생물반응기를 이용한 회분배양에서 균체량 생산에 있어서 조건은 200 rpm, 1 vvm 으로 선정하였으며, 이때 균체량은 11 g/L이었고, polysaccharide는 0.6 g/L이었다. 또한 pH를 초기 pH인 5.5로 고정하여 배양한 결과 pigment들로 인한 균사체의 활성이 떨어지는 것으로 나타났다 균체량을 증가시키기 위한 최적의 회분배양 조건에서는 초기 200 rpm으로 배양을 시작하여 300 rpm으로 증가시키고 glucose 5 g/L를 간헐적으로 첨가함으로써 균체량은 24.2 g/L, polysaccharide는 2.2 g/L로 나타났다. 또한 erinacine A의 분석은 HPLC를 사용하였으며 배양 4.5일째 균사체로부터 추출하여 mobile phase를 Methanol/water (9:1)로 flow rate은 0.7 ml/min으로 실험한 결과 erinacine A는 0.4 mg/g cell 로 측정되었다.
생균제로 새로이 개발된 효모인 Pichia amomala를 대량 생산하기 위한 배양 실험으로 가격이 저렴하고 균주 생육에 적절한 질소원으로의 CSL 실험을 실시한 결과 Yeast extract 에 비해 보다 우수한 생육을 보였고 , CSL 을 이용한 3ton fermenter 에서의 batch 실험결과 최대 OD 58까지 배양되었고 , batch 배양시 harvest 시점은 가장 많은 viale cell 을 얻을 수 있는 시점인 배양 후 20 시간으로 결정되었다 . 또한 원심분리후 동결건조시 안정제에 따fms 동결건조시의 생존에 대한 실험을 실시한 결과 skim milk 2%, scrose 2% 에서 가장많은 생균수를 얻을 수 있었다.
부패한 사과로부터 bacterial cellulose (BC)를 생산할 수 있는 균주를 분리한 후 배양조건에 따른 BC의 생산량을 조사한 결과 BC의 생산량은 진탕배양한 경우가 정치배양한 경우보다 약 1.5배 높았다. BC의 생산량을 높이고자 mutagen으로 UV와 cylcloheximide를 사용함으로써 BC 생산량을 약 3배 증가시킬 수 있었다.. 미생물에 의해 생성된 BC는 종이나 펄프와는 달리 pectin, 납, 유지, 단백질, 무기질 등의 불순물을 함유하지 않는 filter paper와 성질이 유사한 것으로 나타났다.
작약의 화분배양에 의한 반수체 식물을 유기시킬 목적으로 화분배양을 실시하여 배양중 소포자의 변화를 관찰하고 캘러스 및 배발생에 미치는 저온전처리(5$^{\circ}C$/10 days)의 효과와 배양화분의 생존율을 조사하였다. 작약의 화분배양시 캘러스 및 배발생에는 저온전처리의 효과가 다소 인정되었으나 약배양의 효과에는 미치지 못하였다. 화분를 첨가한 고체배지에 이식했을 때 구형배가 형성되었다. 화분의 생존율에는 저온전처리 및 배지조성간 의 영향이 미치지 않았으며 배양기간이 지남에 따라 화분의 생존율도 저하되었다.
인공장기 등 다양한 세포관련 연구를 수행할 때 요구되는 세포공배양에서 세포를 2D/3D 패터닝하는 기술은 장기를 모사하기 위한 필수적인 공정 중의 하나로 간주된다. 그러므로 이 글에서는 가장 간단하게 세포 및 표면을 이용하여 세포를 패턴화하고, 공배양할 수 있는 방법들에 대하여 설명하고자 한다.
난관상피세포와 그 배양액에서 분비된 고분자 분획이 소정자의 수정능력에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 실시한 실험에서 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 난관상피세포배양액으로부터 MW 5 kDa cut-off bucket을 사용하여 탈염 및 농축을 실시, 단백질/고분자분획을 회수하고 이를 체외수정용 배양액에 첨가하고 난관상피세포 monolayer와 공배양을 통해 체외수정을 실시한 결과 고분자분획첨가 및 난관상피세포 공배양(OM+OEC)군이 고분자분획첨가(OM) 군에 비하여 유의적으로 높은 분할율을 나타내었으며 난관상피 세포 공배 양(OEC)군 및 OM 군 모두 대조군에 비해서는 유의적으로 높은 분할율을 나타내었다(p〈0.01). 2. 난관상피세포와 전배양한 정자의 체외수정능을 조사한 결과 정자와 OEC를 4시간 동안 전배양한 후 체외수정한 군이 난자와 정자를 동시에 배양한 군에 비하여 유의적으로 높은 분할율을 나타내었다(p〈0.01). 이상의 결과에서 소 정자의 체외수정능은 난관 상피세포와의 접촉 및 분비액유래 고분자단백분획의 공동효과에 의한 것으로, 난관상피세포와의전배양은 체외에서 수정능획득을 유도하는 것으로 판단된다.
본 연구는 체외에서 성숙 및 수정된 돼지 체외 수정란을 두 종류의 서로 다른 배양액에 단층난구 세포와 공배양하였을 경우 배발달에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다 본 연구에서 얻은 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 단층난구세포와 함께 초기체외수정란을 Ham's F-10에서 배양한 결과 2-, 4-, 8~16-세포기, 상실배/배반포기로 발달하는 비율은 각각 48.7%, 40.5%, 34.8% 및 17.0% 였으며, TCM-HEPES에서는 각각 48.3%, 35.6 %, 22.1% 및 13.4%였다. 2. 단층난구세포와 공배양을 하지 않고 단순하게 배양액으로만 배양하였을 때 상실배/배반포기까지의 발달률은 0.0~1.0%로서 극히 저조하였다. 특히, 대부분의 수정란이 4-세포기 단계에서 발달이 정지되었다. 3. 돼지 체외수정란을 단층난구세포와 공배양하였을 때 단순배양한 결과보다 유의 적으로 높은 상실배/배반포기의 발달률을 나타냈으며 (P<0.05), 두 배양액간에는 유의차가 인정되지 않았다.
1) 목적 : Glutathione은 천연에 미양으로 분포하고 있으며 의약용으로도 매우 중요하기 때문에 효모에 의한 glutathione생산에 관한 보고가 많지만 glutathione을 다대 축적하는 효모 및 배양조건에 관한 보고는 적다. 본 실험에서는 glutathione을 다량 생산하는 효모의 screening과 배양조건을 검토하여 보고 하고자 한다.(중략)
유산균이 생성하는 polysaccharide 에 관한 연구의 일환으로서 L. casei YIT 9018 SKD-0007, L. bulgaricus SKD-0003, sir. faecalis SKD-1007, str. thermophilus SKD- 1005, str. thermophilus 510 SKD-1006등을 탈지유에 배양하면서 polysaccharide 생성에 의한 배양액의 점도 변화를 검토하였다. 이러한 다당류가 Antitumor로서의 활성과 제암효과를 가지며 인체내의 생리효과를 고양시킨다고 보고되어 있는바 다당류가 최대로 생성되는 조건을 찾는 것을 본 실험의 목적으로 하였다. 다당류의 생성을 측정하는 방법으로서 배지로는 10% 환원탈지유와 12% 환원전지유를 선택하였으며 Brookfield Viscometer를 사용하여 배양액의 점도를 경시적으로 측정하였다. 시험균 중에서 str. thermophilus 510 SKD-1006이 가장 높은 점도를 나타내었는데 41$^{\circ}C$ 배양 5일째에 5000 cps였고 다른균에 비해서 1000cps이상 높았다. 접종량이 증가할수록 점도도 증가하였으며 14%이상의 탈지유 농도에서는 7000cps를 나타냈다. 탈지유와 전지유 배양액 모두 의가소성 유체의 유동 양식을 나타내었는데 12% 환원전지유 배양액은 최대점도값이 2500 cps에 불과하였으며 배양 2일째에 최대점도 값에 도달하여 그 이후로 급격한 감소현상을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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