Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.126-126
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2003
유전적으로 우수한 미경산우를 선발하여 조기에 우수한 수정란을 생산하여 이식 후 개량을 촉진한다는 것은 소의 육종개량에서 매우 중요한 일이다. 일반적으로 경산우에 비해 미경산우는 수정란의 생산효율이 떨어진다는 보고가 있다. 최근에는 다배란 처리시 FSH와 Estradiol Benzoate(EB)를 사용하여 다배란처리 효율을 개선하였다는 보고(Matoba 등, 2002)가 있어 EB의 첨가가 미경산우에 있어 수정란 생산 효율을 개선하는 지를 조사하기 위해 60일 간격으로 반복하여 다배란 유기실험을 수행하였다. 공란우는 11 -15개월령의 한우 16두를 평균 90일 주기로 반복 다배란 처리우로 사용하였으며 발정 주기중 황체 중기 소에게 CIDR plus를 질내에 삽입하고 다음날 EB를 근육주사하였으며, 120시간 후 부터 FSH 50mg을 1일 2회, 4일간 주사하고 마지막 날 prostaglandin제제를 25mg 근육주사한 다음에 48, 60시간 후 인공수정을 반복 실시하였다. 인공 수정시는 배란을 촉진하기 위해 GnRH제(콘세랄)을 50mg을 근육주사하였다. (중략)
우리나라 재래산양은 동물복제 또는 형질전환 등과 같은 첨단생명공학연구에 매우 적합한 동물이며, 이러한 연구를 위해서는 무엇보다도 oocyte의 확보방안이 시급히 마련되어야 한다. 그러나 산양의 과배란 및 회수 등에 관한 연구가 극히 미진한 실정이다. 본 연구는 재래산양에 있어서 과배란 처리에 의한 oocyte의 회수방법과 회수란의 질적 개선방법을 확립하기 위하여 호르몬 및 공란우의 반복사용에 따른 회수율을 조사하였다. 공시동물은 체중 15∼25 Kg 전ㆍ후의 성숙한 미경산 재래산양으로서 발정동기화를 위하여 CIDR(Eazi Breed, InterAg, New Zealand)를 10일간 질내에 삽입하고 과배란 처리는 FSH를 CIDR 삽입 8, 9, 10일째에 12시간 간격으로 70 ㎎을 감량법으로 투여하였으며, PMSG의 경우는 1,000 IU를 제 8일째에 1회 투여하여 과배란을 유기하였다. (중략)
본 연구는 체세포 복제 가축의 정상 분만율이 낮은 원인을 규명하고, 복제란 이식우의 분만전후 생리적인 특성을 검토하기 위하여 혈중 또는 태반내 TGF-β1 과 progesterone 농도를 분석하여 검토하였다. 축산기술연구소에서 자체 생산된 체세포 복제란을 자연 발정이 유기된 수란우에 이식하였으며, 분만 예정일 하루 전에 제왕절개수술을 실시하여 태반 및 혈액을 채취하여 실험에 공시하였으며, 대조구의 시료는 분만직전에 제왕절개수술을 실시하여 공시하였다. (중략)
우리나라에 이동통신이 처음 소개된 이래로 눈부신 발전을 거듭하여 왔으며, 급기야. 무선통신 서비스를 중심으로 새로운 성장력과 패러다임 전환의 가능성에 대한 전망을 논할 수 있는 수준이 되었다. 이러한 추세에 맞추어 휴대인터넷 시장에 대한 연구가 활발히 진행되고 있으며 국민경제적 효과변화나 시장 경쟁환경의 변화에 가장 영향을 미칠 수 있는 요인들 중, 사업자 수를 어떻게 선정할 것인가에 대해 다양한 접근이 시도되고 있다. 기존의 연구들은 휴대인터넷 시장을 분석하는데 있어 시장규모가 일방향으로 사업자 수에 영향을 미친다는 측면에서 이루어지고 있으며, 대부분 휴대인터넷 시장을 단일시장으로 범위를 한정하고 성장중인 시장을 정적으로 가정하여 시장성장 추이 분석 등에 주안점을 두는 단편적 연구가 수행되어져 왔다. 휴대인터넷 시장의 단편적 분석이 아닌 '모바일인터넷' , '초고속유선인터넷', '무선인터넷', '휴대인터넷' 등 네 가지 영역을 동시에 고려함으로써 영역간 복잡성과 동적인 관계 속에서 시장이 성장해 나아간다는 가정을 바탕으로, 시장에 내재되어 있는 관련요소간 상호영향과 신규정책 및 제도적 변화 수용에 있어 발생하는 시간적 공간적 지연 등을 고려한 동태적 분석을 수행하였다. 연구를 수행하기 위해 다양한 변수간의 인과관계, 피드백 구조와 시간흐름에 따른 시스템의 변화를 파악하는데 매우 유용한 도구인 시스템다이내믹스 기법을 활용하여 휴대 인터넷 시장의 동적인 구조를 알아보고 사업자 선정정책의 시행을 앞두고 있는 현재시점에서 의미있는 시사점을 제공하였다.시하고자 한다.채취하여 임신진단키트(제네디아프로테 트, 녹십자)를 이용하여 임신여부를 1차적으로 확인하였다. 과배란을 유기한 13두의 공란우중 9두(69.2%)가 과배란 반응을 나타내었으며, 회수된 수정란 51개중 이식가능수정란은 38개(74.5%) 였다. 발정동기화를 유도한 수란우 40두중에서 35두(87.5%)가 발정이 동기화되었으며, 그 중 황체검사를 통하여 30두의 수란우에 수정란을 이식하였다. 수정란이식후 13일(발정주기 21일)에 혈액을 이용한 임신진단에서 농가별 수태율은 각각 37.5%, 70.0%, 60.0% 및 71.4% 로서 평균 60.0%를 나타내었다.서 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 배양기에 48시간 배양하면서 생존여부를 판단하였다. 실험 2에서 확장배반포배 수정란이 25.3%의 생존율을 나타내었으며, 실험 1과 실험 3에서는 수정란의 형태와 관계없이 생존성을 확인할 수 없었다. 이상의 결과로 보아 glycerol 완만동결에서는 확장배반포기 수정란 이상이 보존가능한 것으로 추정되나 더 추가적인 연구가 요구된다.c kinase 활성의 변동은 정소 내 간충조직, 세정관 상피의 증식 및 기능적 분화 과정을 매개하는 생리적 활성분자 수용체 하위의 신호전달 과정에 Src-Csk loop에 의한 조절가능성을 확인할 수 있었다.rugrene의 향기성분이 주요 성분군으로 확인되었다. 2. 생강나무에서 생강의 향기를 발산하는 성분으로는 $\beta$-myrcene, o-terpinolene, phellandrone, ι-limonene, $\b
This study was carried out to assess the effect of superovulation response and quality of embryos recovered from donor cows after a single subcutaneous injection of FSH dissolved in polyethylene glycol (PEG). Cows were allocated into control and 3 experimental treatment groups. In control, cows were injected intramuscularly 50 mg FSH twice daily for 4 days. Group 1 were injected subcutaneously with a single dose of 400 mg FSH dissolved in 30% PEG solution. Group 2 were injected subcutaneously with a single dose of 200 mg FSH dissolved in 30% PEG solution. Finally in group 3, cows were injected twice 200 mg FSH dissolved in 30% PEG solution by subcutaneous. Superovulation was initiated by injection of FSH between Day 8 and 14 of the estrus cycle (Day 0, the day of estrus), and followed by injection of 25 mg PGF$_2$$\alpha$ at 48 h after first FSH injection. Cows were then artificially inseminated (AI) with semen twice at 48 and 60 h after PGF$_2$$\alpha$ injection. At 7 days after the second AI, embryos collected non-surgically by flushing the uterine horns and were counted and compared morphologically as being transferable and degenerated among different superovulation treatments. Furthermore, progesterone and estradiol -17 $\beta$ in plasma were measured by radioimmunoassay following different treatments at given days All cows of treated groups were observed heat. but control group was showed 77.8%. Superovulation response was observed as 77.8, 87.5, 88.9, and 100% in control, Groups 1, 2 and 3 The mean number of corpus lutea (CL) detected in Group 1 were 19.6, which was, respectively significantly (P<0.05) higher than those of other groups (11.1, 13.4 and 7.6, respectively). However, there did not differ on the mean number of total embryos recovered and of transferable embryos between control and treated groups.
본 연구의 목적은 한우 난포발달에 있어서 난포액 및 anti-inhibin serum의 생리적 역할을 검토하기 위해 수행하였다. Anti-inhibin serum(AI)은 항원으로서 porcine inhibin-$\alpha$-subunit 19~32의 peptide를 사용하여 adjuvant 용액을 1:3의 비율로 혼합하여 앙고라종 토끼 5두(체중 2.5kg)에게 주 2회 간격으로 접종 후 얻어진 항혈청을 사용하였다. 난포액(bFF; bovine follicular fluid)은 도축장에서 도축되는 한우 난소로부터 직경 1.0cm 이하의 난포로부터 회수하여 스테로이드를 제거하기 위해 10% chacoal so lution(50 mg/$m\ell$, Norrit-A, Fisher Sci., USA)을 처리하여 45분간 배양후 원심분리후 상층액을 회수하여 실험에 공시하였다. 공시동물은 1산후 정상적으로 발정주기가 반복되는 한우암소 9두를 난소감정후 황체를 확인하여 PGF2$\alpha$제제(lutylase. USA)를 주사하여 발정을 유기한 다음, 난소의 first wave가 시작되는 시기인 배란직후 12시간째부터 4일간 일일 2회 5 $m\ell$씩 총 8회 40 $m\ell$의 AI와 bFF를 각각 경정맥으로 주사하였으며 대조구로서 생리식염수를 주사하였으며 채혈 및 정맥주사를 용이하게 하기 위해 경정맥에 카테타를 설치하여 6시간간격으로 총 200시간까지 채혈하였으며 초음파진단기를 이용하여 난포의 발달을 검토하였다. 채혈후 혈중Inhibin, progesterone 및 Estrad iol-17$\beta$농도의 분석은 RIA 및 ELISA법으로 분석하여 얻어진 결과는 다음과 같다. 혈중 Progesterone농도는 대조구와 AI처리구에서는 배란후 68시간째부터 유의적으로 증가하기 시작하였으나, bFF처리구에서는 배란후 68시간부터 170시간까지 대조구에 비해 유의적으로 낮은 농도를 나타내었다. 이에 반해 혈중 Estradiol-17$\beta$농도는 대조구의 경우 bFF처리구와 비슷한 수준으로 배란후부터 낮은 농도를 유지하였으나, AI 처리구는 배란후 36시간이후부터 108시간까지 유의적으로 높은 수준을 유지하였다가 그 이후 감소되었다. 한편, 혈중 Inhibin농도는 전 구간에서 배란후 84시간까지 불규칙한 농도를 보이다가 bFF처리구에서는 배란후 84시간부터 유의적으로 증가하였다. 배란후 72시간째에 초음파진단기를 이용하여 난소의 난포발달을 조사한 결과 , 대조구와 bFF처리구에 비해 AI처리구에서 발달난포가 유의적으로 많은 것을 확인하였다. 이상과 같은 결과로, Anti-inhibin serum은 한우 자체에서 분비하는 Inhibin을 특이하게 억제하여 Inhibin에 의해 억제되는 FSH분비가 촉진됨으로써 난포발달과 estrogen의 농도가 촉진되는 것으로 사료되어 anti-inhibin serum이 한우의 과배란유기 효과가 있는 것으로 사료된다.
This study was carried out to investigate the reproductive status and the effect of progesterone treatment on the recovery of reproductive disorders in Hanwoo. Hanwoo farms were surveyed the general management status, such as the type of barn, the feed intake, the incidence of reproductive disorders. The reproductive disorder cattle were treated 7 days insertion of control internal drug releasing for cattle (CIDR) and injection of PGF$_2$$\alpha$ at 1 day before removal. The recovery of reproductive disorders was assessed by determining the pregnancy following artificial insemination. The total number of surveyed Hanwoo farms was 127, and the total incidence rate of reproductive disorders was 19.7% (209/1,061). Compared to the herd size, the incidence rates of reproductive disorders in less than 10 heads (37.5%) was significantly (P<0.05) higher than in 10 to 20 heads (14.7%) and more than 20 heads (13.6%) of herd size per farm. The incidence rate of reproductive disorders in tie stall barn was significantly (P<0.05) higher than in free stall barn (30.4% vs. 14.7%), and even in free stall barn, that tended to decrease as the floor area was larger. The incidence rate of reproductive disorder by the parity was highest in heifer (50.7%), and that tended to decrease as the parity was increased. The distribution rate of the case of reproductive disorder in anestrus, recovery rate of reproductive disorders fellowing CIDR treatment was 75.1% (157/209). In the recovery rate of reproductive disorders by body condition score (BCS), BCS 1, 2 and 3 was significantly (P<0.05) higher pregnancy rate (85.7, 84.9 and 86.8%), and gross recovery rate in emaciated cattle was better than in obese cattle (BCS 4, 5). In conclusion, the incidence rate of reproductive disorders in Hanwoo raised in Youngju province area was 19.7%, and that tended to decrease as the herd size was increase because of increased farmer's attentions, and the floor area was larger. The majority of the case of reproductive disorders was anestrus. The recovery rate of reproductive disorders following CIDR treatment was 75.1%, and to optimize the recovery rate of reproductive disorders, cows and heifers were maintained BCS 1, 2 and 3 by moderate management.
Kim, Y.H.;Koo, J.C.;Oh, C.W.;Kang, S.Y.;Yang, B.S.;Oh, S.J.;Kim, C.N.;Song, J.Y.;Kim, I.H.
Journal of Embryo Transfer
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v.21
no.3
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pp.191-198
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2006
The objectives of this study was to produce valuable offsprings of Hanwoo and Jeju black cattle using in vivo embryo production and embryo transfer techniques during 5 years ($2001{\sim}2005$) in Jeju. Two hundred and eighty six Hanwoo and sixty nine Jeju black cattles, at random stages of the estrous cycle, received a CIDR. Seven days later, the animals were superovulated with a total of 400 mg pFSH ($Folltropin^{(R)}-V$) administered twice daily in constant doses (each 50 mg) over 4 days. On the 6th administration of FSH, CIDR was withdrawn and 25 mg $PGF_{2{\alpha}}$ was administered. Cows were artificially inseminated thrice after estrous detection at 12 hr intervals. The cows received $250{\mu}g$ GnRH at the time of 2nd insemination. Embryos were recovered 7 or 8 days after the 1st insemination. Recipients were synchronized with donors by insertion of a CIDR for 7 days and administration of 25 mg $PGF_{2{\alpha}}$ at the time of CIDR removal. The collected embryos were transferred to 1,219 recipients by 6 transfer persons. The mean numbers of total ova and transferable embryos from Hanwoo and Jeju black cattle donors were 7.4 and 4.7, respectively The number of transferable embryos differed between Hanwoo (5.0) and Jeju black cattle (3.5, p<0.05), while that of total ova did not differ. Repeated superovulation treatments decreased (p<0.05) the ratio of numbers of the flushed animals vs. superovulated animals in Jeju black cattle, and the numbers of total ova and transferable embryos in Hanwoo. More transferable embryos were collected at summer (5.6) than winter (2.9, p<0.01). The mean pregnancy rate was 40%. The pregnancy.ate was affected by transfer year (2001<2004, p<0.05) and transfer person ($33.0{\sim}41.9%$, p<0.01), while not by donor (embryo) breed. These results showed that in vivo embryo preduction and embryo transfer techniques using CIDR for Hanwoo and Jeju black cattle donors as well as recipient, regardless of their estrous cycle, may enable a stable embryo production and recipient preparation.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.132-132
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2003
멸종위험성이 높은 재래돼지를 유전자원으로서 안전하게 보존하고 유전적 다양성을 유지하기 위해 체내수정란의 동결보존 방법을 수행하였다. 재래돼지의 과배란유기는 altrenogest를 1일 20mg씩 18일 경구투여하고 PMSG 500~l,000IU 근육주사후 80시간에 hCG 500~750IU를 근육주사하였다. 발정이 관찰된 개체는 발정개시후 12시간과 24시간에 자연교배 또는 액상정액을 이용하여 2회씩 수정시켰다. 최종 수정후 5일째에 외과적으로 개복수술하여 FBS가 5% 첨가된 D-PBS 관류액으로 자궁으로부터 수정란을 회수하여 상실기, 배반포기, 확장배반포기의 수정란으로 구분하였다. 회수된 수정란은 FBS가 20% 첨가된 D-PBS의 0.4, 0.8, 1.4M glycerol 항동해제에 각 단계별로 10분씩 평형시킨후 수정란동결기(CL863, Australia)를 이용하여 18$^{\circ}C$부터 -7$^{\circ}C$까지 2$^{\circ}C$/min의 냉각속도와 -7$^{\circ}C$부터 -35$^{\circ}C$까지 0.5$^{\circ}C$/min의 동결속도(실험1), 1$^{\circ}C$/min의 냉각속도와 0.3$^{\circ}C$/min의 동결속도(실험 2)로 동결시켰다. 또한 FBS가 20% 첨가된 D-PBS의 ethylene glyco1(EG) 1.8M의 항동제에 15분간 평형시킨후 실험 1과 동일한 방법으로 동결시켰다(실험 3). 동결수정란의 융해는 37$^{\circ}C$의 항온수조에서 30초간 실시하였다. 항동해제로 glycerol을 이용한 수정란은 융해후 3가지 농도로 0.3M sucrose, 0.8M glycerol, 0.4M glycerol을 첨가한 D-PBS에 각각 10분씩 단계적으로 정치시킨 다음, 10% FBS 첨가 mNCSU-23으로 3회 세척했다. 항동해제로 EG를 이용한 수정란은 융해후 즉시 D-PBS에 각각 10분간 정치시킨 다음, 10% FBS 첨가 mNCSU-23으로 3회 세척했다. 항동해제가 제거된 수정란은 FBS가 10% 첨가된 mNCSU-23 배양액에서 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ 배양기에 48시간 배양하면서 생존여부를 판단하였다. 실험 2에서 확장배반포배 수정란이 25.3%의 생존율을 나타내었으며, 실험 1과 실험 3에서는 수정란의 형태와 관계없이 생존성을 확인할 수 없었다. 이상의 결과로 보아 glycerol 완만동결에서는 확장배반포기 수정란 이상이 보존가능한 것으로 추정되나 더 추가적인 연구가 요구된다.
The totipotential spermatogonial stem cells of adult testis which give rise to mature sperm cells is well-known to incorporate foreign DNA as well as those of somatic cells. Also, the integration rates of foreign DNA after haploid stages are generally known to decrease and /or is simply bound foreign DNA into the sperm plasma membrane. To overcome these problems, liposome and DNA complexes were used to determine how direct injection of these complexes into testis were integrated into sperm genome and resulted in transgenic offspring. To study this purpose, cation liposome was gently mixed with WAF/hGH DNA (1 : 2) and the complexes were injected into testis. At 10, 20, 40, 60, and 80 days after direct injection into testis, mature sperm cells were recovered by using artificial virgin method from two goats and each semen except a part of semen used for DNA analysis such as PCR or Southern blotting was cryopreserved for the artificial insemination. The results obtained in this study are summarized as follows. 1. By PCR, the presence of exogenous DNA was confirmed up to 80 days after injection with liposome/DNA complexes. The highest integration rates were obtained at day 40 after direct injection. This results suggested that spermatogonial stem cells were integrated exogenous DNA into their genome. 2. Among 23 Korean Native Goats which were artificially inseminated, 4 goats resulted in pregnancy and produced 7 young goats. 3. Two young goats were confirmed as a transgenic by PCR and Southern blot analysis. Therefore, our results suggested that testis-mediated gene transfer can be used as a feasible tools for the production of transgenic livestock.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.