• KSBB Journal
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• 제14권2호
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• pp.174-180
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• 1999

Cholesterol oxidase(EC.1.1.3.6)는 cholesterol을 산화 또는 이성화시키는 효소로, 혈중 cholesterol이 측정 등의 임상진단용 시약에 이용되고 있으며, 여려종류의 미생물에서 분리, 연구되어 왔다. 현재에는 농업 및 식품 등에도 응용이 기대되고 있는 매우 유용한 효소이다. 본 실힘은 토양에서 분리한 방선균으로부터 cho1esterol oxidase생산능이 우수한 균주를 선발하여 속의 동정, 효소의 생산조건 및 효소학적 특성을 조사하였다 . 본 분리균주는 배양학적, 형태학적 생리학적 특성 및 현미경 검정을 통하여 Streptomyces sp으로 동정하였다. 본 효소의 생산조건을 조사한 결괴 탄소원으로 1% soluble starch, 질소원으로 2% corn steep liquor가 효소생산에 우수하였으며, 이들 탄소원, 질소원이의 0.1% $NaNO_3$, 0.1% $KH_2PO_4$, 0.05% $MgSO_4$가 함유된 배지를 생산 최적 배지로 사용하였다. 본 효소의 특성을 검토한 결과, 최적온도와 최적pH는 각각 $37^{\circ}C$, pH 6.5~7.5이었으며. 효소와 안정성은 온도 $30-40^{\circ}C$에사 80% 이상 활성이 유지되었으며, pH 6.0~9.0의 범위까지 안정한 것으로 나타났다. 본 효소의 등전점은 multichambered electrofocusing unit를 사용하여 측정한 결과 pH 6.0-6.5인 것으로 추정되었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제32권3호
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• pp.224-229
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• 2004

토양으로부터 강력한 CAH activity를 갖는 균주를 분리하여, 생화학적, 배양학적, 전자현미경 동정을 한 결과, Bacillus sphaericus로 확인되었으며, 이를 B. sphaericus 366M-9로 명명하였다. 또한 이 균으로부터 최초로 cephalosporin-C deacetylase(CAH)를 분리 정제하였다. 정제수율은 약 7.5% 였으며, B. sphaericus 366M-9에서 분리한 CAH-9의 최적활성 온도는 $50^{\circ}C$였으며, 효소안정 온도구간은 30～$50^{\circ}C$이다. 또한 최적 활성 pH는 7.0이었으며, 효소안정 pH구간은 pH 6.0～8.0으로 90% 이상의 잔존 활성도를 나타내었다. 효소반응속도에 미치는 기질의 영향에서는 $K_{m}$ 값은 0.87 mM 이며,$ V_{max}$는1.22 unit/ml이었다.다.

• 농약과학회지
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• 제6권1호
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• pp.42-44
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• 2002

1999년 대관령 고랭지에서 재배되는 백합에 막대한 피해를 주는 병이 발생하여, 이 병의 원인 병원균의 동정과 화학적 방제 방법을 찾기 위한 시험을 수행하였다. 백합에서 분리된 12 균주 모두는 P. cactorum으로 동정되었다. 백합 역병균에 대한 metalaxyl의 약제 반응을 조사한 결과 분리된 균주 모두는 $10{\mu}g/mL$에서 전혀 균사가 생장하지 못하므로 감수성 균인 것으로 나타났다. 백합 역병균(P. cactorum PC-1) 방제 약제를 선발하기 위하여 11약제를 선택하여 스크리닝을 수행한 결과, dimethomorph, ethaboxam, metalaxyl, oxadixyl은 $10{\mu}g/mL$에서 병원균의 생장을 완전히 억제하여 우수한 약효를 나타냈다. 따라서 metalaxyl과 같은 phenylamide계 살균제 및 다른 역병 방제용 살균제의 살포는 백합 역병의 방제에 효과적일 것으로 생각된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제31권4호
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• pp.383-388
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• 2003

가축 사료첨가용 효소생산을 목적으로 xylanase 및 CMCase를 동시에 분비하는 미생물을 분리한 후 가장 생산성이 높은 균주를 선발하였다. 선발된 미생물을 동정한 결과 Bacillus sp.에 속하는 균주로 Bacillus sp. A-7로 명명하였으며, B. licheniformis로 동정되었다. 효소생산을 위한 최적 액상배양조건은 탄소원으로 glucose 2.0%(w/v), 질소원으로 yeast extract 0.3%(w/v), 미네랄은 CaCl$_2$ 0.1% (w/v)인 것으로 나타났다. 저렴한 효소생산을 위한 배지조성을 얻기 위해 가축사료로 이용되는 저가의 원료사료를 이용하여 효소생산성을 파악한 결과 대두박 1.0%(w/v)와 당밀 0.5%(w/v)가 특히 xylanase 생산성이 높은 것으로 나타났다. 특히, 대두박 1.0%(w/v)를 기본배지로 하여 ammonium nitrate 0.3%(w/v) 및$ CaCl_2$ 0.1% 첨가가 적합한 배지조성으로 나타났다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권3호
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• pp.219-223
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• 1998

작물 병해충에 대한 무공해 미생물 농약 개발의 일환으로 곤충 병원성 곰팡이 Metarhizium anisopliae의 분자생물학적 육종을 위해 이 균주의 형질전환계를 확립하였다. M. anisopliae의 원형질체를 제작하여 benomyl 약제에 대하여 저항성을 나타내는 Aspergillus flavus 유래의 ${\beta}-tubulin$ 유전자를 갖는 pBRG-4 plasmid DNA를 polyethylene glycol 방법으로 형질 전환하였다. 이 형질전환은 pBRG-4 DNA $50\;{\mu}g$당 10개의 효율로 이루어졌으며, 그 결과 야생형 균주들의 $2.5\;{\mu}g/ml$ 농도의 benomyl 존재 하에서도 성장이 억제되는데 반하여 선발된 형질전환체들은 $5.0\;{\mu}g/ml$ 농도의 benomyl 함유 배지에서도 잘 성장하였다. 또한 이 형질전환체들의 chromosomal DNA를 분리하여 Southern 분석한 결과 ${\beta}-tubulin$ 유전자가 homologous recombination에 의하여 M. anisopliae의 genome속에 삽입 되었음을 확인하였다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제51권2호
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• pp.93-101
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• 2008

본 연구는 내산성과 담즙산 내성이 뛰어나고 건강증진 효과가 우사한 L. acidophilus를 신생아의 분변에서 분리 및 선발하고 이들에 의한 장내 유해미생물 생육억제, 혈중 cholesterol 저하 및 과산화수소에 대한 저항성과 탈지유 발효를 통한 풍미성분 형성, ACE 저해활성, 철분가용성 증진 등에 관한 기초 지식을 확보하여 다양한 생리활성 기능을 가진 유산균을 개발하고자 실시하였다. 실험 결과 신생아(생후 2주 이내)에서 분리된 5종의 L. acidophilus 중 특히 L. acidophilus SD 105는 Listeria sp.에 대한 항균활성, 복합담증산염 분해활성 및 항산화효과가 다른 시험 균주에 비해 모두 높게 나타나 그 이용성이 매우 다양할 것으로 생각된다. 또한 L. acidophilus SD 102는 ACE활성 억제효과가 18%로 시험균주 중에 가장 높았으며 L. acidophilus SD 103은 유단백질 유래 철분가용화 펩타이트 생성능이 높아 철분흡수율 증가와 연관된 probiotic 유산균으로서의 활용가능성이 있는 것으로 사료된다.

• 한국균학회지
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• 제26권2호통권85호
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• pp.194-199
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• 1998

본 실험에서 공시균주로 사용된 비늘버섯속균은 1997년도 8월초부터 10월말까지 강원도내의 삼림(삼악산, 오대산, 장원대학 연습림)에서 채집된 것으로서 갓의 지름이 $3{\sim}8\;cm$로 편평형이며 갓표면은 습하면 점성이 있고 황갈색이며 주름살은 완전 붙은형이며 약간 빽빽하고 처음에는 황백색이나 차차 갈색으로 변하기도 한다. 식용 가능한 비늘버섯속균(Pholiota sp.)을 이용하여 자실체 생산에 관한 연구를 한 결과 공시균주인 검은비늘버섯(Pholiota adiposa)의 균사생육에 적합한 온도는 $25{\sim}30^{\circ}C$로, 자실체 형성에 적합한 온도는 $15{\pm}1^{\circ}C$로 조사되었다. 농업적으로 이용이 가능한 산업용 액체배지의 탄소원으로는 황백당(brown sugar)을 사용하였으며, 질소원으로는 대두분(soybean flour)을 사용하였다. 본 균의 인공자실체는 포플러 톱밥과 쌀겨를 4:1로 혼합한 병재배를 통해 형성되었으며 액체배양장치로는 배양액량이 8 L인 원통형의 내열성 유리병을 선발하여 이용하였다.

• 한국균학회지
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• 제12권1호
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• pp.21-26
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• 1984

Aspergillus awamori를 전분이 함유된 Czapek-Dox배지에서 한천평판배지, 액체배지 방법으로 배양하고, glucoamylase의 생성을 glucose oxidase로서 추구하였다. 전분을 함유한 Czapek-Dox 한천배지상의 포도당의 존재와 그 함량은 glucose oxidase을 사용하여 정성, 정량 할 수 있었다. 따라서 많은 종류의 glucoamylase 생성균주를 신속하고 간편하게 검색하는 방법을 확립하였다. 정치배양은 포도당량은 많았으나, 진탕배양은 반대로 포도당 양은 적었다. 그러나 진탕배양에서 포도당이 성장과 대사에 조속히 활용 되는것 같았다. Cellulose acetate판을 이용한 전기영동법과 2% 전분용액을 사용하여 glucoamylase를 동정할 수 있었으며, 이때 glucose oxidase를 사용함으로서 확인이 쉽게 되었다. 전분 당화균의 강력 균주의 검색선발에 있어서 위의 결과를 활용할 것을 제의한다.

• 농업과학연구
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• 제16권1호
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• pp.44-55
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• 1989

우리나라 토양중의 Streptomyces를 분류, 동정하고자 토양으로부터 총 826 균주이 Streptomyces를 분리하여 1차 배양하고 형태적, 생리적 특성이 다른 65 균주를 선발하여 I.S.P 방법에 따라 총 46 종의 Streptomyces를 동정하였으며 그 중 국내미기록종은 38종으로서 마음과 같다. 1) melanin 색소형성균 S. lavendulae, S. tuirus, S. purpurascens, S. violarus, S. lateritius, S. olivochromogenes, S. purpeofuscus, S. fulvoviolaceus, S. gallilaeus, S. naganishii, S. hygroscopicus subsp. ossamyceticus, S. nevagawaensis, S. anandii, S. phaeopurpureus, S. mirabilis, S. arenae, S. massasporeus, S. eurythermus. 2) Melanin 색소 비형성군 S. fellus, S. flavidovirens, S. exfoliatus, S. fumanus, S. termitum, S. glomeroaurantiacus, S. luteofluorescens, S. prunicolor, S. fradiae, S. tauricus, S. griseolus, S. misakiensis, S. poonensis, S. antimycoticus, S. diastaticus subsp. ardesiacus, S. nigrifaciens, S. tendae, S. narbonensis subsp. josamvceticus, S. atroolivaceus, S. chrysomallus subsp. fumigatus.

• 생명과학회지
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• 제13권5호
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• pp.582-589
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• 2003

본 연구에서는 가지과 작물의 근권에서 유용한 균주를 분리하고 근권ㆍ길항ㆍ생육촉진미생물을 선별ㆍ제제화하고 상토에 첨가하여 미생물제제 혼입 상토를 제조한 후 고추 플러그묘의 초기 생장에 미치는 영향을 조사하였다. 근권미생물로는 가지과 작물의 뿌리 및 재배 토양 등 385점의 균원시료로부터 540여점을 분리한 후, 가지과 작물에 공통적으로 발생되는 Alternaria solani, Botrytis cinerea, Fusarium oxysporium, Phytophthora capsici, Sclerotinia sclerotiorum 등의 병원균에 높은 길항력을 가진 미생물 20여종을 선발하고, 이들 길항미생물 중에서 고추의 초기 생육을 촉진시키는 MJ-3균주를 최종 선발하였다. 근권ㆍ길항ㆍ생육촉진미생물인 분리주 MJ-3은 Bergey's manual of systematic bacteriology의 방법과 16S rDNA sequence법 등으로 조사하여 Bacillus amyloliquefaciens동정하였다. 제제화한 B. amyloliquefaciens를 상토에 첨하여 미생물 혼입 상토를 제조하였고, 이를 이용하여 재배한 고추 플러그 묘는 초장과 경경, 뿌리길이, 생체중량 등이 모두 대조구에 비해 소량 증가되었으나, 특히 뿌리의 생체중량이 대조구가 0.61g/plant인데 비해 시험구는 0.88g/plant로 44.3% 증가하였다. 미생물제제 첨가 상토에서 재배한 고추의 gib-berellin (GA$_1$) 함량은 0.559ng/g(건조중량)이었다.