A bacterial strain No. 43 was isolated from soil samples as a levan-assimiating microorganism producing an extracellular levanase and hydrolying levan to levanbiose. According to the taxonomic characteristics of its morphological and physiological properties, the strain was idenified as Pseudomonas sp. No. 43. The optimum culura medium was composed of 10g levan, 5g(NH4)2SO4, 3g NH4Cl, 3g polypepton, 1g K2HPO4, 0.5gMgSO4.7H2O, and 0.2g MnCl2.4H2O per liter. The cultivation for levanase was carried out in pH 7.0 at 4$0^{\circ}C$ for 28hr. The reaction product was a kind of oligosaccharide and it was purified by chilled ethanol precipitation and gel filtration for evalluation of degree of polymerization (DP). The purified product was determined as levanbiose of MW 342 and DP2 by HPLC and FAB-MS.
RI 폐기물 내에 있는 낮은 방사능의 요오드의 함량을 결정하기 위해 산분해법과 BPGe 감마 선분광계를 이용하는 방법이 개발되었다. 분석에 앞서 모의시료인 제염지 내에 $^{131}I$이 일정량 첨가되었으며, 100 mL의 0.4 N $K_2Cr_2O_7$와 100 mL의 9 M $H_2SO_4$, 10 mL의 30% $H_3PO_3$, 1 mL의 $H_2O_2$를 넣고 산분해과정을 거치면서 증류된 용액을 응축하여 포집하였다. $CCl_4$의 용매추출에 의한 화학 분리과정을 거친 후 $AgNO_3$를 첨가해서 얻은 AgI 침전물을 여과하고 건조하여 측정하였다. 산분해 과정, 화학 분리과정, 여과 및 침전과정 등 세 단계로 나눠 회수율을 측정한 결과, 각각 94% 이상의 회수율을 나타냈으며, 본 연구의 측정조건에서 최소검출방사능은 0.6 Bq/g이었다.
목 적 : Escherichia coli (E. coli) O157은 설사, 출혈성대장염 등을 일으키며, 드물게 용혈성 요독증후군까지 일으키는 세균이다. 미국이나 유럽에서는 세균성설사의 2~3번째로 흔한 원인균이다. 우리나라는 이 세균감염이 거의 없는것으로 알려져 왔으나, 우리나라도 점차 햄버거와 같은 간이음식의 섭취가 늘어나, 이 세균감염이 생겼을 가능성이 있을 것으로 사료되어, 향후 이 세균에 대한 통상적인 변배양 검사의 필요성 여부를 알아보고자 하였다. 방 법 : 1996년 3월부터 1997년 2월까지 6개월 이상된 소아설사 환아의 변배양 검체를 대상으로 하였다. Sorbitol-MacConkey 한천에 배양한 후 형성된 집락 중 무색 집락을 대상으로 E. coli로 동정된 것을 E. coli O157 라텍스 응집검사를 실시하여 응집이 되면 양성으로 판독하였다. 결 과 : 총 317 검체중 11월에 1 검체 (0.3%)에서 Shiga 독소를 생성하지 않는 E. coli O157:NM이 분리되었다. 7세 남아로 2일간의 복통과 1일간의 설사 및 구토를 주소로 입원 한 후 특별한 치료없이 2일후 증상이 호전되어 퇴원하였다. 결 론 : 검사된 모든 대변 검체중 한 검체 (0.3%)만이 E. coli O157이 분리되었으나 Shiga 독소를 생성하지 않는 군주였다. 따라서 이 세균의 분리를 위한 통상적인 변배양 검사는 아직 불필요한 것으로 사료되었다.
토양으로부터 cholesterol oxidase 생산성이 있는 균주를 분리하고, 이들 분리된 균주들로 부터 여러 단계의 균주 선발 실험을 통하여 cholesterol oxidase 생산성이 가장 우수한 미생물을 선별하여 HSL613이 라고 명명하였다. 이 HSL613은 $37^{\circ}C$에서 보다 $30^{\circ}C$에서 배양했을 때 더 높은 효소생산성을 나타내었고 배양시간이 경과함에 따라 pH가 높아지면서 효소생산이 증가하여, 144시간 배양하였을 때 pH는 8.5로 높아졌고 효소생산량도 가장 높았다. 균체량은 120 시간 배양하였을 때 가장 많았다. 본 실험에서 HSL613의 효소생산조건을 검토한 결과 최적 배지조성은 2.0% glucose, 2.0% yeast extract, 0.2% $K_2HP0_4$, 0.1% NaCl. 0.005% $CaCl_22H_2O, 0.001% $FeSO_47H_20$ 로 판명되었으며, $30^{\circ}C$에서 144시간 (6일때) 배양하였을 때 효소생성이 가장 많았고 (10.3U/ml), 종균의 접종량은 1.0%(v/v)일때가 가장 효소생성이 잘 되었다.
토양과 sludge 에서 1,2-propanediol을 자화할 수 있는 미생물을 분리하여 이들 중 가장 많은 젖산을 생성 하는 호모 한 균주(Y-1-4)를 선정하였다. 배양액에 생성된 산은 paper chromatography와 IR spectrum에 의해서 젖산으로 확인되었다. 이 효모는 탄소원으로서 ethanol, glycerin, glucose 및 1,2-propanediol 등을 자화할 수 있었는데 1,2-propanediol 으로부터만 젖산을 생성했다. 1,2-propanediol 에서부터 젖산생성의 최적 배지 및 최적 배양조건을 검토해서 1,2-propanediol 2.0%, NH$_4$Cl 0.5%, KH$_2$PO$_4$ 0.1%, MgSO$_4$.7$H_2O$ 0.05%, FeSO$_4$.7$H_2O$ 0.025%, yeast extract 0.04%와 CaCO$_3$ 0.3%를 함유하는 배지를 3$0^{\circ}C$에서 4일간 진탕 배양한 결과 젖산 생성량은 liter당 12.1gram 이었다.
토양으로부터 분리된 섬유소분해 활성이 우수한 균주를 동정하고, 효소의 생산조건, 효소의 분리 및 정제와 정제한 효소의 물리화학적 특성을 검토하였다. 분리된 미생물은 동정을 통하여 Pseudomonas sp. YD-15라고 명명하였고 avicel 1.2%, yeast extract 0.6%, $KNO_3$ 0.1%, $K_2HPO_4$ 0.2%, $MgSO_4$$7H_2O$ 0.15%의 배지(pH 8.0)를 사용하여 $30^{\circ}C$에서 $60{\sim}80$시간 배양 하였을 때 최대 효소생산을 보였으며, 배양액으로부터 85% ammonium sulfate 침전, DEAE-Sepharose CL-6B chromatography, Sephadex G-100 gel filtration 과정을 통하여 14%의 수율로 정제도 15.3배의 효소단백질을 얻었다. 정제효소의 최적 작용 pH는 6.0 이었고 pH $5.0{\sim}8.0$ 사이에서 안정하였다. 최적 작용온도는$50^{\circ}C$였으며, $50^{\circ}C$까지는 안정하였다. 효소의 분자량은 약 100,000으로 추정되었으며, 기질인 carboxymethylcellulose(CMC)에 대한 Km 값은 40mg/ml 이었다.
A screening was performed to isolate exoploysaccharide-producing microorganisms, which synthesized specific exopolysaccharide for the substitutive of commercial polysaccharides, from natural sources. Soil bacterium, one of 378 mucoid isolates, was finally selected as potential producer of polysaccharides which made the culture broth very viscous and thus examined in detail for optimal medium composition. Isolated strain was identified as Xanthomonas sp. EPS- 1 from the results of morphological and biochemical characteristics. The composition of optimal medium for exopolysaccharide production was as follows: 50 g sucrose, 1.5 g peptone, 2 g KH$_{2}$PO$_{4}$, 2 g MgSO$_{4}$, -7H$_{2}$O, 3 g NaCl, 0.05 g CaCO$_{3}$, 0.07 g FeSO$_{4}$-7H$_{2}$O and 0.05 g MnSO$_{4}$-7H$_{2}$O in 1 liter of distilled water. From the experiments of temperature and pH dependence, the optimal conditions for exopolysaccharide biosynthesis seemed to be 30$\circ$C and 8.0, respectively. About 14.9 gram of maximum exopolysaccharide per liter was obtained at the initial pH 8.0, 30$\circ$C and 250 rpm in a flask culture. The exopolysaccharide EPS-1 had such potential as an emulsifying agent and a gelling agent in comparision with commercial exopolysaccharide.
Cellulose를 효과적으로 분해하는 효소를 생산하는 미생물인 strain No. 33 균주를 토양으로부터 분리하였다. 본 균주의 배양상등액을 2.0%의 CMC가 함유된 agar 평판배지에 paper disc법을 이용하여 loading 후 cellulose 분해활성을 검토하였을 때, disc 주위로 노란색의 환이 형성되는 것을 확인할 수 있었다. 본 균주를 동정하기 위하여 전자현미경으로 그 형태를 관찰한 결과 본 균주는 간균의 형태였으며, 생리학적 특성을 검토한 결과 Bacillus속으로 동정되었다. 이에 본 균주를 Bacillus sp. No. 33으로 명명하였다. 본 균주는 1.0% glucose, 3.0% yeast extract, 0.5% $KH_2PO_4$, 0.02% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$가 함유된 pH 7.0의 배지에서 $30^{\circ}C$로 39시간 동안 진탕배양하였을 때 최대 균체생육을 나타내었다. 효소생산은 4.0% CMC, 2.0% yeast extract, 0.5% $KH_2PO_4$, 0.04% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, pH 7.0의 조건에서 $30^{\circ}C$, 42시간 동안 진탕배양하였을 때 최대 효소생산을 나타내었다.
For the biological treatment of industrial wastewater containing high concentration of phenol, isolation and characterization of phenol - degrading bacterium were carried out. A bacterial strain P2 capable of degrading phenol was isolated from contaminated soils by enrichment culture technique and identified as the genus Rhodococcus by morphological, cultural, biochemical characteristics, and Biolog system. The optimal medium composition and cultural conditions for the growth and degradation of phenol by Rhodococcus sp. P2 were 0.1% of (NH$_4$)$_2$SO$_4$, 0.2% of KH$_2$PO$_4$, 0.25% of Na$_2$HPO$_4$ㆍ12$H_2O$, 0.2% of MgSO$_4$ㆍ7$H_2O$, and 0.008% of CaC1$_2$ㆍ2$H_2O$ along with initial pH 8.5 at 3$0^{\circ}C$. Rhodococcus sp. P2 could grow with phenol as the sole carbon source up to 1,800 ppm in batch cultures, but did not grow in medium containing above 2,000 ppm of phenol. When 800 ppm phenol was given in the optimal media, Rhodococcus sp. P2 completely degraded it within 24 h. Meanwhile, 1,800 ppm of phenol was degraded within 9 days. Rhodococcus sp. P2 could utilize toluene, n-hexane, xylene and benzene as sole carbon source .
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[게시일 2004년 10월 1일]
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