The mutagenicity and desmutagenicity on enzymatic browning reaction products which obtained from prunes salicina (yellow) enzyme and polyphenol compounds were carried out. In the rec-assay on Bacillus subtilis strains H17 and M45, the enzymatic browning reaction products of pyrogallol, hydroxyhydroquinone, 3,4-dihydroxytoluene and catechol of $10^{-2}M$ did not showed mutagenicity. In the effects of various metal ions on the rec-assay, the enzymatic browning reaction products of pyrogallol showed mutagenic activity by $Fe^{3+},\;Mn^{2+},\;Zn^{2+},\;Ni^{2+}$ and $Al^{3+}$. In the enzymatic browning reaction products of hydroxyhydroquinone, $Cu^{2+},\;Mn^{2+}$ and $Pb^{2+}$ were effected in mutagenic action and the enzymatic browning reaction products of catechol was effected in mutagenic action by $Mn^{2+}$. In the DNA-breaking action of enzymatic browning reaction products of pyrogallol, hydroxyhydroquinone, 3,4-dihyroxytoluene and catechol did not show, DNA-breaking action. In the effects of various metal ions on the DNA-breaking action of enzymatic browning reaction products, $Cu^{2+}$ showed DNA-breaking action. In the mutagenicity test on Sal. typhimurium strains TA98 and TA 100 with S-9 mix, 4 kinds of browned substances did sot shove muragenicity, all the browned substances showed strong desmutagenic activity in the presence of benzo $({\alpha})-pyrene$ with S-9 mix.
Effects of poly-${\gamma}$-glutamate (PGA) on antioxidative characteristics of amino-carbonyl reaction products of glucose were investigated. Rapid browning reaction was observed under heat and alkaline condition (pH 8.2). Browning products were separated by Sephadex G-50, and brown color intensity and electron-donating ability of DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) of each fraction were measured. Fraction-7 (F-7) and -20 (F-20) showed high DPPH scavenging values. UV-VIS absorption spectrum of F-20 was similar to melanoidin peak, and F-7 showed maximum absorption peak at 270 nm. Molecular weight of F-7 was over 35 kDa as determined by SDS-PAGE. Although F-20 could not be measured on SDS-PAGE, its size was smaller than F-7.
The rec-assay on Bacillus subtilis strains H17$({Rec}^+)$ and M45$({Rec}^-)$, the Ames test with modification of preincubation on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 and DNA-breaking test on double strand calfthymus DNA were carried out using enzymatically browned substances obtained from the reaction of Prunus salicina (Red) enzyme and polyphenols. The spore rec-assay of enzymatic browning reaction products of pyrogallol, hydroxyhydroquinone. 3,4-dihydrohyoluene and chlorogenic acid showed non-mutagenic activity The spore rec-assay showed a little influence of ${Zn}^{2+}$ and ${Ni}^{2+}$ on the action of four kinds of enzymatic browning reaction products. The enzymatic browning reaction products of polyphenols did not show DNAbreaking activity. ${Cu}^{2+}$ of various metal ions influenced on DNA-breaking of enzymatic browning reaction products of pyrogallol. However, enzymatic browning reaction products of chlorogenic acid inhibited on DNA-breaking activity. Four kinds of enzymatic browning reaction products showed non-mutagenic activity on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 with S-9 mix. In the mutagenicity on Salmonella typhimurium TA98 and TA100 with S-9 mix in the presence of benzo$({\alpha})$pyrene which is the carcinogenic substances, four kinds of enzymatic browning reaction products showed desmutagenic activity.
Properties of the antioxidative fraction isolated from browning reaction product (BRP) that were obtained from 2 M L-ascorbic acid (AsA) solution (adjusted to pH 7.0) by heating for 25 hrs at $85^{\circ}C$ were investigated. Both of dialyzable and nondialyzable fraction isolated from BRP showed antioxidative effect. Dialyzable fraction has stronger antioxidative activity than nondialyzable. Dialyzable fraction was divided into the three fractions (A, B, C) by gel filtration. Among these fractions, the fraction (A) that had the highest reducing power and lowest browning drgree had lowest antioxidative activity. The fraction (C) that had lowest reducing power and highest browning degree showed strongest antioxidative effect. In the UV-visible spectrum of these fractions, the maximum absorption wavelengths of fraction A and B were 266.1 and 257.4nm, respectively, and fraction C showed a weaker absorption peak at 274.8nm. Infrared (IR) spectrum results showed that all fractions (A, B, C) had both hydroxy and carboxylic groups, and fraction B and C had carboxylic ester group.
A bacterial strain CJ-3 which produced chitinase was isolated from Korean traditional soy sauce. Using 16S rDNA analysis, the strain CJ-3 was identified as Bacillus atrophaeus. The approximate molecular weight of the putative chitinase enzyme was 31.0 kDa and the enzyme activity was remarkably induced by addition of colloidal chitin (0.5, 1.0, 2.0%). The antioxidant activity was increased 53% by the browning reaction products of B. atrophneus CJ-3. Escherichia. coli lipopolysaccharides (LPS)-induced production of nitric oxide(NO) was reduced up to 45% by the browning reaction product in RAW264.7 macrophage. Inhibition of cell viability in the presence of LPS was recovered to normal level by the browning reaction product. These results suggest that browning reaction of B. atrophaeus CJ-3 plays an important role for activation of immune system. B. atrophaeus CJ-3 exhibited optimum temperature and pH of 37$^{\circ}C$ and pH 7.0∼8.0, respectively. The major intracelluar free amino acid was determined to be glutamate.
Proceedings of the Korean Society of Postharvest Science and Technology of Agricultural Products Conference
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1993.12a
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pp.19-20
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1993
농산물의 수확 후 취급이나 가공중에 일어나는 효소적갈변 현상은 외관의 변색에 의한 소비자의 기호성을 저하시킬 뿐만 아니라 상품의 가치를 하락시키며, 경제적인 손실을 초래함으로서 현재 식품에 종사하는 기술자나 가공업자에게 가장 관심이 있는 분야이다. 효소적갈변의 주역을 담당하고 있는 polyphenol oxidase(PPO)(EC1.14, 18.1)은 대부분의 식품에 존재하고 있으며 monophenol의 hydroxylation에 의한 o-diphenol화합물의 형성반응(cresolase)과 o-diphenol화합물의 o-quinone으로의 산화반응(catecholase)을 촉배한다. 그리고 여기서 일단 생성된 o-quinone은 다시 다른 o-quinone이나 그밖의 단백질, 아미노산, 환원당 등의 여러 성분들과 상호 반응하여 갈변식품의 특유의 색소인 melanine을 형성한다. 효소적갈변에 의한 품질의 저하는 식품가공산업에서 해결되어야 할 하나의 큰 과제이다. 현재까지 식품산업에서 가장 널리 쓰이고 있는 효소적갈변 저해제는 sylfite류 이다. 그들은 새우의melanosis(blackspot)를 억제하며, 감자, 버섯, 사과와 다른 과채류의 갈변을 방지할 뿐 아니라 쥬우스와 포도주의 off flavors를 일으키는 폴리페놀 플리머의 형성을 감소 시킨다. 그러나 최근 sulfite가 사람의 건강에 좋지않는 부작용을 일으키며, 특히 천식을(asthma)을 지니고 있는 사람이 sulfite가 함유된 식품을 먹었을 경우 사망을 초래할 수 있어 식품첨가물로서 그들의 사용이 미국 FDA에 의해 재평가되고 있다. 최근에 FDA는 셀러드바에서의 sulfite사용을 금지 시켰으며 점차 감자가공품에의 사용을 금지하는 방향으로 나아가고 있다. 따라서 현재 실질적이고 기능적인 sulfite의 대체 화합물의 개발이 절실히 필요한 실정이다. 이러한 배경으로 본 강연에서는 효소적갈변 저해제의 개발과 그들의 식품가공에의 적용 현환 및 화장품, 의약품으로의 응용에 대해 설명하고자 한다.
For industrial application to manufacturing functional foods for health using browned oak mushroom, we examined its reducing power, inhibitory effect on intracellular reactive oxygen species, phenolic compounds and phytates contents, modulatory effects on NO radical and matrix metalloproteinase 9 (MMP9) generation by activated macrophages, and antimutagenicity in order to evaluate the functionality of browned oak mushroom for health. While overall ethanolic extracts have higher reducing power than aqueous extracts, browning reaction was found to increase reducing power by up to 28% at a 3.32 mg/ml sample concentration. Browning reaction also increased phenolic compound content by about 73% compared to raw mushroom. However, any significant change in phytate content could not be detected. At a concentration of $100\;{\mu}g/ml$, treatment of ethanolic extract of oak mushroom increased NO generation over 43% in LPS-stimulated macrophage. On the contrary, the aqueous extracts rather decreased it over 17% at the same sample dose. However, any solvent extract from browned oak mushroom seems not to cause any change in both NO production and MMP9 activity. In addition, browning reaction did not allow any significant change in suppressive effect on mitomycin C-induced mutagenesis as examined with SOS chromotest. These results suggest a possible use of browned oak mushroom with unmarketable quality as a material for development of a variety of processed functional foods for health.
To re-evaluate the browning reactions of fermented soybean products, soy sauce mash with added glucose and/or tyrosine was fermented for 152 days in the presence or absence of oxygen. Glucose negatively affected brown pigmentation either singly or with tyrosine. Tyrosine-added soy sauce mash initially browned at the same rate as the control mash until 127th day and then the former continued to brown at the same steady rate while the control mash stopped further browning. Aerobically incubated mash browned much more than anaerobically incubated one when the browning was compared on the 152nd day of fermentation. More than half of the mash browning was found to be due to the oxygen-related browning during the limited 152 days of fermentation time. Both oxygen-related and oxygen-unrelated browning reactions were found to contribute to the browning of soy sauce mash. Oxygen-related browning, however, was found to be more important than the Maillard browning reaction.
To estimate the effect of preventing the Maillard reaction between casein and glucose coated by freeze drying with corn starch slurry or mixture slurry of corn starch and sucrose, the reactants were treated into five groups of nonbrowning material(control), uncoated browning material, browning material coated casein alone with starch slurry, browning material coated both of reactants with starch slurry and browning material coated both of reactants with mixtrue slurry. All samples had a moisture content of about 15%. Browning reaction was carried out by storage for 30 days at $37^{\circ}C$, 67% RH. In vitro available lysine contents were decreased by the browning regardless of coating the reactants and were higher about 20.5% in the browning materials coated with mixture slurry than in the uncoated browning materials. Fructosyl-lysine contents were increased about tenfold by the browning regardless of coating and were decreased about 15.8% in the browning materials coated with mixture slurry as compare with the uncoated browning materials. The materials showing the greatest resistance to the browning reaction in the coated materials were those in which both of reactants were coated with the mixture slurry of corn starch and sucrose.
The effect of sugar addition and heat treatment on the myofibrillar protein extractability was studied. Maillard reaction was dependent on heating time significantly and glucose revealed the highest reactivity for Maillard reaction. The extractability of myofibrillar proteins was lowest in case of glucose addition and decreased according to increasing of heating time, Higher extractability was resulted in by digestion of myofibrillar proteins with enzymes after sugar addition and heat treatment than the undigested samples, as the sample was digested with trypsin that is the highest. And by digestion with trypsin, chymotrypsin and peptidase at a time the extractability of meat proteins increased remarkably.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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