These experiments were carried out to clarify the effects various kinds of cryoprotectants which were frequently used in freezing embryos of domestic animals on the survival of frozen-thawed mouse embryos. As cryoprotectant, glycerol, DMSO and methanol were used and the procedures of adding them in medium were practiced by one-step or six-step adding method. Morphologically normal mouse embryos developed to blastocyst by in vitro culture after freezing and thawing were transferred to pseudopregnant recipients by surgical procedures. The results obtained in these experiments were summarized as follows: 1. The survival rates of the frozen-thawed 8-cell embryos, morulas and blastocysts following one-step addition of glycerol were 83.6, 80.3 adn 70.3%, respectively, while following six-step addition of glycerol, 69.2, 56.3 and 66.7% respectively. 2. When glycerol, DMSO and methanol were used as cryoprotectant under the same condition of freezing and thawing, the survival rates of frozen-thawed embryos were 74.0, 76.1 and 37.6%, respectively. 3. The implantation rate of embryos transferred to pseudopregnant recipients after freezing and thawing was 49.2%.
This study was carried out to investigate the survival rate of in vitro culture after frozenthawed, to used DMSO(dimethyl sulfoxide), glycerol and ethylene glycol of cryorpotective agents at the zona pellucida removed and intact on the morulae and blastocysts. The results obtained from this study were as follows : 1. The survival rate of in vitro culture after frozen-thawed to used cryoprotective agents of three kinds at the morulae was 86.0%, 87.1% and 83.3%, total or mean were 85.5%, respectively. 2. The survival rate of in vitro culture after frozen-thawed to used cryoprotective agents of three kinds at the zona pellucida removed morulae was 53.2%, 42.3% and 37.5%, total or mean were 44.3%, respectively. 3. The survival rate of in vitro cultrue after frozen-thawed to used cryoprotective agents of three kinds at the blastocysts was 89.4%, 86.2%, total or mean were 86.7%, respectively. 4. The survival rate of in vitro culture after frozen-thawed to used cryoprotective agents of three kinds at the zona pellucida removed blastocysts was 55.8%, 51.6% and 40.6%, total or mean were 49.3%, respectively.
The aim of this study was to investigate the effects of the addition of red wine of pork patties during frozen storage on their water holding capacity, thawing loss, cooking loss, diameter change, thickness change, surface color, pH, VBN (volatile basic nitrogen) and TBARS (2-thiobarbituric acid reactive substances). Four types of pork patty were prepared; pork patty without red wine (control), and with the addition of 1%, 3% and 5% red wine (RWP-1, 3 -and t respectively). The pork patties were stored for 5 months at $-20^{\circ}C$. The water holding capacity was significantly decreased during frozen storage, which was not influenced by the addition of red wine (p<0.05). The thawing loss and cooking loss were significantly increased during frozen storage, which also was not influenced by the addition of red wine (p<0.05). There were no significant differences in the diameter and thickness changes during frozen storage, which was not influenced by the addition of red wine (p<0.05). There were no significant differences in the $L^*\;and\;b^*$ values, but the a value was significantly decreased during frozen storage. The $L^*,\;a^*\;and\;b^*$ values of the pork patties containing red wine were lower than those of the control patties (p<0.05). There were no significant differences in the pH and VBN content during the frozen storage period or on the addition of red wine to the patties. The TBARS value of the pork patties tended to increased with increasing in frozen storage period, but were decreased with increasing amount of red wine addition (p<0.05).
최근 오일샌드와 같은 비전통에너지 개발이 활발히 이루어지고 있는 동토 지역은 지반의 유기물 함유량이 높아 일반적인 지반과 다른 열적·역학적 특성을 지니고 있다. 본 논문에서는 캐나다 앨버타주와 국내 강원도에서 채취한 동토 시료를 대상으로 다양한 실내시험을 통해 유기물 함유량이 토양의 열적 및 역학적 거동에 미치는 영향을 평가하였다. 유기물 함유량이 증가할수록 다짐시험에서 최대 건조단위중량은 감소하고 최적 함수비는 증가하는 경향이 나타났다. 동결 일축 압축시험에서는 동결온도가 낮아질수록 시료의 강도가 증가했으나, 모든 시료는 동결 조건에서 얼음 및 부동수분의 양에 따라 복잡한 거동을 보여 유기물 함유량이 강도에 큰 영향을 미치지 않았다. 열전도도 측정시험에서는 동결 조건에서 비동결 조건보다 열전도도가 더 크게 측정되었고, 이는 물보다 얼음의 열전도도가 더 크기 때문으로 판단된다. 또한, 유기물 함유량이 증가할수록 부동 수분량도 증가하는 경향이 나타났다. 이러한 결과는 극한지 건설 프로젝트에서 지반 공학적 설계 및 시공에 중요한 엔지니어링 기초 자료로 활용할 수 있을 것이다.
정어리냉동스테이크의 가공조건을 구명하고 아울러 대두단백질과 옥수수녹말의 첨가가 정어리스테이크의 품질안전성에 미치는 영향을 검토하였다. 정어리스테이크를 가공하기 위해서는 정어리육에 대해 탄산수소나트륨 0.5%, 식염 1.5%, 축합인산염 0.2%, 설탕 2%, 글루탐산나트륨 0.2%, 향신료로서는 후추가루, 마늘가루 및 nutmeg을 각각 0.2%씩 첨가하여 고기갈이를 한 다음 $-3{\sim}-5^{\circ}C$에서 36시간 저장하여 텍스쳐를 개선시킨 후 동결저장하는 것이 가장 좋았다. 그리고 대두단백질을 3 %첨가한 제품이 유리드립, 가압드립, 색조변화, 단백질변성 지방산패억제 및 텍스쳐 개선효과 면에서 가장 우수했으며 관능검사결과 정어리스테이크는 동결저장 90일동안 품질이 안전하게 유지됨을 알 수 있었다.
식육을 장기저장 할 때 발생되는 단백질의 변성과 해동시 육량감소를 줄이기 위한 방법의 하나로써 최적동결방법을 모색하고자 동결속도에 따른 저장중 닭고기의 물리화학적 변화를 조사한 결과 동결속도가 빠를수록 pH증가가 지연되어 장기보존의 가능성을 보였다. TBA가 및 유리지방산 생성율은 저장기간이 길어짐에 따라 증가하는 추세를 보이고 있으나 부위육의 종류에 따라 동결속도의 영향이 다르게 나타나고 있다. 그러나 단백질추출성을 비교할 때 염용성단백질과 수용성단백질의 추출성은 부위육의 종류에 관계없이 3cm/hr이상의 동결속도에서 저장기간 중 추출성이 가장 높게 나타났으며, 이러한 경향은 다리살 보다 가슴살의 추출성이 더욱 높게 유지되고 있다. 이상의 결과에서 송풍동결기를 이용하여 닭고기를 동결시킬 경우 3cm/hr이상의 동결속도로 동결시켜 냉동저장 할 때 좋은 품질의 냉동육을 얻을 수 있는 것으로 판단되었다.
As a fundamental study to increase the reproductive efficiency in cattle, highly motile sperm were separated and collected from raw semen, extended semen and frozen semen by different methods using various concentrations of bovine serum albumin or Tyrode's solution. Various characteristics and light microscopic and electron-microscopic morphology of sperm separated by different methods were compared. The results obtained were as follows; 1. The sperm separated from raw semen using bovine serum albumin showed significantly high value in motility, motile sperm count, percent of normal sperm and progressive motility, as compared with control sperm and revealed the highest sperm recovery rate when separated with 6% bovine serum albumin. 2. The sperm motility, percent of normal sperm and progressive motility of the highly motile sperm frozen after being separated from raw semen with bovine serum albumin, showed significantly high value than those of a control sperm and especially found the highest value when separated with 20% bovine serum albumin. 3. Light-microscopic percent of abnormality was significantly low in the prefrozen and postfrozen highly motile sperm separated with bovine serum albumin, as compared with control sperm. 4. Electron-microscopic finding of the highly motile sperm separated with bovine serum albumin showed low percent of deformity in the dilatation and vesiculation of cell membrane, in dilatation and density loss of acrosome than in those of control sperm. 5. It was impossible to separate the highly motile sperm from frozen semen with bovine serum albumin, but it was possible with Tyrode's solution. 6. Recovery rate of highly motile sperm from raw semen extended semen and frozen semen was the highest when the sperm pellet stood in Tyrde's solution for 80 minutes. 7. The highly motile sperm separated from raw semen, extended semen and frozen semen with Tyrode's solution showed significantly high value in motility, progressive motility and percent of normal sperm, as compared with control sperm. 8. Highly motile sperm, when separated from raw semen, extended semen and frozen semen with Tyrode's solution, showed significantly low percent of microscopic abnormality as compared with control sperm.
This study was carried out to investigate the factors affecting fertilization in vitro of follicular oocytes with frozen-thawed spermatozoa in Korean Native Cattle. The bovine ovaries were obtained at a slaughter house and the follicular oocytes were recovered by aspirating the follicular fluid from the visible follicles of 3~6mm. The bovine oocytes were matured in vitro for 20~24 hours in TCM-199 containing FCS and hormones. The matured oocytes were fertilized in vitro using Percoll-separated frozen-thawed spermatozoa in BO solution. The effects of dilution and fertilization media, capacitating method, concentration of inseminated sperm and time after insemination of fertilization, were observed. The results obtained are summarized as follows : 1. The fertilization rate of frozen-thawed sperm inseminated in BO solution with caffeine and heparin together(56.4%) was higher than that of sperm inseminated in BO solution with either caffeine(10.5%) or heparin(8.9%) and without both caffeine and heparin(0%)(P<0.05). 2. The fertilization rate(56.3%) of frozen-thawed sperm inseminated in BO solution with both caffeine and heparin without preincubation was higher than that of sperm preincubated(2.9%)(P<0.05). 3. The fertilization with high concentration of frozen-thawed sperm(1.4~1.8$\times$107cells/ml) in BO solution containing caffeine and heparin resulted in higher fertilization rate, 76.7%, than the low concentration of sperm(0.8~1.0$\times$107cells/ml), 32.7%(P<0.01). 4. When the oocytes were inseminated with frozen-thawed sperm in BO solution containing caffeine and heparin without preincubation, fertilization rate increased by time and the rates were 5.9, 46.0 and 59.4% at 8, 16 and 24 hours, respectively.
This Study was carried out ot investigate the effects of concentration and equilibration time of cryoprotective aagents on survival rate of slowly and ultrarapidly frozen porcine embryos. The porcine embryos following dehydration by cryoprotective agents and 0.25M sucrose were slowly freezed(from 2$0^{\circ}C$ to -7$^{\circ}C$/-1$^{\circ}C$/min., from -7$^{\circ}C$ to -35$^{\circ}C$/-0.2$^{\circ}C$/min., from -35$^{\circ}C$ to -38$^{\circ}C$/-0.3$^{\circ}C$/min.) by Cell Freezer and directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 38$^{\circ}C$ water bath. Survival rate was defined as development rate to the morula and blastocyst stage after in vitro culture or by FDA test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of porcine embryos after slow frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 80.6, 84.7, 75.0 or 78.8%, respectively. 2. The survival rates of porcine embryos after slow frozen-thawing in the freezing medium of 0.50M sucrose added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 80.9, 82.4, 73.1 or 77.1%, respectively. 3. The survival rates of porcine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucroese added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 65.3, 68.6, 63.2 or 59.9%, respectively. 4. The survival rates of porcine embryos after ultrapid frozen-thawing in the freezing medium of 0.50M sucrose added 2.0M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0 propanediol or 2.0M glycerol+2.0M propanediol was 67.5, 62.9, 56.9, or 62.8%, respectively. 5. The higher survival rate of porcine embryos was attained at the short period ofequilibration time(5min.) in the freezing medium added 0.25M sucrose and 3.0 DMSO compared to those of 10 or 20min. equilibration time in the same condition.
Sixty Four fresh and 142 frozen embryos of dairy cattle were transferred to synchronized dairy, beef or Korean Native Cattle nonsurgically at National Animal Breeding Institute from 1985 to 1990. The results obtained were as follows ; 1. The pregnancy rate of fresh embryos(39.1%) was higher than that of frozen embryos(32.4%) and average pregnancy rate was 34.5%. 2. The pregnancy rate of grade 1 embryos was higher than that of grade 2 embryos for both fresh(41.3% vs 33.3%) and frozen embryos(35.4% vs 25.6%). 3. The pregnancy rate according to development stage of fresh embryos was increased with maturity as 29.2%, 33.3%, 50.0% and 54.5% for morula, early blastocyst, blastocyst and expanded blastocyst, respectively. For frozen embryos, the pregnancy rate of blastocyst(44.4%) was higher than those of morula(31.3%) and early blastocyst(28.0%). 4. The pregnancy rate according go recipient-donor synchrony for fresh embryos was higher when the recipients exhibited estrus 1 day earlier than the donors(43.8%) than when the recipients exhibited estrus 1 day later than the donors(38.1%) or when the recipients and donors exhibited estrus at the same time(37.0%). For forzen embryos, the pregnancy rate was decreased when the recipients and donors exhibited estrus at the same time(37.9%), when the recipients exhibited estrus 1 day later than the donors(32.0%) and when the recipients exhibited estrus 1 day earlier than the donors(23.5%), in sequence. 5. The pregnancy rate of heifers was higher than that of cows for both fresh(50.5% vs 37.9%) and frozen embryos(39.7% vs 25.7%). 6. The pregnancy rate according to recipient breed for fresh embryos was higher in dairy cattle(42.1%) and beef cattle(40.%) than in Korean Native Cattle(33.3%). For frozen embryos, the pregnancy rate was decreased beef cattle(39.1%), dairy cattle(30.3%) and Korean Native Cattle(14.3%), in sequence. 7. The pregnancy rate according to equilibrium steps of glycerol and freezing rate was higher when transferred after 3-steps equilibrium and freezing by the rate of $0.3^{\circ}C$/min from $-6^{\circ}C$ to $-35^{\circ}C$ and $0.1^{\circ}C$/min to $-38^{\circ}C$(39.4%) than when transferred after 6-steps equilibrium and freezing by the rate of $0.5^{\circ}C/min$ from $-6^{\circ}C$ to $-30^{\circ}C$(30.3%).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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