의약품을 중심으로 한 광학활성 생리활성물질의 제조 즉, 정밀유기합성은 정밀화학의 꽃이라 할 수 있다. 이러한 광학활성물질은 통상의 유기화학적 수법으로 합성하면 라세미체로 얻어지고 광학활성체로 얻을 수 없다. 그래서 최근 chiral 중심을 가지는 간단한 화합물(광학활성합성원료-chiral building block, chiral synthon)을 원료로 해서 입체 선택적으로 반응을 조절함으로써 다양한 광학활성표적 화합물을 합성하는 방법이 활발히 진행되고 있다. chiral building block의 제조 방법을 살펴보기로하자.
지구상에서 생합성된 천연물은 완급의 차이는 있겠으나 궁극적으로는 CO$_{2}$ H$_{2}$O, NH$_{3}$ 등으로 다시 산화분해된다. 이 분해과정은 미생물의 효소반응으로 이루어지며 생물권의 항상성도 일차적으로는 미생물의 이 산화분해작용으로 유지된다고 볼 수 있다. 미생물이 영위하는 이러한 효소반응을 생리활성물질의 공업적합성에 이용한 초기의 예로는 부현피질호르몬의 합성과정에서 Rhizopus nigricans를 사용한 수산화반응과 ascorbic acid 합성과정에서 Acetobacter xylinum을 사용한 탈수반응이 유명하며 이러한 반응은 아직도 이용되고있다. 특히 지난 십수년간의 응용미생물학의 발전은 대단한 것이며 여러가지 항생물질, 당질, amino산, 핵산관련물질들이 생리활성물질과 함께 발효법으로 생산되고 있다. 그러나 이글에서 다루는 미생반응은 발효과정에서 생산되는 미생물자체의 일차적 대사산물 (primary metabolite)이나 이차적대사산물 (secondary metabolite)를 대상으로 한것이 아니며 어디까지나 외부에서 공급되는 화학물질에 대한 균체의 효소반응산물을 목적물로 하고있다. 또한 근래 활발히 이용되는 균체고정및 효소고정법을 이용한 효소공학적수법도 제외하고 배양과정의 균체 또는 배양후의 군체를 이용한 미생물반응에 한정코저 한다.
정수용 입상활성탄 (granular activated carbon, GAC)으로 사용되는 식물계와 석탄계 활성탄의 미생물 재생장 현상을 파악하고 비교하기 위해 활성탄 칼럼을 대상으로, 유입수와 유출수 비교와 함께 활성탄 상의 종속영양세균의 분포와 활성을 분석하였다. 활성탄 칼럼은 총유기탄소와 잔류염소를 잘 제거하였으며 이온은 잘 제거하지 못하는 것을 알 수 있었으며, 칼럼 유출수의 세균수는 10일째 파과 (breakthrough)가 발생한 후 증가하여 최종적으로 석탄계와 식물계 활성탄에서 각각 1.1 ${\times}$$10^3$, 6.2 ${\times}$$10^2$ CFU/mL로 나타났다. 칼럼 내부 활성탄 상의 미생물 활성은 GAC-C가 15.35~29.06$\mu\textrm{g}$ INT-formazan/g-GAC/h이었고, 세균수와 세균활성 모두 석탄계가 조금 높았다. 입상활성탄 상의 미생물 재생장 현상이 확인되었고, 석탄계 활성탄이 야자계 활성탄보다 미생물 재생장 유발 효과가 큰 것으로 판명되었으며, 활성탄 상의 세균에 의한 유기물 제거능력이 확인되었다.
Alum은 단분자성 알루미늄이 주종이었고, PAC는 고분자성 알루미늄을 함유하고 있었다. Alum과 PAC 모두 응집제 주입에 따른 총인 제거는 향상되었다. 응집제 사용은 미생물 활성도에 영향을 미치는 것으로 나타났다. Alum에 비해 PAC가 미생물 활성도에 대한 영향을 적게 미치는 것으로 나타났다. 그리고 슬러지 반송에 따른 미생물 활성도와 개체수에 대한 영향은 미미한 것으로 나타났다.
미생물에 의해서 생성되는 계면 활성제는 매우 다양하며, 그 특성은 사용되는 기질과 배양조건 등에 따라 다르게 된다. 일반적으로 소수성 부분은 대부분 지방산으로 이루어진 탄화수소 사슬이지만, 친수성 부분은 alcohol, ester등을 비롯하여 인산 또는 황산기와 같이 이온 그룹으로 구성되는 등 다양하다. 대부분의 biosurfactant는 생분해가 가능하며 독성이 없다. 따라서 오염문제를 야기하지 않으며 생물체에 적용가능한 장점을 갖고 있다. 따라서 앞으로 미생물을 이용한 biosurfactant의 개발및 응용가능성은 매우 높다고 볼 수 있다.
오염토양 복원의 신기술로서 미생물계면활성제를 이용한 생물학적 정화법(Bioremediation)의 표준화된 절차와 현장적용 결과를 제시하였다. 적절한 양분과 수분 그리고 산소를 공급하여 유류 오염물질의 생물학적 제거효율을 극대화시킬 수 있었으며 특히 유류오염물질을 효과적으로 분산시키기 위해 미생물계면활성제를 사용함으로써 오염된 토양을 단기간 내에 복원하는데 상당히 효과적인 기술임을 확인 할 수 있었으며 지속적인 현장적용 기술의 개발을 통하여 국내외적으로 당면하고 있는 토양오염문제를 해결하는데 크게 이바지 할 수 있을 것으로 사료된다.
계면활성제를 이용한 유류 오염토양 복원기술 적용시 발생되는 세척 유출수를 유류분해 미생물로 알려진 Pseudomonas putida Fl, Pseudomonas oleovorans, Acinetobacter calcoaceticus를 이용하여 생물학적으로 처리하는데 필요한 기초 연구를 실시하였다 세종류의 미생물은 본 연구에 사용된 계면활성제(POE$_{5}$, POE$_{14}$)에 대하여 독성이 없는 것으로 판명되었으며, 배양 종료 후 계면활성제 농도에 따른 TPH 분해율은 0.1%, 0.5%, 1%의 계면활성제 농도에서 유사한 분해율을 나타냈으나, 배양 초기에는 0.1%가 0.5%나 1% 농도에 비하여 높은 분해율을 보였다 pH의 변화에 따른 TPH 분해율은 적용 pH 범위(4, 6.5, 9)내에서 모두 생육이 가능하였으며, 세 종류의 미생물은 pH 6.5에서 가장 높은 TPH 분해 율을 나타내었다.
난산균의 효율적인 보존문제로서 Lactobacillus bulgaricus NLS-4를 사용하여 동결 및 동결건조법이 이 균주의 생존도 및 활성도에 미치는 영향을 조사하였다. 동결 및 동결건조처리 후 전반적인 생존도 및 활성도는 저하되나 초발미생물농도를 높여준 경우 모두 증대되어 동결시에는 최고 생존도 및 활성도가 각각 46% 및 0.25% lactic acid였고 동결건조 시에는 22% 및 0.29% lactic acid였다. 동결 및 동결건조 처리전 보호물질로서 각각 10% glycerol과 G. C. G. S. 현탁용액을 첨가한 경우 대조군인 10% skim milk를 첨가한 경우보다 생존도 및 활성도가 증가하여 동결시에는 최고 생존도 62%, 최고 비교활성도 95%를 나타냈고 동결건조시에는 각각 79%, 126%를 나타냈다. 결론적으로는 미생물농도가 생존도 및 활성도를 높이기 위한 가장 중한 인자임을 알 수 있었고 보호물질의 첨가도 효과적임을 알 수 있었다.
페놀성 산업폐수중 2,4-dichlorophenol과 2,4-dinitrophenol를 함유한 폐수에 대해서 phenol이 활성슬러지공법에서 이 두 물질의 미생물 분해와 활성슬러지공정에 대한 Eckenfelder 수정모델의 미생물분해계수 (biodegradation kinetic coefficient)에 미치는 영향을 연구실험하였다. 미생물 성장에 필요한 에너지원과 필수영양물질 (base mix. BM)을 함유한 폐수를 분해하고 있는 활성슬러지 시스템에 2,4-dichlorophenol과 2,4-dinitrophenol를 함유한 폐수를 유입시켰을 때 이 활성슬러지 시스템은 서서히 죽어갔고 미생물들이 다 씻겨 나갔다. 반면에 페놀에 먼저 순화되어 있는 활성슬러지 시스템에 2,4-dichlorophenol과 2,4-dichlrophenol을 함유한 폐수를 phenol과 함께 유입하였을 때는 분해가 잘 되었고, 분해효율은 $BOD_5$ 기준으로 91.9%에 달했다. 그리고 phenol, 2,4-dichlorophenol 및 2,4-dinitrophenol의 처리효율은 각각 99.8%, 43.3% 및 62.5%였다. 같은 반응조에 연이어서 유입한 에너지원과 필수 영양물질의 추가공급은 처리효율을 상당히 증가시켜 처리수 중의 phenol, 2,4-dichlorophenol 및 2,4-dinitrophenol 농도를 현저히 감소시켰다. 이러한 효과는 페놀에 의해 순화되어 있는 미생물이 BM의 추가공급으로 활성도가 증가되어 분해효율이 증가되었다고 본다. 페놀에 대한 미생물의 순화과정 없이 실험하였을 때는 정상상태를 유지할 수 없었기 때문에 그 결과로부터는 Eckenfelder 수정모델의 미생물분해계수의 값을 구할 수가 없없다. 순화과정을 거친 경우의 미생물분해계수는 12.44/day이었고, 추가적인 $BM\;47mg/l(BOD_5)$의 첨가에 의해서는 46.91/day로 증가되었다. 이러한 값들은 공정설계시에 설계값으로 사용될 수 있고 다른 벤젠유도체의 미생물분해연구에 기초자료로도 활용 될 수 있을 것이다.
지렁이, vermicomposted com manure(처리구)와 composted cow manure(무처리구)에서 각각 순수 분리한 미생물의 exo- 및 endo-cellular phytase의 활성을 측정하고 처리구와 무처리구 간의 인의 함량을 비교함으로써 지렁이가 우분 내 인산가수분해효소의 활성과인의 함량에 미치는 영향을 검토하였다. 1. 미생물의 exo-cellular phytase의 활성은 EW-3,9, CT-2,4,5, SO-2,3,5 등에서만 확인되었으며 지렁이, 처리구와 무처리구 간에는 비슷한 활성을 보였으나 가장 높은 활성을 나타난 균주는 지렁이 분리한 EW-3이었다. 2. 미생물의 endo-cellular phytase의 활성은 모든 균주에서 확인되었고 지렁이와 처리구에서 분리한 균주의 효소활성이 무처리구에 비해 비교적 높은 경향을 보였으며 가장 높은 활성을 나타낸 균주는 처리구에서 분리한 CT-3이었다. 3. 가장 높은 phytase 활성을 나타낸 EW-3과 CT-3균주는 각각 Microbacterium sp.와 Corynebacterium sp.인 것으로 확인되었다. Vermicomposted cow manure의 총 인과유효인의 함량은 composted cow manure에서 보다 약 41.0%, 36.4% 정도 각각 감소하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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