• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2003.06a
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• pp.41-41
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• 2003

본 연구는 한우 복제수정란의 이식에 의해 고능력 복제한우를 생산할 수 있는 효율과 산자의 성장능력을 검정하기 위해 수행되었다. 고능력 한우의 귀세포를 이용하여 체세포복제수정란을 생산하였고 그 신선수정란을 대리모에 이식한 결과는 다음과 같다. 2000년 (n=35)과 2001년 (n=121)에 이식한 복제소의 분만율은 각각 5.71%, 8.26%로 나타났다. 복제송아지의 임신기간은 평균 287일 (279~295일)이었으며 같은 기간내 인공수정 우군의 평균 임신기간인 287일 (255~293)과 동일하였다. 복제송아지의 분만시 사산율은 6.67%였으며, 인공수정시의 94.44%와 비슷하였다. 그러나 분만후 복제송아지의 생존율은 36.67%로서 인공수정의 100% 보다 매우 낮았다. 그리고 태어난 후 200일 이상 생존한 송아지의 생시 평균체중은 28.25kg (AI 23.67kg)이었고, 복제송아지의 경우 생시체중이 표준체중보다 적거나 (<20kg) 또는 거대체중 (>35kg)의 경우는 분만후 대부분 사망하였다. 상기 결과에 의해 현재의 복제기술에 의한 한우 생산효율은 아주 낮고 분만 후 거대체중등 비정상인 경우가 많아 생존율이 낮음을 알 수 있었다. 따라서 이에 대한 원인구명에 관한 기초연구의 확대가 요망된다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• v.32 no.1
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• pp.51-58
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• 2008

This study was performed to investigate the relation between birth weight and survivability on the production of cloned Hanwoo calves. The 580 cloned embryos were transferred into the 293 recipients. The pregnancy rate of the cloned embryos was 72.3% at 50 days after embryo transfer, and then the rate was dramatically decreased. The mean gestation lengths were 287 days in both clone (range of$279{\sim}295$ days) and artificial insemination (AI, range of $255{\sim}293$ days) calves, respectively. The mean birth weight of cloned calves (30.3kg) was significantly higher compared to that of AI calves (23.7kg) (p<0.05). Among the cloned calves, the birth weight was not different in both normal delivery (n=17, 29.9kg) and caesarean section (n=14, 32.3kg). The weight, however, was significantly higher in the clones (n=18, 32.8kg) dead within 175 days than that of the clones (n=11, 28.3kg) alive more than 175 days after birth (p<0.05). Interestingly, all cloned calves weighed <15kg (n=5) or >35kg (n=9) at birth have been dead within 175 days from the date of birth. The causes of death in the cloned calves were premature birth (n=2, 10.0%), abnormal function of lung and liver (n=2, 10.0%), abnormal function of lung (n=4, 20.0%), malformation (n=4, 20.0%), unknown (n=4, 20.0%), and sudden death syndrome (n=4, 20.0%), respectively. Our findings suggest that normal birth weight is one of the most important factors to survive more than 6 months in cloned calves.

• Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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• 2003.10a
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• pp.135-135
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• 2003

• Journal of Embryo Transfer
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• v.19 no.3
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• pp.239-244
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• 2004

The present study was to investigate the pregnancy rate, gestation length and abortion rate of the recipients which transferred blastocysts produced by in-vivo collection, in-vitro fertilization (IVF) and nuclear transfer (NT). In addition, we investigate the birth weight and survival rate of the calves derived from the same methods. The pregnancy rate was 56.3％ in-vivo blastocysts, significantly higher than 19.4％ in NT blastocysts (p<0.05) but not significantly different from 30.0％ in IVF blastocysts. The abortion rate and the gestation length did not differ among the treatment groups (abortion rate: 0, 22.2 and 16.7％ respectively; gestation length: 278.8, 289.4 and 281.4 days respectively). The mean birth weight was significantly higher in NT calves (39.9kg) than in-vivo calves (25.5kg p<0.05). Recipients of in-vivo blastocysts (n=9) had all normal delivery and all of their calves survived on the 60$^{th}$ day from the birth. Recipients of IVF blastocysts (n=7) had all normal delivery but one of their calves died on the 48$^{th}$ day from the birth. Among recipients of NT blastocysts (n=5), three had normal delivery and two had Caesarean section. Among calves born through normal delivery (n=3) two died just after delivery but those born through Caesarean section all survived on the 60th day from the birth.

• 월간낙농육우
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• s.166
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• pp.84-89
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• 1996

• 월간낙농육우
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• s.156
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• pp.55-59
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• 1995

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2001.03a
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• pp.65-65
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• 2001

본 연구는 칡소 귀세포를 공여핵으로 이용한 체세포 복제송아지 생산에 있어서 배양방법이 배발생 및 배반포 발달율에 미치는 영향과 체세포 복제란의 이식후 수태율에 미치는 영향을조사하여 복제송아지의 생산 효율을 제고하고자 실시하였다. 실험에 공시된 공여핵은 칡소 의 귀세포를 회수하여 10%FBS가 첨가된 DMEM배지에서 3-4일 동안 배양하여 monolayar Confluent 형성 후 0.25% trypsin을 처리하여 준비하였으며 공여세포는 적어도 passage가 5회 이상의 세포만을 사용하였다. 복제수정란의 생산은 18-20시간 동안 체외성숙 된 난자의 핵을 제거하고 공여핵을 주입하여 2.2kv/cm, 10$\mu\textrm{s}$의 전압으로 2회 자극함으로 융합하였으며, 융합된 난자는 5$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ ionomycin에서 4분간, 1.9mM 6-dimethyl aminopurine에서 4시간동안 배양하여 활성화처리를 하였다. 핵이식수정란의 배양은 39$^{\circ}C$, 5%$CO_2$ incubator에서 처리구 I은 CRlaa에서 4일간 배양 후 CR2aa배지에서 배양, 처리구II는 CRlaa에 4일간 배양후 CR2aa배지에 cumulus cell과 공배양, 처리구III은 CR2aa 배지에 camulus cell과 함께 배양하였다. 수정란이식은 발정발현 7일째에 비외과적 방법으로 젖소 미경산우에 이식하였으며 이식란수는 2~4개의 핵이식된 수정란을 이식하였다. 임신진단은 45~60일 사이에 직장검사 및 초음파 진단기를 이용하여 실시하였다. 배양방법에 따른 배발생율은 처리구 I에서 92.2 %(83/90)으로 처리구II와 III의 62.4%(63/101)와 77.8%(144/185)에 비하여 높게 나타났으나 배반포 발달율은 처리구II와III에서 65.1%(41/63)와 50.0%(72/144)로 처리구 I의 30.1%(25/83)보다 높게 나타났다. 각 처리구에 따른 수정란 이식후 수태율은 처리구II와 III에서 공히 20%의 수태율을 나타낸 반면 처리구 I에서는 수태가 되지 않았다. 따라서 체세포 복제수정란의 생산에 있어서 배반포 발달율과 수태율을 높이기 위해서는 단순배양보다 공배양이 더 효과적인 것으로 사료되지만 이런 결과가 복제송아지 생산효율에 있어서도 효과적일지는 향후 더 많은 연구가 있어야 할 것으로 사료된다.

• Proceedings of the KSAR Conference
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• 2002.06a
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• pp.7-7
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• 2002

체세포 복제기법에 의한 복제란 이식우는 수태율이 매우 낮은 것으로 보고되어 있으며, 분만지연 및 유ㆍ사산의 발생율이 높은 실정이므로, 이에 대한 근본적인 원인 분석이 요구되고 있다. 본 연구는 체세포 복제 한우의 수태율이 낮은 원인을 규명하고, 특히 분만직후의 체세포 복제 송아지의 생존율을 증진하기 위해 복제란 이식우의 임신 말기의 생리적 특성을 검토하였다. (중략)

• The Science & Technology
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• v.32 no.10 s.365
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• pp.24-26
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• 1999

생명공학의 혁명은 1952년 왓슨과 클릭이 DNA이중나선구조를 밝히면서 시작되었다. 78년엔 시험관아기가 영국에서 태어났고 97년엔 복제양 돌리가 태어났으며 올해에는 우리나라에서 복제송아지 영롱이가 탄생했다. 그리고 21세기 초반에 펼쳐질 인간유전자 지도의 완성과 인체용 동물대체장기의 생산으로 또한번의 파란을 예고하고 있다.

• Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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• 2003.10a
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• pp.135-135
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• 2003

본 연구는 체세포 핵이식 복제 수정란의 이식에 의한 고능력 한우를 다량 증식하기 위한 방안을 확립하기 위하여 수행되었다. 본 실험에 공여된 체세포는 육질과 육량 등급이 국내에서 100위 이내의 암소 귀세포를 채취하여 동결 및 계대배양하여 사용하였다. 한편, 핵이식 수정란의 준비를 위하여 도축장에서 채취한 난소에서 난자를 회수하여 22시간 성숙배양 후 난구세포를 제거하고 극체가 존재하는 난자만을 선별하여 recipient cytoplasm으로 이용하였다. 난자의 제핵, 체세포 핵이식, 전기융합 및 활성화 처리는 본 실험실의 방법에 준하여 실시하였으며, 핵이식란은 CR1aa 배양액 내에서 5% $CO_2$, 95% Air 및 39$^{\circ}C$의 기상조건하에서 7일간 배양 후 이식에 이용되었다. 한편, 수란축은 2회 이상 정상 발정주기가 확인된 경산우와 미경산우에 25mg의 PG $F_{2}$$\alpha$/를 투여하여 발정을 유기하거나 자연발정우를 선발하여 수란축으로 이용하였다. 그 결과, 배반포기배를 이식한 경우 14두중 5두에서 임신이 확인되었으며 그중 4두에서 유산되었고, 1두는 임신 6개월령으로 정상 발육되고 있는 것이 확인되었지만 상실배기단계에서 이식된 경우는 임신이 되지 않았다. (중략)