Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1979.10a
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pp.244.2-244
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1979
고분자 기질을 분해하는 효소의 고정화 후의 활성 yield을 높히고자 Polysaccharide의 표면에 acrylamide 및 N-hydroxysuccinimidyl acrylate을 graft 공중합 시킴으로써 긴 측쇄에 활성 ester을 가지는 새로운 carrier에 phosphiesterase을 고정화 시켰으며 이 고정화된 phosphodiesterase의 몇가지 성질을 조사하여 본래의 phosphiesterase의 성질과 비교하였다. 1) 이 Carrier에 phosphodiesterase을 직접 고정화시킨 결과 52%가 고정화되었으며 고정화된 효소는 38%의 비활성을 나타내 주었다. 2) phosphodiesterase는 이상과 같이 고정화됨으로써 최적작용 pH는 8.0부근에서 9.0부근으로 최적작용온도는 $50^{\circ}C부근에서$$60^{\circ}C부근으로$ KM치는 1.11mg에서 2.1mg/ml로 변하였으며 열안정성은 훨씬 증가하여 본래의 phosphodiesterase의 열불활성속도상수가 0.4인데 고정화된 효소는 0.03 이었다. 또 $5^{\circ}C에서$ 수용액상태(pH 8.0 Tris buffer)로 6개월 보관후의 관존 활성은 본래의 효소가 0.2%인데 고정화된 효소는 42%로 높은 치를 나타내주었다.
Urokinase (UK), a thrombolytic enzyme used to clear catheters obstructed by blood clots, can be also used industrially in the recombinant protein purification system to cleave a fusion protein linked with a certain fragment of GST. We have immobilized UK by covalent attachment to activated Sepharose 6B-Cl gels and evaluated its performance to cleave a fusion protein of hGH and GST. The Sepharose gels were activated by etherification with glycidol (2,3-epoxypropanol) and further oxidized with periodate resulting in glyceryl-Sepharose gels. After the activation treatment, surface density of the aldehyde groups was 7-30 $\mu$mol-aldehde/mL-gel. Immobilization yield was higher than 99% at high pH (10.5), and the immobilized UK maintained ca. 80% specific activity of the soluble UK. In a column reaction the cleavage yield heavily depended on the feed rate, and it was nearly 86% of that from soluble UK. And the immobilized UK was successfully regenerated by unfolding and refolding with 6M GuHCl. After cleavaging reaction, the monomeric hGH was purified by using expanded bed adsorption chromatography.
최근 콜레스테롤 센서는 전극 상에 효소를 고정화 하는 방식을 이용하여 센서의 집적도를 높이는 시도가 이루어지고 있다. 이러한 전극 상의 효소고정화 방식으로 entrapment, cross liking, covalently binding 등이 있다. 본 논문에서는 이러한 효소 고정화 방식-전도성 고분자인 P3MT를 사용하여 entrap시키는 방법과 silanization을 이용한 covalent bonding 시키는 방법-에 따른 전기화학 센서의 감도 특성에 관한 연구를 수행하였다. 전도성 고분자를 사용한 고정화 방법은 cyclic voltammograms으로 scan rate 10 mA/s, potential 0.5-1.3V의 조건하에서 P3MT를 Polymerization하고, 효소 고정화를 위해 chromoampermeter로 potential 0.6V에서 900초 동안 수행하였다. silanization을 이용한 covalent bonding 시키는 방법은 nitric acid로 Pt 전극표면을 산화시키고, APTER로 silanization 공정을 시행하였다. 효소 고정화를 위해 전해질로는 0.1M Phosphate buffer solution을 사용하여 cyclic voltammograms으로 scan rate 50 mA/s 전위 0.0-0.7V의 조건 하에서 수행하였다. 이 결과 전도성 고분자를 이용한 고정화 방법에서의 senstivity가 0.89 ${\mu}A/mM{\cdot}cm^2$이고, silanization을 이용한 효소 고정화 방법에서는 1.51 ${\mu}A/mM{\cdot}cm^2$였다. 이처럼 후자의 방법에서 더 좋은 감도 특성이 나타났다. 따라서, silanization을 이용한 고정화 방법이 센서 제작 방식으로 더 적합하다고 사료된다.
고정화 inulinase를 이용하여 inulin으로부터 fruc-tose 시럽을 연속적으로 생산하기 위하여 Bacillus sphaericus 188-1이 생성하는 inulinase를 부분 정제한후 5시간 NaIO$_4$로 산화시킨 cellulose에 고정화시킨 다음 이들의 성질을 조사하였다. 산화 cellulose에 고정화시킨 inulinase의 활성은 g당 47 Unit 이었고 고정화수율과 활성수율은 각각 41%와 39%이었다. 고정화시킨 inulinase의 작용 최적온도와 pH는 각각 5$0^{\circ}C$, pH 9.0이었고 5$0^{\circ}C$, pH 8.0~10.0에서 비교적 안정 하였다 고정화시킨 inulinas의 활성은 K+, Ca2+, Mn2+과 Hg2+에 의하여 활성화 되었으며 EDTA(10mM)에 의하여 심하게 저해되었다.
We first investigated basic characteristics of reticulated polyurethane (PU) foams as microbial carriers. In general, the specific surface area of PU foams increases with respect to decreasing pore sizes. However, the number of microbes adhered on the unit surface of reticulated PU foams decreases with respect to decreasing pore sizes. Thus, as a result of totally considering all effects such as apparent density, hydrolysis rate, and adhesion, we can know that PU foams with 45 PPI is the most appropriate microbial carrier. In this study, we can also investigate the effect of various physico-chemical surface treatments on the adhesion of microbes on the surface of PU foams. We used a chitosan treatment, a PEI (Polyethylene Imine) treatment, a xanthane treatment and a plasma treatment. As a result of comparing all surface treatments, the plasma surface treatment was the best.
The characteristics of Erwinia rhapontici cells with $\alpha$-glucosyltransferase activity immobilized in Ca-alginate beads and the performance of two different types of reactor-stirred tank reactor(STR) and packed bed reactor(PBR)-charged with these immobilized cells to produce palatinose from sucrose were investigated. The optimal pH(5.5-6.0) and temperature($30-35^{\circ}C$) showed no appreciable difference between free and immobilized cells. The apparent Km value of the immobilized cells(0.28M) was approximately two times higher than that of free cells(0.13M) at $30^{\circ}C$. The half life of the immobilized cells was found to be 380 h with STR while much greater operational stability was achieved with PBR. Continuous operation of PBR at a space velocity of $0.2h^{-1}$ for 30 days showed only 5% loss of initial activity.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1977.10a
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pp.197.5-198
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1977
일반적으로 protease는 고정화되면 저분자 기질에 대하여는 높은 활성을 내 주나 고분자 기질에 대하여는 낮은 활성을 나타내 줄다. 이것은 고정화된 Pretense의 구조적인 영향으로 생각된다. 본 실험에서 polysaccharide의 표면에 ac교lamide 및 N-hydroxysuccinmidyl acrylate (NHSA)을 graft 공중합 시킴으로서 긴축쇄에 활성 ester을 가지는 새로운 carrier을 합성하여 Bacillus thermoproteolyticus가 생산하는 중성 pretense인 thermolysin을 고정화시켰으며 아울러 고정화된 thermolysin의 몇가지 효소적 성질을 조사검토 하였다.(중략)
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2004.09a
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pp.252-257
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2004
본 연구에서는 인산염을 이용여 납으로 오염된 Clay 사격장과 인위적으로 오염시킨 자연토양의 중금속의 고정화 실험을 수행하였다. 인산염 고정화제로는 DAP (diammonium phosphate)를 사용하였다. DAP를 투입한 중금속 오염토양을 고정화 실험과 TCLP로 용출 하였을 때, 99% 정도 고정화되었다. 인산염 투여양이 증가할수록 고정화 효율은 증가하는 것으로 나타났으며, 최적 인투입량은 128 mmol as P/kg인 것으로 나타났다. DAP 투입양이 증가할수록 토양의 pH는 증가하는 것으로 나타났으며, 토양의 초기 pH 변화에 따라 고정화 효율은 크게 변하지 않은 것으로 나타났으나, pH가 높을수록 고정화 효율은 작은폭으로 증가하는 것으로 나타났다.
Feasibility of large-scale photobioreactors for biological CO$_2$ fixation was investigated using Chlorella sp. HA-1. Generally, as the volume of photobioreactor increased, the CO$_2$ fixation rate decreased because of a lower illumination efficiency in large-scale than in small-scale photobioreactors. Though controlling the arrangement and the number of light source, the maximum CO$_2$ fixation rates that could be achieved were 530 and 357 gCO$_2$/㎡day for 40 L and 188 L photobioreactor, respectively, which was higher than the CO$_2$ fixation rate of lab-scale photobioreactor.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.19
no.2
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pp.16-21
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2011
Immobilization of biosorbent is very important for application to real wastewater treatment process because biosorbent itself does not have enough tough structure. Therefore, resent research on heavy metal biosorption using biomass has been focused on its efficient immobilization method. To improve the mechanical strength of freely biosorbent, many immobilization methods have been suggested for applications to the biosorbent such as microorganisms or polysaccharides. In this study, various immobilization methods such as adsorption, covalent binding, entrapment, encapsulation, and crosslinking will be introduced.
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