• 한국식품저장유통학회:학술대회논문집
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• 한국식품저장유통학회 1994년도 정기총회 및 제4차 학술발표회
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• pp.7-8
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• 1994

한국산 표고버섯 균사체를 액체배양하여 천연항암물질로 알려진 단백다당체를 추출한 후 그 물질의 특성에 대하여 검토하였다. 균사체의 최적 재양조건을 TGY배지로 조사한 바 온도 $25^{\circ}C$, 배양초기 pH4.0, 교반속도 300rpm, 균사배지 접종량을 10.0%로 하고 산소 통기량을 1.0volume of ait/volume of medium/mimute으로 하였을때 가장 양호한 조건이였으며, 대량생산 하기 위한 SCM배지에서 최적의 C/N비는 13.1오써 7일간 배양하였을때 18.8g/L의 균사령을 얻었으며, 이때 생산수율은 0.46으로 나타났다. 발효가 끝난 배양액에서 균사, 여액 그리고 배양액의 전체에서 단백다당체를 분리한 결과 각 분획에서 단백다당체가 각각 0.55%, 0.12%, 0.69%가 회수되어 배양액 전체에서 단백다당체를 추출하는 것이 바람직하며, 추출방법으로 열수추출, glass bead추출 및 cellulasa처리를 하여 단백다당체의 수율을 비교한 결과 0.25-0.5mm glass nead로 30분간 균사체를 분쇄한 다음 열수추출을 1시간을 하였을때 990mg/100ml의 단백다당체를 얻을 수 있었다. 고단백다당체를 1차 단백질 가수분해 효소로 분해하고, EDAE cellulose 및 Sepadex G-100 column chromatography로 정제한 후, TLC/FLD, ultracentrifugation한 결과 순수한 물질임을 알 수 있었다. 단백다당체의 항암효과 조사중 in vitro배양에서 $P_{388}$과 $L_{1210}$에 대한 단백다당체의 활성단위 1 unit는 1mg정도였으며, 인체의 장암세포인 HCT-48, HRT-18, HT-29 밀 간암세포인 Hep G2 대한 생육저해 단위는 각각 4.4, 3.6, 6.6, 2.6mg이었다. HCT-48과 Hep G2 세포의 크기 분포도는 대조군에 비하여 시간이 경과함에 따라, 그리고 단백다당체의 농도가 증가함에 따라 peak가 작은 size 쪽으로 이동하였다. 또, 단백다당체를 첨가 배양한 HCT-48과 Hep G2세포의 현미경 관찰에서 본래의 암세포 형태가 변형되고 크기가 감소하며 세포사이의 경계막이 흐트러지면서 세포수가 감소하고 사멸하였다. In vivo실험에서는 대조군보다 단백다당체를 첨가한 군에서 항체 형성능력이 대조군에 비하여 형질세포가 2배로 증가하였다. 단백다당체의 화학적 성분 분석에서 다당함량은 46.1%이면 구성다당류는 glucose, galactose, mannose, xylose로 구성되었고 단백질의 함량은 7.28%이며, 구성아미노산은 15종의 아미노산으로 되었다. 또 무기물은 Na, K, Zn, Ca등의 순으로 이루어 짐을 알 수 있었다.

• 한국균학회지
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• 제27권2호통권89호
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• pp.170-174
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• 1999

인공 재배된 신령버섯(Agaricus blazei)의 자실체를 열풍 건조한 다음 다당류를 추출, 분리 정제하여 항암면역활성을 측정하고 그들의 물리화학적 특성의 일부를 조사하였다. 면역증강 다당류는 0.9% sodium chloride와 열수를 사용하여 순차적으로 추출하고 에탄을 침전, 투석 및 동결건조로 얻었으며, 이들 다당류는 이온 교환수지와 겔을 사용하여 균질한 다당류로 정제하였다. 정제된 다당류의 임파구의 항체 형성능 촉진 효과를 in vitro에서 조사한 결과, 0.9% sodium chloride 추출 분획에서 AG-2가, 열수 추출 분획에서 AG-6, -7 및 -8에서 비교적 높은 활성을 보였으며, 특히 AG-3이 양성 대조구(LPS)보다 높은 활성을 보였다. 활성이 비교적 높은 다당류의 경우 주로 glucose로 구성되어 있으며 단백질과 결합된 단백-다당체이었다. 정제된 다당류는 AG-4를 제외하고 모두 glucose를 비롯한 $2{\sim}6$종의 단당류를 갖고 있는 heteropolysaccharide이었으며, AG-1의 경우 galactose, mannose 및 fucose가 79.1:8.9:12.0의 몰비로, AG-5의 경우 glucose, mannose 및 xylose가 45.6:17.9:25.2의 몰비로 존재하였으며, 이들 두 분획은 약한 면역증강활성을 보였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권4호
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• pp.402-409
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• 2002

아가리쿠스와 표고버섯 균사체에서 분리한 단백다당류 (A-PBP, L-PBP)의 체중과 혈중 콜레스테롤 조절효과를 흰쥐와 성인여성을 대상으로 조사하였다. 투여방법은 L-PBP(Group I), A-PBP(Group II), chitosan(Group III), 상기 3종 혼합물(Croup IV)및 Group IV에 식이섬유혼합물의 첨가된(Group V) 5가지 실험군으로 구성하여 다이어트 소재를 구성하였다. 흰쥐의 경우는 정상사료 공급하에 액상으로 1일 1회, 성인여성은 정상식사 후 캅셀 화하여 1일 2회 복용시켰다. 마우스 투여 12일 후부터 L-PBP와 A-PBP로만 구성된 Group I, II에서 체중이 유의적으로 감소됨을 관찰 할 수 있었다. 키토산만으로 구성된 Group III은 이들보다. 낮은 효과를 보였으며, Group IV 및 V에서는 더 높은 체중감소를 나타내었다. 여성성인의 경우, A-PBP 와 L-PBP를 복용한 4주 째부터 체중이 유의적으로 감소하였고, 8주 째부터는 혈청 총콜레스테를 함량이 유의적으로 감소하였으며, 특히 LDL-콜레스테롤이 현저하게 감소하였음을 알 수 있었다. 키토산의 경우 버섯 다당류들 보다 다소 낮은 효과를 보였으나, Group I, II와 유사하게 LDL-콜레스테롤의 감소가 현저하였다. 버섯 단백다당류들과 키토산 및 시판 식이섬유 혼합물을 혼합 투석시 (Group IV, V), Group I, II에서보다 체중이 효과적으로 감소되어 실험 8주 째에 각각 11.8%와 12.8%의 체중감소를 나타내었다. 또한, 혈중지방 특히 중성지방과 LDL-콜레스테롤의 감소에 있어서도 현저한 시너지 효과를 보였다. 이상의 결과는 아가리쿠스와 표고버섯 단백다당류가 식이섬유로서 콜레스테롤 흡수저해와 콜레스테롤 생합성을 억제하여 비만과 고지혈증의 예방과 개선에 기여할 수 있음을 시사해 준다.

• 한국균학회지
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• 제11권2호
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• pp.69-77
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• 1983

한국산(韓國産) 담자균류(擔子菌類)의 항암(抗癌) 성분(成分)을 탐색하기 위하여, 팽나무버섯의 자실체(字實體)를 온수(溫水)로 추출한 후, visking tube로 투석 및 냉동건조하여 단백성 다당류를 분리하였다. 이 성분을 ICR마우스에 이식한 sarcoma 180에 대한 종양억제작용을 실험하였던 바, 10mg/kg/day 용량(用量)을 10일간 투여한 군(群)에서 그 종양억제율이 대조군에 비하여 62.3%이었다. 처치군의 10마리중 3마리에서 그 종양이 완전히 퇴행하였다. 이 항암성분을 분석하였던 바, 42.4%의 다당류와 24.5%의 단백질을 함유하고 있었다. 그 다당류를 가수분해하여 분석하여 본 바, glucose, galactose, mannose, xylose 및 fucose의 5종의 단당류를 검출하였다. 그 단백질을 가수분해하여 16종의 아미노산을 확인하였다.

• 한국균학회지
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• 제11권2호
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• pp.91-95
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• 1983

한국산 담자균류의 항종양성 성분을 탐색하기 위하여 턱수염버섯의 균사를 분리하여 인공배지에서 진탕배 양후, 그 배양균사체로부터 수용셩 단백성 다당류를 추출하였다. 이 성분이 ICR마우스에 이식한 육종 180에 대하여 54.3%의 종양억제율을 나타내었다. 이 성분은 다당류 42%와 단백질 28%로 구성되어 있었다. 그 중 다당류는 glucose (57.8%), mannose(19.3%), galactose(10.8%), xylose (6.8%), 및 fucose (5.7%)를 함유하고 있었다.

• KSBB Journal
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• 제10권5호
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• pp.518-524
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• 1995

해양으로부터 polysaccharide를 생산하는 세균을 분리하여 동정한 결과 Zoogloea sp.(KCCM 10036) 로 밝혀졌으며, 이 해양유래 Zoogloea sp.는 셔로 다 른 두종류의 다당류인 수용성다당류(WSP)와 세포 결합다당류(CBP)를 통시에 생산하여 지금까지 보 고된 관련 미생물과는 다른 특이성을 보였다. 이들 중 WSP는 원심분리 시킨 배양액의 상등액으로부터 acetone 침전법에 의해 분리하였고, CBP는 침전물 로부터 acetone 빛 cetylpyridinium chloride 처 리 에 의 해 분리하였다. WSP와 CBP는 모두 단백 질을 함유하였으나, 이 중 CBP가 보다 높은 단백질 함유 율을 나타내었다. WSP를 다량 생산하기 위한 최척 탄소원은 fructose였고, CBP의 경우는 glucose였 다. Polysaccharide 생산촉진인자로 biotin, ampicillin, 그리고 surf actant를 각각 배지에 첨가하였을 경우, 각각의 농도가 $0.2mg/\ell, 0.4mg/\ell,0.6mg/\ell,$에서 생산량이 가장 높은 값을 보였다. 1%의 glucose를 탄소원으로 하여 fermentor 배양하였을 때, $9.1g/\ell$ 의 WSP와 $2.5g/\ell$ 의 CBP가 생산되었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권1호
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• pp.60-66
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• 1998

10종의 식용 버섯 자실체에 대한 항보체 활성 검색에서 가장 높은 활성을 나타낸 양송이버섯 자실체를 대상으로 항보체 활성물질의 추출조건을 조사하였다. 최적조건으로서 5% urea가 함유된 0.1 N NaOH 용액으로 $65^{\circ}C$에서 2시간동안 양송이버섯 자실체를 추출한 후 methanol 가용획분이 제거된 조다당 획분 AB-0를 얻었다. AB-0는 1 mg/ml에서 90% 이상의 높은 항보체활성을 나타내었으며 마우스에 이식된 sarcoma-180에 대하여 74%의 저지효과를 보였다. AB-0를 acetone 농도에 따른 침전 분획을 실시하여 AB-20, AB-40, AB-60, AB-80, AB-A의 5개의 획분을 얻었다. 이중 가장 높은 항보체활성과 수율을 나타낸 AB-20 획분은 탄수화물 39%, 단백질 46%를 함유하였으며, 구성당은 glucose, arabinose, xylose, galactose, mannose가 6.49 : 1.98 : 1.24 : 1.00 : 0.71의 비율로 존재하였고 구성아미노산은 isoleucine(12.60%), glutamic acid+glutamine(12.45%), valine(11.79%), alanine(11.46%), leucine(10.19%)와 aspartic acid, asparagine(10.56%) 등 이었다. Pronase 처리한 AB-20에서는 78.5%의 항보체활성을 나타내고 대조군에 비해 14.5% 감소하였으나, AB-20의 periodate 산화물에서는 활성이 42.6%로 50% 이상 크게 감소하였다. 따라서 양송이 버섯의 알칼리 추출물중 가장 강한 활성을 보인 AB-20의 주요 활성부위는 다당류이며 단백질도 일부 관여하는 것으로 생각되었다.

• 한국식품과학회지
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• 제21권5호
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• pp.595-600
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• 1989

미역, 다시마, 톳 및 모자반 등의 해조류로부터 추출한 단백다당체의 조성과 항암효과를 알아보기 위하여 쥐에 sarcoma-180세포를 주사한 다음 이들 단백다당체의 효과를 조사하였다. 끓는 물로 추출한 해조류의 단백다당체의 다당류는 모자반, 톳, 미역 및 다시마가 각각 61.14, 55,61, 34.06 및 30.28%였고 주요 단당류는 glucose, galactose, mannose, fructose 및 xylose 이었으며 주요 아미노산은 glutamic acid, aspartic acid, cysteine, valine 및 glycine이었다. 항암효과를 나타내는 단백다당체의 종양성장저지율은 해조류 중 미역을 100mg/kg/day로 10일간 투여했을 때 69.76%로 가장 높았고, 수명연장율은 다시마의 경우 100mg/kg/day로 10일간 투여했을 때 25.22%로 가장 높은 효과를 나타내었다.

• 약학회지
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• 제41권1호
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• pp.105-110
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• 1997

Two protein-polysaccharide fractions, GLA and GLB, respectively, were prepared from the pileus of the fully grown carpophores and the tips of the growing carpophores of Ganod erma lucidum. At a dose of 100mg/kg/day ip, GLA and GLB inhibited the growth of sarcoma 180 solid tumor in ICR mice by 56.3% and 81.8%, respectively. In a flow cytometric (FCM) analysis, GLA and GLB enhanced the formation of lymphoblasts of BALB/c, splenic leukocytes at a concentration of 100 ${\mu}$g/ml, by 38.3% and 61, 3%, respectively. When ip injected into ICR mice, GLB exerted anti-leukopenic effect against cyclophospamide (75mg/kg, ip) in that the leukocyte counts of the peripheral blood of the normal and the cyclophosphamide-treated mice. respectively. was (11.1 ${\pm}$ 3.8) ${\times}$ 10$^3$ and (4.0 ${\pm}$ 1.8) ${\times}$ 10$^3$, while the GLB-cyclophosphamide treated mice showed a leukocyte count of (10.8 ${\pm}$ 5.1) ${\times}$ 10$^3$ CELLS/${\mu}$l. These results suggest that GLB is a promising candidate for an effective, cancer immunotherapeutic agent.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1994년도 춘계학술대회 and 제3회 신약개발 연구발표회
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• pp.170-170
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• 1994

항암제 KR 53170 및 관련 화합물의 항암 효과에 관한 연구의 일환으로 Phellinus linteus 균사배양물로부터 분리한 항암성 단백다당체 (분자량 8000 이상의 고분자 분획) PL-KP률 장내세균의 효소활성을 이용하여 부분분절(partial fragmentation)시킴으로써 항암력 증강 가능성을 검토하였다. 1. 장내세균을 이용한 PL-Kp의 처리 :PL-Kp 5.62g을 기본배지 281m1에 용해 시킨후 그 중 100m1에는 Py-92 균주(endoglucanase 생성균주)를, 다른 100m1에는 초식동물로부터 분리한 활성 균총을 접종한후 배양물 100m1 당 BH1 broth 10n1를 첨가하고 24시간 배양하였다. 배양물을 원심분리하여 그 상등액을 열탕에서 15분간 가열하고 투석, 동결건조하여 건조분말로 획득하였다. 이증 Py-92 균주로 처리한 시료를 Kp-F1, 균총으로 처리한 시료를 Kp-F2, 균을 접종하지 않고 처리한 시료를 Kp-FC라 한다. 2. 분절 (Fragmentation) 확인 : 증류수에 용해시킨 시료의 Sephadex G-25 컬럼을 이용한 gel filtration 유형(컬럼 통과 속도 및 착색대 유형)등을 관찰하여 Kp-F1 및 Kp-F2가 성공적으로 분절되었음을 확인하였다. 3. 분절 Kp의 항암력 실험 : ICR 마우스내 피하에 이식한 sarcoma 180고형암에 대한 항암력을 비교실험하여 부분분절에 의해 항암력이 증가 여부를 확인하였다. 그 결과 PL-Kp가100mg/kg/day ip의 용량에서 49.5%의 종양저지율을 발휘하였으나 균총을 이용하여 부분분절시킨 시료(Kp-F2)는 그 1/5용량에서도 87%의 종양저지율을 발휘하여 항암력이 현저히 증가 되었음을 확인하였다. 한편 Py-92 균주를 이용하여 분절시킨 Kp-F1도 100mg/kg용량에서 76%의 종양저지율을 나타내었다. 이로써 부분분절 조작을 통하여 항암성 단백다당류인 PL-Kp 의 항암력을 현저히 증가시킬 수 있음이 입증되었다.