The prevalence of Bacillus cereus was determined in salad and Kimbab obtained from commercial retailers. Among the 100 salad samples analyzed, 54 samples were negative for B. cereus, whereas the bacterial count was < 10 colony forming units (CFU)/g in 8 samples, < 100 CFU/g in 25 samples, < 1,000 CFU/g in 11 samples, and > 1,000 CFU/g in 2 samples. The mean (standard deviation) was 1.18 log CFU/g (${\pm}0.71$ log CFU/g). In Kimbab, B. cereus was isolated from 20 samples; the mean bacterial count was 1.01 log CFU/g (${\pm}0.71$ log CFU/g). On the basis of the monitoring data, a statistical sampling plan was determined with the NEW sampleplan program (ICMSF), which was used as an analytical tool. To identify the most suitable sampling plan, the microbial limits (m, M) and the maximum allowable number of sample units yielding unsatisfactory test results (c) were varied, but the number of samples units, n = 5, was fixed. Sampling plans showing an acceptable probability (Pa) over 0.95 were considered suitable. Two plans (A and B) were finally suggested. Parameters for plan A are n = 5, c = 0, m = 1,000, and M = 10,000 and for plan B are n = 5, c = 2, m = 100, and M = 1,000. Interestingly, the latter plan was identical to the microbial sampling plan used in New Zealand. Thus, it was concluded that the suggested plan can be used as a sampling plan that is in line with international standards.
Kim, Myo Jing;Lee, Hye Jin;Choi, Jung Mi;Jung, Soo Jin;Huh, Jae Won
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.49
no.7
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pp.745-750
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2006
Purpose : Enteroviruses are the most common cause of aseptic meningitis in patients of all ages. A definite diagnosis of enteroviral meningitis can be established by detection of virus directly in CSF specimens. But this is time-consuming and lacks sensitivity, so polymerase chain reaction(PCR) detecting of viral RNA in patient specimens such as CSF, stool has been demonstrated. But little is known about the influence of sampling time on the results of CSF PCR and stool PCR. We investigated diagnostic utility of PCR of CSF and stool according to sampling time after the onset of symptoms. Methods : PCR results were analyzed according to sampling time for 42 patients diagnosed aseptic meningits in our hospital from $11^{th}$ January to $30^{th}$ August, 2005. Results : The diagnostic yield of the test was higher of CSF specimens obtained ${\leq_-}2$ days after clinical onset(positive PCR results 9/18, 50 percent), compared with CSF collected >2 days after onset(positive PCR results 1/24, 4.2 percent)(P=0.001). Instead, positive PCR results of fecal specimens maintained highly(average 90.5 percent), 10 cases had also positive PCR results even 5-6 days after onset. 10 cases of CSF specimens had positive enterovirus PCR results containing coxsackievirus B5 (n=6), coxsackievirus B3(n=3). 38 cases of stool specimens had positive enterovirus PCR results containing echovirus 18(n=7), echovirus 9(n=3), coxsackievirus B5(n=8), coxsackievirus B3(n=3). 6 cases(coxackie B5) had positive CSF PCR and stool PCR, both. Conclusion : Stool PCR was clinically sensitive for detecting enterovirus during enteroviral meningits and could give a presumptive diagnosis throughout the disease course. A definite diagnosis was obtained by CSF PCR, but its utility was clearly lower for samples obtained >2 days after clinical onset. Therefore, it is recommended that, in addition to performance of CSF PCR, fecal samples obtained from patients with suspected enteroviral meningitis should be tested by PCR, especially when the duration of symptoms is >2 days.
Purpose : The aim of this study was to identify mutations associated with macrolide resistance in Mycoplasma pneumoniae (MP) and to establish a cultural method to determine antimicrobial susceptibility. Methods : Nasopharyngeal aspirates (NPAs) were collected from 62 children diagnosed with MP pneumonia by a serologic method or polymerase chain reaction. The 23S rRNA and L4 ribosomal protein genes of MP were amplified and sequenced. To identify mutations in these 2 genes, their nucleotide sequences were compared to those of the reference strain M129. MP cultivation was carried out for 32 (28 frozen and 5 refrigerated) NPAs and M129 strain using Chanock's glucose broth and agar plate in a 5% $CO_2$ incubator at $37^{\circ}C$ and examined at 2-3 day intervals for 6 weeks. Results : Among the 62 specimens, 17 had M144V mutations in ribosomal protein L4. The A2064G mutation was observed in 1 specimen; its 23S rRNA gene was successfully sequenced. Culture for MP was successful from the M129 strain and 2 of the 5 NPAs that were refrigerated for no longer than 3 days. However, MP did not grow from the 28 NPAs that were kept frozen at $-80^{\circ}C$ since 2003. Conclusion : We found the M144V mutation of L4 protein to be common and that of domain V of 23S rRNA gene was relatively rare among MP. Studies on the prevalence of macrolide-resistant MP and the relationship between the mutations of 23S rRNA gene and ribosomal protein L4 will aid in understanding the mechanism of macrolide resistance in MP.
Yang, Byoung Seon;Choi, Se Mook;Bae, Hyung Joon;Kim, Yoon Sik;Lim, Yong;Kang, Hee Jung;Bae, Do Hee;Choi, Byoung Ho;Lee, Jae Suk;Park, Ji Ae
Korean Journal of Clinical Laboratory Science
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v.54
no.1
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pp.49-60
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2022
This study attempted to provide the basic data for developing a system to identify the role of medical technologists and ensure an efficient response for quick and accurate diagnostic tests in the COVID-19 era. The research method involved using focus group interviews for a survey and analysis of 15 medical institutions. Eleven sample collection institutions, 10.4 medical technologists, 2.1 minutes of collection time, 5.4 hours of test time, 9,670 tests, 6.2 member test workforce size, and 7 screening center operating institutions were surveyed. The results of the focus group interview analysis revealed that there were no standardized guidelines covering working hours, area, and environment to protect sample collectors and testers in relation to the COVID-19 tests. Also, legal protection measures were insufficient in the event of accidental infections and there were no personnel regulations related to COVID-19. In addition, the professional training of sample collectors and molecular diagnostic testers was required for reliable COVID-19 testing. In conclusion, it is necessary to provide professional education through special test short-term training institutions to cope with emergency infectious diseases such as COVID-19. Legal systems should be put in place to protect the workforce and ensure stability.
Journal of Korean Academy of Fundamentals of Nursing
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v.2
no.2
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pp.131-137
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1995
Improving validity and reliability is the important components of clinical laboratory tests. And the quality control of the test should be started with the accurate collection of specimen. Urinalysis is one of the useful and common tests in diseases diagnosis and determining the process of medical treatment. Since urinalysis is requested routinely in hospital setting, the importance of the quality control for urine specimen is often ignored. To improve the validity of urinalysis, a clinical trial was done on the method of collecting urine specimen. The result was as follows : 1. The rate of presumtive UTI(urinary tract infection) was decreased in 21.6% with experiment method for collecting urine specimen. 2. The rate of presumtive UTI in female patients was decreased in 43.2% with the experiment method. 3. The rate of negative urine culture was decreased in 6.6% with the experiment method.
The most important progress in diagnostic sciences is the increased sensitivity and specificity in diagnostic procedures due to the development of micromethodologies and increasing availability of immunological and molecular biological reagents. The technological advances led to consider the diagnostic use of saliva for an array of analytes and DNA source. The purpose of the present study was to compare DNA from saliva with those from blood and buccal swab, to evaluate diagnostic and forensic application of saliva, to investigate the changes of genomic DNA in saliva according to the storage temperature and period of saliva samples, and to evaluate the integrity of the DNA from saliva stored under various storage conditions by PCR analysis. Peripheral venous blood, unstimulated whole saliva, stimulated whole saliva, and buccal swab were obtained from healthy 10 subjects (mean age: $29.9{\pm}9.8$ years) and genomic DNA was extracted using commercial kit. For the study of effects of various storage conditions on genomic DNA from saliva, stimulated whole saliva were obtained from healthy 20 subjects (mean age: $32.3{\pm}6.6$ years). After making aliquots from fresh saliva, they were stored at room temperature, $4^{\circ}C$, $-20^{\circ}C$, and $-70^{\circ}C$. Saliva samples after lyophilization and dry-out procedure were stored at room temperature. After 1, 3, and 5 months, the same experiment was performed to investigate the changes in genomic DNA in saliva samples. In case of saliva aliquots stored at room temperature and dry-out samples, the results in 2 weeks were also included. Integrity of DNA from saliva stored under various storage conditions was also evaluated by PCR amplification analysis of $\beta$-globin gene fragments (989-bp). The results were as follows: 1. Concentration of genomic DNA extracted from saliva was lower than that from blood (p<0.05), but there were no significant differences among various types of saliva samples. Purities of genomic DNA extracted from stimulated whole saliva and lyophilized one were significantly higher than that from blood (p<0.05). Purity of genomic DNA extracted from buccal swab was lower than those from various types of saliva samples (p<0.05). 2. Concentration of genomic DNA from saliva stored at room temperature showed gradual reduction after 1 month, and decreased significantly in 3 and 5 months (p<0.05, p<0.01, respectively). Purities of DNA from saliva stored for 3 and 5 months showed significant differences with those of fresh saliva and stored saliva for 1 month (p<0.05). 3. In the case of saliva stored at $4^{\circ}C$ and $-20^{\circ}C$, there were no significant changes of concentration of genomic DNA in 3 months. Concentration of DNA decreased significantly in 5 months (p<0.05). 4. There were no significant differences of concentration of genomic DNA from saliva stored at $-70^{\circ}C$ and from lyophilized one according to storage period. Concentration of DNA showed decreasing tendency in 5 months. 5. Concentration of genomic DNA immediately extracted from saliva dried on Petri dish were 60% compared with that of fresh saliva. Concentration of DNA from saliva stored at room temperature after dry-out showed rapid reduction within 2 weeks (p<0.05). 6. Amplification of $\beta$-globin gene using PCR was successful in all lyophilized saliva stored for 5 months. At the time of 1 month, $\beta$-globin gene was successfully amplified in all saliva samples stored at $-20^{\circ}C$ and $-70^{\circ}C$, and in some saliva samples stored at $4^{\circ}C$. $\beta$-globin gene was failed to amplify in saliva stored at room temperature and dry-out saliva.
Purpose:The aim of this study was to determine the prevalence of asymptomatic nasopharyngeal carriages in children using a multiplex reverse transcriptase-polymerase chain reaction (mRT-PCR) assay kit. Methods:We obtained nasopharyngeal swabs from 33 children without any underlying disease from July 25 to July 28, 2008. The children were free from the signs of respiratory tract infections at the time of sampling. DNA was extracted from the swabs and subjected to multiplex RT-PCR using a primer set for the detection of pneumococci ($Seeplex^{(R)}$ PneumoBacter ACE Detection Seegene, Seoul, Korea). The amplified PCR products were separated on 2% agarose gels and stained with either ethidium bromide or screen tape system (Lab901 Scotland, UK). Results:A total of 33 children (male, 15 female, 18) aged between 3.2 and 16.3 (median, 8.2) years were included in this study. The mRT-PCR detected colonized bacteria (Streptococcus pneumoniae, Hemophilus influenzae, Chlamydia pneumoniae, and Bordetella pertussis) in 30 children (90.9%). Of these, 13 children (39.4%) showed more than 2 bacteria: 12 children were positive for 2 bacteria (S. pneumoniae and H. influenzae) and 1 child was positive for 3 bacteria (S. pneumoniae, H. influenzae, and C. pneumoniae). Conclusion:mRT-PCR was found to be a sensitive tool for the detection of asymptomatic nasopharyngeal carriages. Clinical significances of the bacteria detected by mRT-PCR will have to be evaluated in the future.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.50
no.1
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pp.1-12
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2023
Function of salivary gland and saliva composition can be an indicator of individual's health status. Recently, saliva has been thought to have a high potential for usage in the biomedical field to diagnose, evaluate, and prevent systemic health due to the technological advances in analyzing and detecting small elements such as immunological and metabolic products, viruses, microorganisms, hormones in saliva. As a diagnostic specimen, saliva has some useful advantages compared to serum. Because of simple non-invasive method, saliva sampling is quite comfort for the patient, and it doesn't require specialists to collect samples. The possibility of infection during the collection process is also low. For this reason, proteins, genetic materials, and various biomarkers in saliva are actively being utilized on studying stress, microbiomics, genetics, and epigenetics. For the research on collecting big data related to systemic health, the needs on biobank has been focused. Regeneration of salivary gland based on tissue engineering has been also on advancement. However, there are still many issues to be solved, such as the standardization of sample collection, storage, and usage. This review focuses on the recent trends in the field of saliva research and highlight the future perspectives in biomedical and other applications.
In this study, to analyze the detection of limit for sensitivity of the influenza rapid antigen test kit, the positive detection of limits were analyzed by serial dilution of influenza virus A and B type for five influenza rapid antigen test kits in Korea. As a result of analysis, visual measurement of type A were up to 1:8192 for the Wellsbio product and up to 1:4096 for the II product, up to 1:512 for the I and III products, and only 1:128 for the IV product, and type B were positive for up to 1:8192 for the Wellsbio product, up to 1: 4096 for the II product and up to 1:1024 for the I, III and IV products. For instrument readings with the same specimen, both A and B types were found to be positive for up to 1:8192 for the Wellsbio product, up to 1: 4096 for the II product, and up to 1:2048 for the I product. The sensitivity of the rapid antigen test for influenza differs greatly depending on the sampling area of the patient, infection period, specimen volume, etc. Therefore, it is necessary to observe exactly the collection timing and method of the specimen. And it is necessary further study to improve the sensitivity for influenza rapid antigen test.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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