The average transmission efficiency of proven germline chimeras was 0.6 ∼56.5% (15.0% on average). The transmission efficiency of experimental group which were transferred 10-days cultured gPGCs without Ficoll treatment was highest (49.7%) and that of experimental stock which transferred non-cultured gPGCs with Ficoll treatment was lowest (0.6%). The duration of in vitro culture before transferring was significantly important for the high efficiency of germline transmission. Transferring 10-days cultured gPGCs made the transmission efficiency higher rather than transferring non-cultured and 5-days cultured gPGCs, 50 times and 10 times, respectively (p<0.0001). However, Ficoll treatment for increasing the population ratio of gPGCs negatively affected the transmission efficiency and the effects of sexuality and the reciprocal interaction between treatments showed no significant differences. These findings demonstrated that the crucial factors for improving the germline transmission were the duration of in vitro culture prior to transfer. Thus, we developed the complete system for production of germline chimera using cultured gPGCs with highly improved efficiency and this system would be useful for genetic manipulation and obtaining the transgenic aves.

• Journal of Aquaculture
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• v.18 no.2
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• pp.76-80
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• 2005

The early gonadal development and sex differentiation of the mandarin fish, Siniperca scherzeri was described from hatch to the 130th day post-hatch (DPH). Primordial germ cells were observed on the just hatched fry (5.10 mm in total length (TL)) and began to protrude into the peritoneal cavity between mesonephric duct and gut. The primordial gonad, with the formation of genital ridge, developed on the 8-10th DPH (10.77-12.47 mm TL). Ovarian differentiation was identified by the presence of ovarian cavity and meiotic oocytes from the 40th DPH (29.75 mm TL). Testicular differentiation was identified by the presence of spermatogonial cells with efferent duct also from the 40th DPH. Sex differentiation of the mandarin fish was identified as gonochoristic type.