The present study was conducted to examine some factors affecting in vitro development and fecundity of embryos recloned with somatic cell nuclear transfer (SCNT). Fibroblast cells retrieved from the ear of a 3-week-old, cloned Korean goat (Jinsoonny) were used as karyoplast donors and serum-starvation was conducted in tissue culture medium (TCM)-199 supplemented with 0.5% FBS. Recipient oocytes were surgically collected by flushing the oviducts 35 h after hCG injection following FSH priming. The zonae pellucidae of the oocytes were partially perforated with a laser drill and a donor cell was transferred into an enucleated oocyte. The couplets were electrically fused and activated by ionomycin (5 min) and 6-DMAP (4 h). The reconstructed embryos were cultured in mSOF medium containing 0.8% BSA at $39^{\circ}C$ in an atmosphere of 5% $CO_2$, 5% $%O_2$, 90% $N_2$ for 12 to 15 h. Re-cloned embryos (2- to 4-cell stages) were surgically transferred into the oviducts of the recipients and pregnancy was subsequently diagnosed by progesterone assay and ultrasound on Days 21 and 63 of pregnancy. The fusion rate following 1st fusion pulse was higher (p<0.05) in 2nd cloning (65.9%) compared to 1st cloning (51.0%), but it was not different in the other groups. The rate of cleavage after fusion was significantly higher (p<0.05) in 1st (77.7%) than in 2nd cloning (56.0%). A total of 175 re-cloned embryos were transferred into 28 recipients. On day 21 and 60 after transfer, 11 (39.3%) and 4 recipients (17.4%) were pregnancy, respectively. In comparison of pregnancy rate by estrous synchronization, a total of 66 and 109 re-cloned embryos were transferred into 11 recipients in natural estrus and 17 recipients in induced estrus, respectively. Five (45.4%) and 2 recipients (18.2%) in natural estrus were pregnant on days 21 and 63 while 6 (35.3%) and 2 (11.8%) recipients in induced estrus were pregnant, respectively. These results show that recloning of goat can be achieved by SCNT and estrous synchronization between donor and recipient animals may be one of the major factors affecting success rate.
Kim, Kyung-Soon;Yea, Sung-Chul;Yoo, Byong-Chul;Cho, Chong-Kwan;Lee, Yeon-Weol;Yoo, Hwa-Seung
The Journal of Internal Korean Medicine
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v.32
no.1
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pp.33-42
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2011
Background : Despite recent advances in cancer management, prognosis of ovarian cancer is poor. Anticancer effects of herbal medicine, such as Euonymus alatus Sieb, Oldenlandia diffusa (Willd.) Roxburgh, and Orostachys japonicus A. Berger, have been reported in treatment of ovarian and cervical cancers, but the systematic approaches to explain their molecular mechanism(s) have not yet been established. Objectives : To establish a basis of understanding for anti-cancer mechanisms of herbal medicine, we profiled protein expression in human ovarian and cervical cancer cells treated with the extracts from Euonymus alatus Sieb, Oldenlandia diffusa (Willd.) Roxburgh and Orostachys japonicus A. Berger. Methods : Human ovarian cancer cell line NIH:OVCAR-3, and human cervical cancer cell line HeLa were employed in the present study. Whole protein was obtained from the cells harvested at 48 hours after the treatment with herbal water-extract, and analyzed by 2DE-based proteomic approach. Results : Various changes of protein expression induced by the herbal treatment were monitored : down-regulation of molecular chaperone (calreticulin variant), glycolytic enzymes (D-3-phosphoglycerate dehydrogenase, glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase and alpha-enolase), RNA processing molecules (hnRNP A2/B1), and antioxidant protein (peroxiredoxin 1). Conclusions : Repression of glycolysis has been accepted as the mechanism to increase anticancer reagent's effect. Thus, down-regulation of glycolytic enzymes by the herbal extracts suggested a possible synergistic effect of herbs in the presence of platinum-based therapeutics. In further study, as well as the synergistic effect of the herbs, it has to be further validated whether artificial regulation of hnRNP A2/B1 in ovarian cancer cells affects various cancer survival factors, since RNA processing can be interrupted by deranged expression of hnRNP subtypes, and it results in an inhibition of cancer cell growth.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.7
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pp.993-999
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2015
For the purpose of investigating the in vitro antidiabetic activity of a medicinal herb and herb mixture extracts prepared through traditional antidiabetic prescription, this study examined ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity. Tyrosinase, a type I membrane glycoprotein, is synthesized and glycosylated in the endoplasmic reticulum (ER) and Golgi. The enzyme is subsequently transported to melanosomes, where it participates in melanogenesis. Previous studies showed that disruption of early ER N-glycan processing by an ${\alpha}$-glucosidase inhibitor suppresses tyrosinase enzymatic activity and melanogenesis. According to the results, most oriental medicinal herbal extracts were stronger than acarbose and N-butyldeoxynojirimycin, known as an ${\alpha}$-glucosidase inhibitor. Interestingly, ethyl acetate layer of enzyme hydrolyzed Cheongsimyeonjaeum had an inhibitory effect on melanin synthesis in B16F1 cells, although it did not inhibit tyrosinase activity directly. Together, ${\alpha}$-glucosidase inhibition activity could be used to evaluate anti-melanogenesis, although cross-checking with melanin inhibitory assay is recommended.
Park, Seol-Hee;Lee, Yong-Uk;Nam, Eui-Hwa;Yi, Hak-Jin;Jung, Ji-Young;Han, Seung-Hee;Song, Chi-Youn;Hwang, Cheol-Yong
Journal of Veterinary Clinics
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v.29
no.1
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pp.1-7
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2012
Fifty-four dogs with otitis externa were enrolled in the study for the Evaluation of efficacy of a Hydrocortisone aceponate - Gentamicin - Miconazole otic combination ($Easotic^{(R)}$, Virbac, Carros, France). Otitis externa patients were treated by $Easotic^{(R)}$ once daily for 5 days and 2 days off treatment and evaluated on $7^{th}$ day. If otitis externa persisted, additional $Easotic^{(R)}$ treatment was administered once daily for 5 days and rested 2 days and reevaluated on $14^{th}$ day. For the evaluation of efficacy of $Easotic^{(R)}$, eight clinical signs were scored on a severity scale and infectious agents from ear sample were also graded using semi-quantitative scale at each visit. Sum of clinical scores and cytological scores was defined as Global Clinical Score. When $Easotic^{(R)}$ was applied once daily for 5 days, global clinical score was reduced 76.0%. When $Easotic^{(R)}$ was administered for 10 days, during first 5 days administration, 46.6% reduction of global clinical score was detected. During additional 5 days administration, 82.2% reduction of global clinical score was observed compared with Day 0. Any relevant adverse effect was not reported during the study in all cases. Thus, $Easotic^{(R)}$ treatment once daily for 5 days and 10 days appears to be effective and safe treatment for canine otitis externa.
Two-day-old chickens{\;}and{\;}mallards were orally inoculated with one of % doses varying from $2{\;}{\times}{\;}10^2{\;}to{\;}2{\;}{\times}{\;}10^6$ of C. bailevi oocysts per individual. Generally, the more oocysts Inoculated were, the longer the patent periods were, and the more oocysts shedding were. Meanwhile increasing the inoculative dose, the prepatent periods were shortened except that mallards inoculated with $2{\;}{\times}{\;}10^2and{\;}2{\;}{\times}{\;}10^3$ oocysts foiled to produce the oocysts. The more parasites involving oocysts appeared from the chicken in comparison to the mallard. In the chickens challenged with a single dose of $2{\;}{\times}{\;}10^6$ oocysts, a small number of oocysts were detected from feces on days 4-14 after challenge infection (ACI) in all of carrageenan administered groups and in the control groups inoculated with $2{\;}{\times}{\;}10^2{\;}and{\;}2{\;}{\times}{\;}10^3$ oocysts. In the mallards, a few oocysts were also recognized on days 5-15 ACI in all of carrageenan treated groups and in the control groups inoculated with $2{\;}{\times}{\;}10^2,{\;}2{\;}{\times}{\;}10^3{\;}and{\;}2{\;}{\times}{\;}10^4$ oocysts. Just prior to challenge infection, phagocytic activity of peritoneal macrophages (Me) and the number of peripheral Mc in both birds were significantly decreased in the carrageenan treated groups as compared to the control groups. Mild challenge inection in both birds denoted that the immunogenicity of C. bailelli to the birds was very strong, despite MB blocker carrageenan administration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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