Proceedings of the Korean Aquaculture Society Conference
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2003.10a
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pp.60-60
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2003
릿테르개멍게는 척색동물문 해초강에 속하는 멍게류로서 고착생활을 하며, 보통 해조류나 히드라 등으로 덮여 있어 눈으로 식별하기가 어렵고, 생태 및 분류에 관한 연구만이 있을 뿐이다. 이 연구는 제주도 연안에 서식하는 릿테르개멍게의 번식생태에 대한 기초자료를 얻고자 배우자형성과정 및 생식소 발달 단계 등을 조직학적으로 조사하였다. 실험 재료는 제주도 용담 연안에서 2001년 11월부터 2003년 1월까지 매월 20개체씩 총 300개체를 채집하여 생식소의 조직학적 변화를 관찰하였다. 릿테르개멍게는 자웅동체로서 생식소는 체벽부에 붙어 있고, 성숙시기에 난소는 적색을, 정소는 유백색을 띠고 있다. 생식소와 체벽부를 포함해 절단된 조직표본에서 보면 외측체벽은 근섬유를 포함한 섬유성결합조직이 발달해 있고 여기에 이어진 방형의 난소낭과 그 주변부에 자리 잡고 있는 여러 개의 정소낭을 식별할 수 있었다. 생식소 발달 및 배우자형성과정, 월별 생식소변화를 토대로 생식주기를 구분하면 성장기 (3-5월),난황기 (5-7월), 성숙기 (7-11월), 방출기 (11-2월), 회복기 (1-3월)로 구분되었으며, 주 산란시기는 11-1월로, 연중 1회의 산란시기를 갖는다.
Outlines for plasma $estradiol-17\beta$, components, electrophoretic patterns, and ultrastructural changes were obtained in female rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) during the seasonal reproductive cycles. Plasma $estradiol-17\beta$ under the natural conditions, exhibited distinct seasonal variation, peaking very late in vitellogenic season during September, decreasing gradually the halt of spawning in December, and ultimately falling during the early stages of seasonal ovarian recrudescence in February and March. This change in $estradiol-17\beta$ appeared to stimulate vitellogenin production as evidenced by increases in plasma calcium, phosphorus, glucose, albumin and total protein levels. The electrophoretic patterns of late maturing or spawning oocytes were stained more intensively than those of late perinucleolus oocytes (molecular weights of approximately 70,000 and 200,000). Two protein bands were found in the SDS-PAGE separation, coincident with the $estradiol-17\beta$ hormone peak. Gonadosomatic indices (GSI) significantly increased from October to January, and showed the highest peak in January, coinciding with the numerically abrupt increase of ripe ova in female. A positive correlation (r=0.701, p<0.01) was established between plasma $estradiol-17\beta$ levels and the gonadosomatic index during the prespawning. The highest level of hepatosomatic index (HSI) observed in December. During the breeding season (December), the gonadotropes were large and filled with GTH-containing inclusions such as granules and globules. The vitellogenic phase began as late perinurleolus oocytes became transformed into early maturing oocytes through the accumulation of yolk, and oocytes reached the late maturing stages as the ooplasm was completely packed with yolk. Marked ultrastructural changed in the granulosa cells during nuclear migration involve the dilation of the rough endoplasmic reticulum and the appearance of the rod-shaped mitochondria with tubular cristae. Microvilli (finger-like projections), from the zona radiata and from the oocyte grew, and made contact with each other in the pore canals of the zona radials during vitellogenesis, but were withdrawn as the zona radiata became more compact and devoid of pore canals during oocyte maturation. The zona radiata grew to a tripartite structure such as an outer thin homogeneous layer, and two inner thick helicoidal layers (zona radials interna and zona radiata externa). Under the normal conditions, the ovarian follicle influenced the histological development and periodical secretion of the hormones , sufficient for a oogenesis and gonadal steroid production.
The small octopus(Octopus minor), a species in the cephalopod class spawns the fewer eggs compared with its relatives such as Octopus vulgaris and Octopus ocellatus and exerts special efforts in nursing eggs hiding in the deep cave beneath the mud flat. Correspondingly, its embryogenic process had been hardly observed. In this study, we induced the small octopus to spawn its eggs in the artificial spawning tube and to nurse the developing embryos under the periodical observation. The early embryogenic change in the fertilized eggs was appearance of blastodisc on the animal pole at 4 days after spawning. A mass of rudiments of several organs developed in the middle of the yolk sac at 28-th day and it moved gradually toward the animal pole. At 38 days after spawning, two eyes appeared on the head and the trunk with heart developed on the apical part of the yolk sac. At 45-th day of embryonic development, the trunk and head occupied a half of the egg capsule and consequently the yolk sac was reduced to a half of its original size. Two eyes became prominent at the bottom of the trunk with several spots at day 60. Embryonic development was completed at about 80 days after spawning and the arms stuffed the lower half of egg capsule. The young fry squeezed out of the egg capsules with their long and slender arms first and mantles later. Soon after hatching, it swam actively and squirted ink.
The endemic Korean stumpy bullhead Pseudobagrus brevicorpus is a first-grade endangered wild fish as designated by the Ministry of Environment of Korea. As part of its restoration and proliferation effort, a histological study of this fish was carried out to investigate sex differentiation and gonadal development based on F1 generation individuals obtained by artificial breeding. On days 4~5 after hatching, a pair of genital ridges including clusters of primordial germ cells was observed between the gut and the mesonephric duct. On days 20 after hatching, the ovary began to initially differentiate and contained early oocytes with chromatin-nucleolus and peri-nucleolus stages on days 30~40 after hatching. As yolk material accumulated after day 80 from hatching, the oocytes grew increasingly large and were surrounded by a distinct follicular layer. On days 306 after hatching, the oocytes grew toward a mature ovum. In the males, the testis was distinguished by emergence of spermatogonium cells on 25 days after hatching, and day 40 after hatching it contained a small number of seminal lobes forming cysts. From 173 days after hatching, the testis consisted of numerous enlarged seminal lobes including spermatocytes and spermatids. Over 14 months after hatching, some seminal lumens were filled with spermatozoa.
Protein patterns at various stages of pre-and post-fertilization in Drosophila melanogaster were analyzed using polyacrylamide gel electrophoresis. Ovaries at various times after hatching, embryos, larvae and pupae were collected and used for protein analysis. The protein patterns were found to vary qualitatively and quantitatively during oogenesis as well as during embryogenesis and metamorphosis. Yolk proteins, which were found to be synthesized in fat body and transferred into the oocytes, appeared in three bands in the gel in the early stages, but these proteins seemded to be converged into a single band in the late stage of oogenesis. The protein patterns in the post fertilization stages seemed to be abruptly changed at two different stages; between embryonic and larval stages and between the second and third instar stages. The pattern in the pupal stages was not very much different from that of the third instar.
Early life history and spawning for Odontobutis interrupta were observed in the laboratory during May-August 1999 with a condition of natural habitats in the field. Optimal water temperature for spawning was between 17.5 and 22.$0^{\circ}C$ and appropriate water depth and current velocity in the natural habitat ranged 0.3-0.6 m and 0.1-0.3 m/sec, respectively. Ovary maturation index peaked at about 100mm in the total length and their values gradually decreased after the size. Male fishes showed a territory and courtship behavior to adult females and the males frequently pushed upper-ventral part of females for egg releases. After females spawned, the males guarded the egg masses and supplied dissolved oxygen using pectoral fins. According to observation of egg development in the laboratory, blastodisc formed in 1hr 17 min after the fertilization, cleavaging at 36-minute interval regularly. Blastulation occurred in 7 hr 12 min after the fertilization, with gastrulation after 11 hr 11 mins and formation of york plug after 32 hr 48 min. Embryo was formed in 33 hr 45 min after fertilization and optic vesicles appeared in 47 hr 27 mins when 30-31 somites were formed. Cardiac primordium was formed in 65 hr 15mins and its beat averaged 44- 48 time/min. Pectoral fins were formed in 138 hr 40 min, air-bladder and black vesicles were observed in lower portion of young fish. Embryo hatched from she-11 membrane after about 10 days and juvenile was 5.8$\pm$0.2mm in total length 3.0$\pm$0.5mg in weight.
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.72-72
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2002
조류는 발생학적 특성상 수정과 초기 배발생을 제외한 거의 대부분의 개체발생 과정이 난각 속에서 진행된다. 그러므로 수정란에 생명 공학적 기법을 적용하는데 있어서, 포유류의 경우 여러 생명공학 기법이 적용된 수정란은 초기발생을 위한 체외배양 이후 반드시 모체에 이식되어야 하지만, 조류의 경우 인공적인 체외배양 체계가 확립되어 있어야 생명공학 기법이 적용된 수정란을 개체까지 발생시킬 수 있게 된다. 닭의 난자는 난관 누두부에 배란 후 약 15분내에 정자의 침입을 받아 수정되어 난관 팽대부에 도달하면 1세포기 수정란이 된다. 그 후 수정란이 협부에 도달하면 최초로 분할이 일어나기 시작하여, 방란시에는 그 세포수가 60,000개에 이르게 된다. 한편, 계란의 형성 과정에서는 다량의 난황을 포함한 난자가 난관 누두부로 배란되어 정자와 만나게 되면 수정란으로서 계란 형성이 계속되고 정자와 만나지 못하게 되면 무정란으로서 계란 형성을 계속하게된다. 배란된 난자가 난관누두부를 거쳐 난관팽대부에 도달되면 난자는 농후난백에 의해 둘러싸이게 되고 난관혈부에 도달되면 난각막이 형성되고 수양성 난백이 침적하게 된다. 그 후, 난관협부를 지난 난자는 난관자궁부에 도달되면 20시간이상 그곳에 머물면서 난각형성이 진행된 다음 방란된다. 따라서 수정란에 외래유전자를 미세주입하여 형질전환 닭을 생산하기 위해서는 수정란을 암탉의 난관 내에서 최초 분할되기 전에 외부로 끄집어내어야 하며, 수정란에 외래 유전자를 미세주입한 다음에는 다시 암탉의 난관내로 이식해야 하지만 현재까지 그러한 기술은 확립되어 있지 못하다. 그렇기 때문에 모체의 난관 속에서 일어나는 배 발생과 그 이후 개체까지의 발생을 위하여 인공적인 체외배양 체계가 확립되어 있어야 한다. 따라서 본 발표에서는 형질전환 닭을 생산하기 위한 양질의 1세포기 수정란 획득 방법과 획득된 수정란의 체외 배양방법에 관하여 기술적인 측면에서 고찰 해보고자 하며, 그와 같은 배양 기술을 이용하여 외래유전자를 도입한 일련의 결과에 관하여 보고 하고자한다.
Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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v.28
no.5
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pp.1231-1243
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2016
The ultrastructural study on oocyt development and the process of vitellogensis in the oocytes during oogenesis in female Pampus echinogaster were investigated by electron microscope observations. In the previtellogenic phase, in particular, several intermitochondrial cements appear in the cytoplasms of the chromatin nucleleolus oocyte and perinuclear oocyte. The number of intermitochondrial cements are associated with the multiplication of the number of mitochondria in the early developmental stage. In the early vitellogenic phase, the Golgi complex in the cytoplasm of the yolk vesicle oocyte is involved in the formation of yolk vesicles containing carbohydrate yolks. At this time, many pinocytotic vesicles containing yolk precursors (exogenous substances) by pinocytosis are observed in the cytoplasm near the region of initial formation of the zona pellucida. In the late vitellogenic phase, two morphological different bodies, which formed by the modified mitochondria, appeared remarkably in the yolked oocytes. The one is the multivesicular bodies and another is yolk precursors. The multivesicular bodies were transformed into the primary yolk globules, while yolk precursors were connected with exogeneous pinocytotic vesicles near the zona pellucida. After the pinocytotic vesicles were taken into yolk precursors, the yolk precursors were transformed into the primary yolk globules. Thereafter, primary yolk globules mixed with each other, eventually, they developed into secondary and tertiary yolk globules. In this study, vitellogenesis of this species occurred by way of endogenous autosynthesis and exogenous heteogenesis. Vitellogenesis occurred through the processes of endogeneous autosynthesis, involving the combined activity of the Golgi complex, mitochondria and multivesicular bodies formed by modified mitochondria. However, the process of heterosynthesis involved pinocytotic incorporation of extraovarian precursors (such as vitellogenin in the liver) into the zona pellucida (by way of granulosa cells and thecal cells) of vitellogenic oocytes.
Park, Jae Min;Lee, Sung Hun;Yun, Seong Min;Na, Hae Choon;Han, Kyeong Ho
Korean Journal of Ichthyology
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v.27
no.2
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pp.71-77
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2015
Morphological changes in eggs and larvae of spotted knifejaw, Oplegnathus punctatus were observed by cultivation of fertilized eggs to juvenile stage. Fertilized egg was demersal and transparent. The egg has one oil glouble and its size ranged 1.01~1.15 mm ($1.08{\pm}0.10mm$; $mean{\pm}SD$, n=20). Culture chambers were maintained $22.5{\sim}24.5^{\circ}C$ in water temperature and 33.5~34.5ppt in salinity. It took 25 mins from fertilization to the blastoderm stage, 55 mins to 2 cell stage and 20 hrs 50 mins to hatching. Newly hatched yolksac larvae ranged 2.59~3.02 mm ($2.81{\pm}0.25mm$, n=5) in total length, and mouth and anus were not still open. Yolk and oil globule were absorbed 2 days after hatching (DAH). Flexion larvae in 12 DAH ranged 3.02~3.07 mm TL ($3.04{\pm}0.04mm$), and the caudal fin grew to fan-shaped, melanophores appeared on top of digestive canal.
Oocyte surface in two Korean minnows, Rhynchocypris oxycephalus and R. kumgangensis was examined by light and electron microscope. In two species, the development of the oocyte was similar, but the follicular layer surrounding full-grown oocyte showed an evident difference. In R. oxycephalus, the follicular layer at the yolk vesicle stage became bilaminar with the retention of its outer squamous cell layer and the acquisition of an inner cuboidal or round cell layer just over the zona radiata. As the oocyte grows, the cuboidal cells of the inner follicular layer began to be replaced by columnar cells. At the yolk granule stage, the columnar cells secreted mucin to their cytoplasm (adhesive materials) and then surround the entire oocyte, as bundles of fence-shaped structures. Whereas, although the follicular layer of R. kumgangensis had an outer squamous layer and an inner cuboidal or round cell layer at the yolk vesicles as in R. oxycephalus, no inner cells were more changed with the retention of its cuboidal or round cells. Finally, in R. kumgangensis, the adhesive materials did not occur. In Korean two minnows, the structural difference in the oocyte surface seems to be related to their habitats and spawning characteristics as well as taxonomic characters.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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