Park, Woobong;Jeon, Myoung-Seung;Kim, Yean-Hee;Park, Eun-Woo;Park, Doil
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.86-86
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2003
Phytophthora capsici is a pathogen on several economically important crops including pepper. In pepper growing areas in Korea, Phytophthora blight caused by p. capsici has been considered as the most serious problem in pepper production. The Oomycete attacks the roots, stems, leaves and fruits of the plant. To understand the molecular mechanisms involved in the disease development, the genes expressed doting pepper p. capsici interaction were explored by analyzing expressed sequence tags (ESTs). A complementary DNA (cDNA) library was constructed from total RNA extracted from pepper leaves challenged with p. capsici for 3 days resulting in early stage of symptom development. The comprehensive analysis on the single pass sequencing of over 4000 randomly selected cDNA clones with contig assembly, unique gene extraction, sequence comparison, and functional categorizing will be presented with an emphasis on the genes involved in plant defense and pathogenicity during disease development of the pepper Phytophthora blight.
The biocontrol agent, Serratia plymuthica A21-4, has been developed for controlling pepper Phytophthora blight. Serratia plymuthica A21-4 strongly inhibits the mycelial growth, zoospore formation, and cyst germination of Phytophthora capsici in vitro. The application of a cell suspension of strain A21-4 to pepper plants in pot experiments and in greenhouse successfully controlled the disease. The bacteria produced a potent antifungal substance which was a key factor in the suppression of Phytophthora capsici. The most active chemical com-pound was isolated and purified by antifungal activity-guided fractionation. The chemical structure was identified as a chlorinated macrolide $(C_{23}H_{31}O_8Cl)$ by spectroscopic (UV, IR, MS, and NMR) data, and was named macrocyclic lactone A21-4. The active compound significantly inhibited the formation of zoosporangia and zoospore and germination of cyst of P. capsici at concentrations lower than $0.0625{\mu}g/ml$. The effective concentrations of the macrocyclic lactone A21-4 for $ED_{50}$ of mycelial growth inhibition were $0.25{\mu}g/ml,\;0.25{\mu}g/ml,\;0.30{\mu}g/ml \;and\;0.75{\mu}g/ml$ against P. capsici, Pythium ultimum, Sclerotinia sclerotiorum and Botrytis cinerea, respectively.
Pseudomonas isolates from different crop plants were screened for in vitro growth inhibition of Phytophthora capsici and production of biosurfactant. Two in vivo experiments were performed to determine the efficacy of selected Pseudomonas strains against Phytophthora blight of pepper by comparing two fungicide treatments [acibenzolar-S-methyl (ASM) and ASM + mefenoxam]. Bacterial isolates were applied by soil drenching ($1{\times}10^9$ cells/ml), ASM ($0.1{\mu}g$ a.i./ml) and ASM + mefenoxam (0.2 mg product/ml) were applied by foliar spraying, and P. capsici inoculum was incorporated into the pot soil three days after treatments. In the first experiment, four Pseudomonas strains resulted in significant reduction from 48.4 to 61.3% in Phytophthora blight severity. In the second experiment, bacterial treatments combining with olive oil (5 mL per plant) significantly enhanced biological control activity, resulting in a reduction of disease level ranging from 56.8 to 81.1%. ASM + mefenoxam was the most effective treatment while ASM alone was less effective in both bioassays. These results indicate that our Pseudomonas fluorescens strains (6L10, 6ba6 and 3ss9) that have biosurfactant-producing abilities are effective against P. capsici on pepper, and enhanced disease suppression could be achieved when they were used in combination with olive oil.
Isolation frequency of resistant isolates of Phytophthora capsici to metalaxyl was reported to be 38.9% through the resistance monitoring for metalaxyl in P. capsici causing pepper Phytophthora blight. Metalaxyl was very effective to mycelium growth, while not to zoosporangium germination and zoospore release. $EC_{50}$ values of metalaxyl in the inhibition of mycelium growth were 0.204, 0.151, 0.379, and $0.215\;{\mu}g\;mL^{-1}$ against each isolate sensitive to the fungicide as P. capsici 06-119, 06-143, P08-7, and P08-31, respectively, whilst those were 5.242, 5.724, 6.621, and $5.377\;{\mu}g\;mL^{-1}$ in P. capsici 06-125, 06-155, P08-50, and P08-60. For the field fitness, several factors, which were mycelium growth, zoosporangium germination, zoospore release, virulence to pepper plants, and the zoosporangium and the oospore production, were investigated with 4 sensitive isolates and 4 resistant isolates. Between 2 groups differentiated by the sensitivity of metalaxyl, there was no significance in mycelium growth, zoosporangium germination, zoospore release, and virulence to pepper plants. However, the zoosporangium and the oospore production in each resistant isolate, which were related to survival of P. capsici in fields, were superior to those of sensitive isolates. Based on results of this study, it was suggested that the increase of the percentage of resistant isolates to metalaxyl resulted from the high capacities of the zoosporangium and the oospore production.
Selection procedures for breeding lines resistant to both bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum and Phytophthora blight caused by P. capsici were executed to generations from $F_2$ and $BC_1F_1$ to $F_4$ and $BC_1F_3$ of crosses between a Phytophthora resistant breed, 'Chilbok No. 1' and bacterial wilt resistant accessions introduced from Vietnam during 2009 and 2010. The breeding populations or lines were tested for resistance to P. capsici and resistant plants were selected. The resistant selections were inoculated with R. solanacearum to discard susceptible plants. Resistance to P. capsici was conspicuously improved by selection from $F_2$ and $BC_1F_1$ and the final selections showed a similar level of resistance to P. capsici as a commercial Phytophthora resistant cultivar, Muhanjilju. A few $BC_1F_2$ selections were crossed to a cytoplasmic male sterile line, Chilbok-A, to identify their nuclear genotype interacting with male sterile cytoplasm. Majority of them was fixed to maintainer (Nrfrf) and only two resulted segregating into male sterile and male fertile plants indicating that the pollen parents were heterozygous in the fertility-restoring gene.
Jo, Su-Jung;Shim, Sun-Ah;Jang, Kyoung Soo;Choi, Yong Ho;Kim, Jin-Cheol;Choi, Gyung Ja
Horticultural Science & Technology
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v.32
no.1
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pp.66-76
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2014
Resistance of one hundred commercialized cultivars of chili pepper to four isolates of Phytophthora capsici was evaluated under controlled environmental conditions. The cultivars are commercialized as resistant (59%) and susceptible (41%) to Phytophthora blight in Korea. Mean disease severities of the cultivars on P. capsici MY-1, KPC-1, JHAI1-7, and KPC-7 isolates were 37, 55, 60, and 74%, respectively. In addition, 38 for MY-1, 48 for KPC-1, 56 for JHAI1-7, and 76 cultivars for KPC-7 showed susceptibility. To P. capsici MY-1, the weakest pathogenicity isolate among them, 59 cultivars represented high resistance. By contrast, only six cultivars showed high resistance to P. capsici KPC-7, the strongest isolate. Furthermore, resistance of most cultivars except for three cultivars was negatively correlated with the virulence of P. capsici isolates. And isolate-specific resistance of the chili pepper cultivars could not be found. Among them, six cultivars showing resistance to all the tested isolates were selected for further study. The development of Phytophthora blight on the six cultivars according to inoculum density ($5{\times}10^4$ to $1.5{\times}10^6$ sporangia/pot) and incubation temperature (25 to $30^{\circ}C$) after inoculation of P. capsici was tested. Resistance of the cultivars to P. capsici KPC-1 and JHAI1-7, moderately pathogenic isolates, was hardly affected. But to KPC-7 isolate, the highly resistant cultivars showed susceptiblility or moderate resistance when the seedlings were inoculated with inoculum density of $1.5{\times}10^6$ sporangia/pot and incubated at 28 to $30^{\circ}C$. From these results, it is likely that resistance of chili pepper cultivars to Phytophthora blight is affected by the virulence of P. capsici isolate.
Sang, Mee Kyung;Shrestha, Anupama;Kim, Du-Yeon;Park, Kyungseok;Pak, Chun Ho;Kim, Ki Deok
The Plant Pathology Journal
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v.29
no.2
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pp.154-167
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2013
We previously developed a sequential screening procedure to select antagonistic bacterial strains against Phytophthora capsici in pepper plants. In this study, we used a modified screening procedure to select effective biocontrol strains against P. capsici; we evaluated the effect of selected strains on Phytophthora blight and anthracnose occurrence and fruit yield in pepper plants under field and plastic house conditions from 2007 to 2009. We selected four potential biocontrol strains (Pseudomonas otitidis YJR27, P. putida YJR92, Tsukamurella tyrosinosolvens YJR102, and Novosphingobium capsulatum YJR107) among 239 bacterial strains. In the 3-year field tests, all the selected strains significantly (P < 0.05) reduced Phytophthora blight without influencing rhizosphere microbial populations; they showed similar or better levels of disease suppressions than in metalaxyl treatment in the 2007 and 2009 tests, but not in the 2008 test. In the 2-year plastic house tests, all the selected strains significantly (P < 0.05) reduced anthracnose incidence in at least one of the test years, but their biocontrol activities were variable. In addition, strains YJR27, YJR92, and YJR102, in certain harvests, increased pepper fruit numbers in field tests and red fruit weights in plastic house tests. Taken together, these results indicate that the screening procedure is rapid and reliable for the selection of potential biocontrol strains against P. capsici in pepper plants. In addition, these selected strains exhibited biocontrol activities against anthracnose, and some of the strains showed plant growth-promotion activities on pepper fruit.
Kim, Sang-Gyu;Jang, Ye-Lim;Kim, Hye-Young;Koh, Young-Jin;Kim, Young-Ho
The Plant Pathology Journal
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v.26
no.4
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pp.340-345
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2010
Two similar microbial fungicides (termed as MA and MB) developed in a Korean biopesticide company were analyzed and compared each other in their biocontrol activities against the phytophthora blight of chili pepper caused by Phytophthora capsici. MA and MB contained the microbe Paenibacillus polymyxa and Bacillus subtilis, respectively, with concentrations over those posted on the microbial products. In comparison of the isolated microbes (termed as MAP from MA and MBB from MB) in the antagonistic activities against P. capsici was effective, prominently against zoospore germination, while MBB only significantly inhibited the mycelia growth of the pathogen. Some effectiveness of MAP and MBB was noted in the inhibition of zoosporangium formation and zoospore release from zoosporangia; however, no such large difference between MAP and MBB was noted. In a pot experiment, MA reduced the severity of the phytophthora blight more than MB, suggesting that the disease control efficacy would be more attributable to the inhibition of zoospore germination than mycelia growth of P. capsici. These results also suggest that the similar microbes MA and MB targeting different points in the life cycle of the pathogen differ in the disease control efficacies. Therefore, to develop microbial fungicides it is required to examine the targeting points in the pathogen's life cycle as well as the action mode of antagonistic microorganisms.
In order to select multifunctional powerful antagonistic biocontrol agent against red-pepper rotting fungi Phytophthora capsici, we isolated an indigenous antagonistic bacterium which produces antifungal substances and siderophores from a local soil of Kyongju, Korea. The isolated strain was identified as Pseudomonas fluorescens biotype F. The antibiotic produced from P. fluorescens 2112 inhibited hyphae growth and the zoospore germination of Phytophthora capsici. The favorable carbon, nitrogen source and salts for the production of antibiotic from P. fluorescens 2112 were glycerol, beef extract and LiCi at 1.0%, 0.5% and 5 mM, respectively. And antagonistic activity of P. fluorescens 2112 was confirmed against P. capsici in vivo.
Genetic diversity of 21 Korean Phytophthora capsici isolates was analyzed by using several molecular markers such as random amplified polymorphic DNA(RAPD), M-13, microsatellite and random amplified microsatellite sequences(RAMS). The overall average similarity coefficient among the isolates was 86% based on the combined data obtained by the molecular markers. No molecular markers were found to be associated with hosts or geographic regions. In addition to RAPD, analysis based on repeated sequences such as $(GTG)_5$, M-13 and RAMS could be used to assess population structure of P. capsici.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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