닭을 실험모델로 Pinus strobus 잎의 메탄올 추출물 투여에 의한 콜레스테롤 저하효과를 검토하였다. 닭에 메탄올 추출물 100mg을 50% 에탄올용액 0.5ml에 녹여 2주간 매일 경구투여하였을 때, 유의한 추출물의 투여효과는 관찰되지 않았다. 두 번째 실험에서는 메탄올 추출물의 투여량을 하루 200, 350 또는 50mg으로 달리하여 2주간 경구투여하였다. 2주 후 하루 200mg을 투여한 군은 다른 군에 비하여 유의하게 낮은 혈청 콜레스테롤 농도를 나타내었으나, 투여량의 증가에 의한 부가적인 저하효과는 관찰되지 않았다. 메탄올 추출물은 여러 가지 추출용매로 재분획되었다. 그 중에서 에틸아세테이트 추출물(100mg/일)은 혈청 콜레스테롤 농도를 20%까지 감소시켰다. 이러한 결과로부터 Pinus strobus 잎의 메탄올 추출물의 투여는 닭에서 혈청 콜레스테롤 농도 저하의 개선효과가 있음이 시사된다.
배의 발생과 분화에 따른 혈청 alpha-fetoprotein (AFP)의 생리적 기능 규명을 위한 기초실험의 일환으로, 모체와는 완전히 독립된 상태에서 발생과 분화가 이루어지는 계배의 혈청을 재료로 하여 CM-Sephadex C-50, hydroxyapatite 및 DEAE-Sepharose A-25등의 크로마토그라피 방법에 의해 닭 혈청 AFP를 분리하였다. 계 AFP는 분자량이 약 60 Kd로 사람 및 다른 포유동물 AFP의 분자량 (64-74 Kd)보다 작았다. 닭 AFP, 계배혈청 및 닭 혈청 등을 토끼에 면역하여 항체를 제조하였고, 이를 이용하여 닭의 배발생 단계에 따른 혈청 AFP 함량의 변화를 전기영동 및 면역학적 방법으로 정성 및 정량 분석을 실시하였다. 혈청 AFP 함량은 발생 7일-배 (AFP 농도 : 0.81 mg/ml)부터 점차 증가하여 13일-배에서 최고치인 2.46 mgfml로 나타났으며 그 이후 급격히 감소되어 부화 직후에는 매우 낮은 농도 (0.22mg/ml)였고 부화 4일에 거의 없어 졌으며, 이와 같은 AFP 함량의 변화는 혈청 알부민 함량의 변화와 거의 반비례 함을 알았다. For the preliminary step to investigate the site of AFP synthesis, the ontogenic characteristics and the physiological function of AFP, alpha-fetoprotein was isolated from chick embryo serum through the procedures of CM-Sephadex C-50, hvdroxvapatite and DEAE-Sephadex A-50 chro-matography. The isolated AFP was proved to be pure and its molecular weight was found to be about 60 Kd. With this purified AFP, rabbit anti-chick hor was produced. The serum AFP level in chick embryo has been investagated by using polyacrylamide gel electrophoresis, immunoelec-trophoresis and single radial immunodiffusion from 7 days of incubation until 4 days after hatch-ing. It was found that the AFP level is increased from 0.81 mg/ml at daw-7 embryo to maximum value of 2.46 mg/ml at day-13 embryo, followed by rapid decreases until hatching.
계군 수준에서 닭 전염성 기관지염(IBV)을 검출하는데 필요한 표본크기를 추정하기 위하여 강원도 충북 및 충남 지역의 총 9,980수의 산란계로부터 회수된 총 48회의 혈청시료를 사용하였다. 의뢰된 모든 혈청에 대해서는 개별 시료와 크기가 10인 합병혈청(pool)으로 구분하여 HI 역가를 측정하였다. 적어도 1개의 감염된 pool을 검출하는 것을 95%신뢰하기 위해서는 총 48회의 의뢰건 중 5개 이하의 pool이 요구되는 비율이 72.9%를 차지하였고 90% 신뢰수준에서는 77.1%로 나타났다. 전체적으로 볼 때 필요한 pool의 개수는 양성 pool의 개수가 증가할수록 감소하였다. 개별시료에서 양성판정을 위한 HI 역가의 기준을 9 이상과 10 이상으로 설정할 때 혈청 유병율은 각각 50.1%와 33.4%로 나타났으며, 합병혈청에 대한 양성 판정기준을 8 이상으로 설정할 경우 59.9%로 분석되었다. 매 의뢰된 시료에서 개별시료와 합병혈청 간의 상관계수는 판정기준 9 이상에서 0.592(p<0.001), 10 이상에서 0.561(p<0.001)로 두 상관계수간 차이가 없었고 공통상관계수는 0.576으로 나타났다. 이러한 결과에 근거할 때 IBV 감염증을 검출하기 위하여 합병혈청을 사용하는 전략은 조사의 목적이 계군의 감염여부에만 관심을 두는 경우 한가지 대안이 될 것으로 사료된다.
국내 동물약품 시장의 선두 주자인 (주)고려비엔피(대표이사 김태환)가 국내 최초로 닭 아데노바이러스 백신 개발을 마치고 곧 시판에 들어갈 예정이다. 닭아데노바이러스는 1981년 국내에 처음으로 발생된 보고이래, 1980년대 후반에는 발생보고가 없었으나 2000년대 후반기에 접어들면서 발생사례가 증가하였으며, 주로 혈청형 4형, 8형, 9형, 11형에 의해 발생하는 것으로 조사되었다. 일반적으로 아데노바이러스는 후대병아리에 수직감염되는 결과를 야기하므로 종계에서부터 수직감염 예방에 최선을 다해야 하며 산란계와 토종닭, 육계에서도 발생할 수 있으므로 그 피해를 사전에 예방해야겠다. 이번호는에는 (주)고려비엔피를 소개코자 한다.
본 실험은 닭의 혈청으로부터 IgG를 순수분리하고 이에 대한 항혈청을 대량 생산하여 IgG의 양적 측정에 필요한 물질의 생산을 자체 정립하고 아울러 육용계의 전사육기간 동안의 혈청중 IgG농도의 변화상을 조사하여 닭의 면역반응에 대한 기초적인 자료를 제공하고자 실시하였다. 1. 닭의 혈청으로부터 순수한 IgG를 분리하였으며 이를 항원으로 면역시켜 IgG에서만 특이적으로 반응하는 항혈청을 생산하였다. 2. 표준항원(IgG)에 대한 항체(anti-IgG)와의 diffusion상태를 측정하여 표준곡선을 작성한 바, diffusion소요시간이 16시간에서 가장 양흐한 회귀직선방정식을 얻었다($R^2$=0.999). 3. 혈청중 IgG의 농도의 변화상은 1일령에서(4.25mg/$m\ell$) 가장 높았으며 그 이후 급격히 감소하여 11일령에 최저수준(0.81mg/$m\ell$ ; 1일령의 19%수준)에 도달하였다. 그 이후에는 서서히 증가하여 7주령시에는 2.48 mg/$m\ell$의 수준을 보였다. 4. 성별에 따른 IgG 농도간에는 유의적인 차이는 없었으며 3주령까지의 IgG의 농도는 수컷에 비하여 암컷이 약간 높은 수준을 보였다. 한편 수컷은 11일령에서 최저 수준에 도달한 반면에 암컷은 14일령에 가장 낮은 수준에 도달하여 수컷의 능동면역 체계가 암컷보다 조기에 발달되는 것으로 추정된다.
매추리 유래 가금 adenovirus인 QBV로 부터 CsCl을 사용한 균질밀도분배원심분리법으로 AAAV의 분리를 시도하였으며, 분리된 바이러스의 순수성을 전자현미경 및 혈청학적인 방법을 통하여 증명하였으며 순수 분리된 AAAV를 항원으로 사용한 혈청반응을 개발하였다. 즉, CsCl의 밀도 1.38 및 $1.42gm/cm^3$의 분획들은 순수한 AAAV이었으며 $1.42gm/cm^3$의 분획은 토끼에서 양성혈청제조용 면역원으로 1.38 및 $1.42gm/cm^3$의 분획은 혈청반응용 표준항원으로 사용하였다. AAAV 표준항원 및 가토 양성혈청계는 MDV, IBDV, ITV 및 "helper"인 가금 adenovirus와의 교차반응이 없었으며 혈청학적인 특이성이 인정되었다. 또한 상기 혈청학적 반응을 이용하여 AAAV의 동정은 물론 AAAV에 대한 닭의 항체검출을 가능하게 하였다.
닭의 혈청으로 구성되는 항혈청과 이에 특이한 항원과의 결합물에는 기니픽의 보체가 결합되지 못해서 직접보체결합반응이 불가능하다. 따라서 이 연구에서는 개량보체결합반응으로 아직 실현되지 못한 계두의 보체결합반응을 가능케 하였다. 이 연구에서 얻은 실험성적은 다음과 같다. (1) 계두의 개량보체결합반응에 관한 방법을 발전시켰다. (2) 계두독에 감염된 계태아의 장뇨막으로 만든 항원의 성상을 밝혔다. (3) 계두 및 구두독의 독주별 특이성과 닭에 있어서의 항체형성과정을 밝혔다.
선천 면역(Maternal immunity)은 모체에서 유래된 lgG class의 항체(모체이행항체)에 의한 면역이다. 이와 같은 면역은 주로 체액성 면역(혈중항체)과 관계 있으며, 국소면역 또는 세포면역은 관여하지 않는다. 일반적으로 1일령 병아리의 항체가는 모계군의 혈청역가 보다 약간 낮게 나타난다. 부화 후 처음 4일간은 난황으로부터 흡수를 함으로써 혈중 항체가가 떨어지지 않고 비슷하게 유지되다가 그 이후 항체가는 차츰 감소하게 된다. 항체가가 감소하는 수준은 닭의 종류에 따라 다른데, 이것은 생리대사와 성장에 좌우되기 때문이다 일반적으로 항체가가 반으로 감소하기까지의 기간(반감기)은 육계의 경우 3일에서 3.5일, 종계의 경우 4.5일, 산란계의 경우 5.5일로 나타난다. 1일령 때의 항체 역가 수준, 닭의 종류, 항체가를 측정하는 혈청검사의 방법 등에 따라 모체이행 감소 수준이 다르긴 하지만 보통 수주 이내에 완전히 소실되게 된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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