Sweet potato is a crop vegetatively propagated by vine cuttings, an ineffective method for maintaining pathogene-free stock plants. As an alternative method, single-node cultures of virus-free plantlets derived from apical meristem in sweet potato (cv. Yulmi) was examined. Effective pH range, sugar concentration and nodal order were investigated to establish an in vitro mass propagation system with high quality virus-free stock plantlets to farmhouse. Although the plantlets grew at wide range of pH, the most effective pH of the medium was 4.8 in single-node cultures. High sugar concentration of 60∼80 g/L resulted in increased growth response in shoot length, root length, number of node, leaf area and fresh and dry weight of shoot and root, whereas reducing sugar contents below 6% was showed reduced growth response. The first node including meristem tip was the best for the rapid growth of plantlets and the other nodes also showed a very similar growth response. Uniform plantlet can be obtained massively at the same time by culture of single node except for the first node including meristem tip. In conclusion, the most effective pH range and sugar concentration of medium for the growth of plantlets via single-node cultures was 4.8, 60∼80 g/L respectively. The first node was the best for the rapid propagation of plantlets in nodal order.
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.5
no.1
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pp.413-416
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2019
Alstroemeria (Alstroemeriaceae) is one of the most important cut flowers in international market. Especially, characteristics like long vase-life, various colors, tolerance to low temperature and a low energy requirement during cultivation have stimulated this success. Because of its characteristics such as low multiplication rates, time-consuming process and high risk of carrying viral disease, in vitro propagation techniques based on rhizome meristems culture have been developing nowadays. The callus induction has various cultivation sites compared with the direct plant generation method, and if the callus is maintained well, the plant differentiation can be performed simultaneously while maintaining the callus, so that it can be used for mass proliferation. In this study, we tested various hormones and cultivars for efficient callus induction. As a result of culturing between the nodes and the internodes, the callus began to be formed after 8 weeks, and the calli incidence in the nodes was higher than that between the internodes. Also, in the comparison of 2,4-D and picloram, the callus incidence rate was up to 2 times higher in the medium treated with 2,4-D. Using these results, it is thought that it will help establish the system of mass propagation system of Alstroemeria and cultivate new varieties.
A callus-mediated regeneration protocol for sea-milkwort, an endangered coastal plant species in South Korea, is reported here. The explants of in vitro-plantlets generated from a node culture revealed distinguishable responses in callus induction depending on genotype, explant source, light condition, and 2,4-D concentration. Especially, continuous darkness exclusively facilitated callus induction from explants prior to other treatments. The calli initiated on the media with 2,4-D ranging from 0.1 mg/L to 3.0 mg/L in the dark vigorously proliferated when subcultured on the same media in continuous darkness. Given 1.0 mg/L zeatin in addition to darkness to the calli of the 'Pistachio' genotype, normal adventitious shoots were only regenerated from nodular structures that formed earlier from the calli at the frequency of 24.4 percent. Regenerated shoots easily grew into plantlets with roots and green color on a phytohormone-free MS medium under lighted condition, that were used for node culture as plant materials. Node culture effectively multiplied plantlets in accordance with protocol by Bae et al. (2016). Acclimatized plantlet clusters developed mature plant clusters under inland environment, followed by flowering the following April. Results were merged with node culture protocol suggested by Bae et al. (2016), which, as an in vitro propagation system for sea-milkwort, may contribute to natural habitat restoration.
The in vitro growth of virus-free sweet potato [Ipomoea batatas (L.) Lam.] plantlets was investigated under different light sources: fluorescent lamp (control); red (660 nm), blue (460 nm), white light-emitting diodes (LED), and two mixtures of blue and red LED (R:B = 8:2, and 7:3). Single node explants (10 mm) of three cultivars ('Matnami', 'Shincheonmi', and 'Yeonhwangmi') were cultured on Murashige and Skoog medium supplemented with $0.2mg{\cdot}L^{-1}$ 6-benzyladenine for 4 weeks. Explants were exposed to $150{\pm}5{\mu}mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$ photosynthetic photon flux at a distance of 20 cm, constant temperature of $25^{\circ}C$, and under 16/8-h (day/night) photoperiod. Using the same method, the in vitro growth of 10 cultivars under red LED was also compared. After 3 weeks, vine length was highest in plantlets cultured under red LED, and lowest in plantlets cultured under blue LED. Fresh and dry weights were also greatest in plantlets cultured under red LED. Compared to the control, vine thickness was significantly higher in plantlets grown under white LED and the 7:3 R:B LED mixture. Significant differences were observed among the 10 cultivars grown under red LED. 'Matnami', 'Shincheonmi', and 'Shinhwangmi' all had excellent vine lengths, and fresh and dry weights. Compared to the control, vine elongation of sweet potato plantlets was most effective under red LED, and culture duration was about 1 week shorter.
This experiment was carried out to establish micropropagation system in Fritillaria thunbergii Miq. Through the culture of bulblet scales, stems, node-buds and shoot tips with special reference to the effect of physiological age of explant and plant growth regulators on bulblet formation. Number of formed bulblets was significantly increased in node-bud or stem tissue compared to scals segments and on the medium supplemented with kinetin than BA containing medium. Optimum levels of kinetin for bulblet formation from node-bud taken from above 3 cm shoot length and stem segments excised from below 3 cm shoot length were 5.0 mg /L and $1.0{\sim}3.0\;mg$ /L kinetin, respectively. Interesting phenomenon was observed, the direct formation of bulblets from the axilliary bud of cultured explants. Bulblet forming capacity in stem tissue was depended on stem age, young stem had high regeneration ability compared to old stem taken from above 10 cm shoot length. 1.0 mg /L kinetin was optimum concentration for the formation of bulblets from old stem segments. Stem tissue taken from underground growing plant was promoted coampare to shoot tips or bulb scale segments. Optimum concentration of sucrose was $5{\sim}7%$. Summariged above results revealed that effective explant for micropropagation was stem and /or node-bud tissue excised from less than 3 cm plant height compared to those of bulb scale segments which showed high contamination after culture. Maximum multiplication rate of young stem and /or node-bud segment was about 20 times. Kinetin requirement for stimulation of bulblet formation from cultured explant depended on source of explants but favorable levels of kinetin for organogenesis ranged from 1.0 mg /L to 5.0 mg /L.
Single-node stem pieces ca. 1 cm in length containing a axillary bud were obtained from in vitro plants of potato (Solanum tuberosum L.). The influences by a position of the node and the existence of a leaf at the node were observed in the single-node culture on the 8% sucrose MS medium. The effect of CCC was also investigated for the microtuberization. The apical part node was excellent in the tuberization not to mention shoot length, fresh weight, diameter, the number of node on the in vitro culture of a single-node than the lower part. The differences in the diameter of a tuber formed in the part of the axillary bud on all treatments including the cultivation of the apical part node were not recognized. However, the fresh weight of the tuber showed high value in the tuber formed at the axillary bud of shoot apex part. At 20 days after cultivation, tuberization was promoted in the new stolen that developed from the bud of node with a leaf under SD condition of 8 hours at $20^{\circ}C$. The tuberization from axillary bud of the single-node without leaf was inhibited at high temperature of $28^{\circ}C$ regardless of daylength. Whereas, tuberization at $20^{\circ}C$ and $28^{\circ}C$ was similar without the difference under SD condition but the tuber formation ratio were low. CCC 500 mg/L promoted tuberization and the effect was also showed even under LD condition at $28^{\circ}C$. The inhibiton of tuberization under LD and high temperature condition could be solved by treatment with CCC.
The single node cuttings of sweet potato (cv. Mokpo #29) plantlets maintained in vitro were cultured with (MF+) or without membrane filter (MF-) under photomixotrophic (PM), hetrotrophic (HT) and autotrophic (AT) conditions. Shoot length was the greatest (11.9cm) in 3$0^{\circ}C$ (HT) treatment and it was the shortest (3.4 cm) in $25^{\circ}C$ (PM) treatment. Nodal explants cultured in 3$0^{\circ}C$ treatment looked more vigorous than those of $25^{\circ}C$ in appearance, and node number was the greatest (10.5 per plantlet) among the treatments. But plantlets grew in 3$0^{\circ}C$ (HT) treatment were observed all overgrown. The size in leaf area was about 2 times greater and shoot length was about 2 times shorter in PM than in HT condition. Percent dry matter of shoots was 5.9% (HT) and 7.4% (PM) in $25^{\circ}C$ treatment and 6.1% (HT) and 7.4% (PM) in 3$0^{\circ}C$ treatment. Plantlets cultured in the MF+ treatments were less succulent than those cultured in the MF- treatment. Vitrified plantlets were examinated 14.8% (both $25^{\circ}C$ and 3$0^{\circ}C$) in PM condition and 22.2% ($25^{\circ}C$) and 31.5% (3$0^{\circ}C$) in HT condition. Sucrose was necessary for the survival of in vitro plantlets. In the sucrose-free medium, explants cultured in the MF- had turned yellow and were dead after 30 days of culture. But explants cultured in the MF+ were alive and produced plantlets with shoot and root (AT). On the other hand, the survival of explants on the MS basal medium (sucrose-free and hormone-free) depended entirely upon the MF attachment.
The timing for the determination in root formation from nodal and internodal explants of cassava (Manihot esculenta Crantz, cv. MCol 22) was investigated. Nodal explants about 10 mm with an axillary bud formed adventitious roots directly on MS basal medium for 8 days of cultures. But internodal segments without an axillary bud did not develop the adventitious roots on the same medium, and most internodal segments excised from nodal explants after cultures of 5 days on MS basal medium developed adventitious roots. On the other hand, the internodal segments rooted at 90% after cultures on medium with 0.5 mg/L IBA for 5 days, with 1 mg/L IBA for 2.5 days, and with 2 mg/L IBA for 1.5 days respectively. Thus the period of culture on medium with IBA and its IBA concentration affected the rooting rate. Therefore, it is suggested that the determination for root formation occurred before the differentiation of root primordia on medium with IBA, and root inducing factors in medium were absorbed and accumulated during the period of determination for root primordium differentiation in internodal segment of cassava.
The influence of growth regulators (NAA and BA) and sucrose concentrations (0, 3, 5, 7, 9%) on in vitro rapid-propagation of virus-free sweet potato [Ipomoea batatas (L.) Lam.] was investigated with single-node or shoot-tip culture of two cultivars ('Matnami' and 'Shinhwangmi'). The survival rate and growth of shoot-tip explant was also investigated under the presence or absence of light (blue and red LED = 7:3, 150±5 μmol·m-2·s-1 PPFD) during minimal-growth in vitro conservation at 15℃. Vine length, vine diameter, fresh weight and dry weight were enhanced without callusing of explant in the MS medium supplemented with 0.2-0.5 mg·L-1 BA. The growth of single-node and shoot-tip explants were significantly enhanced with the increase of vine length, number of leaf, number of root, fresh weight, and dry weight in the solid medium containing 5% sucrose and 0.2 mg·L-1 BA. Vine elongation of shoot-tip explants were highest in the liquid medium containing 3% sucrose than the solid medium. The survival rate of minimal-growth in vitro conservation was 100% in 5 months under the presence of light (LED, 150±5 μmol·m-2·s-1 PPFD) at 15℃, but the explants in dark condition died in 3 months. The light was absolutely necessary for the in vitro conservation under minimal-growth conditions of virus-free sweet potato plantlets at 15℃, and the high density of explants (10 plantlets per Petri Dish) was increased the efficiency of mass conservation.
This study was conducted to determine the effects of 3 cytokinins (BA,2iP and kinetin) and their concentrations (0, 0.1, 0.5, 1.0, and 2.0 mg/L) on multiple shoot production of Citrus spp. 'Sambokam' and 'Byungkyool' by nodal culture. Nodal explants were obtained from in vitro germinated seedlings of both cultivars. 'Sambokam' produced more multiple shoots than did 'Byungkyool' by nodal culture. Among the 3 cytokinins tested in this study BA supplemented in semi-solid MS basal medium was the most effective stimulator for multiple shoot production, and an optimal concentration was determined to be 1.0 mg/L. Shoot elongation and root formation were inhibited by increasing cytokinin concentration, regardless of cytokinin types. BA at 1.0 mg/L produced the most multiple shoots and the highest number of leaves in 'Sambokam', whereas any cytokinin and concentration studied in this experiment did not affect any scored variables such as shoot and leaf numbers, etc. in 'Byungkyool'.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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