Seo, Beom-Seok;Lee, Sang-Hoon;Lee, Ju-Eon;Yoo, Yung-Choon;Lee, Junglim;Park, Seok-Rae
IMMUNE NETWORK
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제13권5호
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pp.205-212
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2013
Dectin-1, which specifically recognizes ${\beta}$-glucan of fungal cell walls, is a non-Toll-like receptor (TLR) pattern recognition receptor and a representative of C-type lectin receptors (CLRs). The importance of Dectin-1 in innate immune cells, such as dendritic cells and macrophages, has previously been well studied. However, the function of Dectin-1 in B cells is very poorly understood. To determine the role of Dectin-1 in B cell activation, we first investigated whether mouse B cells express Dectin-1 and then assessed the effect of Dectin-1 stimulation on B cell proliferation and antibody production. Mouse B cells express mRNAs encoding CLRs, including Dectin-1, and surface Dectin-1 was expressed in B cells of C57BL/6 rather than BALB/c strain. Dectin-1 agonists, heat-killed Candida albicans (HKCA) and heat-killed Saccharomyces cerevisiae (HKSC), alone induced B cell proliferation but not antibody production. Interestingly, HKSC, HKCA, and depleted zymosan (a selective Dectin-1 agonist) selectively enhanced LPS-driven IgG1 production. Taken together, these results suggest that, during fungal infection, ${\beta}$-glucan-stimulated Dectin-1 may cooperate with TLR4 to specifically enhance IgG1 production by mouse B cells.
Sooyoung Kim;Bit Na Lee;Seung Woo Kim;Ha Young Shin
Annals of Clinical Neurophysiology
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제25권2호
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pp.84-92
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2023
Background: Clinical spectrum of immunoglobulin M (IgM) monoclonal gammopathy varies from IgM monoclonal gammopathy of unknown significance (IgM-MGUS) to hematological malignancies. We evaluated the clinical features, electrophysiological characteristics, and prognosis of patients with peripheral neuropathy associated with IgM monoclonal gammopathy (PN-IgM MG). Methods: We retrospectively evaluated 25 patients with PN-IgM MG. Peripheral neuropathy was classified as axonal, demyelinating, or undetermined, based on electrophysiological studies. We classified the enrolled patients into the IgM-MGUS and malignancy groups, and compared the clinical and electrophysiological features between the groups. Results: Fifteen patients had IgM-MGUS and 10 had hematologic malignancies (Waldenström's macroglobulinemia: two and B-cell non-Hodgkin's lymphoma: eight). In the electrophysiological evaluation, the nerve conduction study (NCS) criteria for demyelination were met in 86.7% of the IgM-MGUS group and 10.0% of the malignancy group. In particular, the distal latencies of the motor NCS in the IgM-MGUS group were significantly prolonged compared to those in the malignancy group (median, 9.1 ± 5.1 [IgM-MGUS], 4.2 ± 1.3 [malignancy], p = 0.003; ulnar, 5.4 ± 1.9 [IgM-MGUS], 2.9 ± 0.9 [malignancy], p = 0.001; fibular, 9.3 ± 5.1 [IgM-MGUS], 3.8 ± 0.3 [malignancy], p = 0.01; P-posterior tibial, 8.3 ± 5.4 [IgM-MGUS], 4.4 ± 1.0 [malignancy], p = 0.04). Overall treatment responses were significantly worse in the malignancy group than in the IgM-MGUS group (p = 0.004), and the modified Rankin Scale score at the last visit was higher in the malignancy group than in the IgM-MGUS group (2.0 ± 1.1 [IgM-MGUS], 4.2 ± 1.7 [malignancy], p = 0.001), although there was no significant difference at the initial assessment. Conclusions: The risk of hematological malignancy should be carefully assessed in patients with PN-IgM MG without electrophysiological demyelination features.
The cDNA sequence of the Japanese flounder (Paralychthys olivaceus) IgD has been previously reported (GenBank accession no. AB052658) and this was followed by the detection of IgD mRNA expression in some flounder organ tissues. However, it has not been determined whether the flounder IgD gene is virtually expressed into IgD protein. To characterize the flounder immunoglobulins utilized in elucidating the mechanism, evolution and diversity of the flounder immune system, antibodies specific to IgD and IgM were necessary. In the present study, partial flounder recombinant IgD (rIgD), IgM (rIgM) and the conserved regions of IgD and IgM (rCIg) were produced by cloning the cDNA sequence using isotype specific primers which were designed to produce unique fragments of IgD and IgM specific amino acid sequences. The production of recombinant Igs was ascertained by SDS-gel electrophoresis and immunoblot analysis using anti-T7$\cdot}$Taq antibody. The produced recombinant Igs were purified using affinity columns, and used as immunogens. Antibodies specific to the isotype of flounder Igs were generated by immunizing rabbits with rfIgs and the antibodies produced were identified by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunoblotting. Specificities of the generated antibodies were evaluated by testing cross-reactivity between recombinant IgM and IgD. By ELISA, rabbit antibodies against the rfIgD fragment (anti-rfIgD) failed to recognize any kind of flounder serum Igs, whereas respective antibodies against rfCIg (anti-rfCIg) and rfIgM fragments (anti-rfIgM) reacted with serum Igs. Likewise, in immunoblot assays, though anti-rfIgD did not, both anti-rfCIg and anti-rfIgM bound with the ~85 kd flounder IgM heavy chain. By flow cytometry analysis, anti-rfCIg, anti-rfIgD and anti-rfIgM reacted with 6%, 3% and 6.5% of cells, respectively, suggesting that flounder IgD is not secreted in serum but expressed on flounder B-like cell surfaces as in mammals. Antibodies produced against recombinant flounder Igs could be used to develop sandwich assay systems for detecting flounder Igs and for further investigating the flounder immune system.
Background: B-1 cells differ from conventional B-2 cells both phenotypically and functionally. The aim of this study was to investigate the difference between peritoneal B-1 cells and splenic B-2 cells in proliferation. Methods: We obtained sorted B-1 cells from peritoneal fluid and B-2 cells from spleens of mice. During the culture of these cells, immunoglobulin secreted into the culture supernatants was evaluated by enzymelinked immunosorbent assay. Entering of S phase in response to LPS-stimuli was measured by proliferative assay. Results: Spontaneous Immunoglobulin M production occurred in peritoneal B-1 cells but not in splenic B-2 cells. LPS stimulated peritoneal B-1 cells secreted IgM at day 1, but splenic B-2 cells at day 2. In thymidine incorporation, peritoneal B-1 cells entered actively S phase after 24hours LPS-stimulation but splenic B-2 cells entered actively S phase after 48 hours. Conclusion: IgM secretion and S phase entering occurred early in peritoneal B-1 cells compared to splenic B-2 cells.
The random V(D)J recombination process ensures the diversity of the primary immunoglobulin (Ig) repertoire. In two thirds of cases, imprecise recombination between variable (V), diversity (D), and joining (J) segments induces a frameshift in the open reading frame that leads to the appearance of premature termination codons (PTCs). Thus, many B lineage cells harbour biallelic V(D)J-rearrangements of Ig heavy or light chain genes, with a productively-recombined allele encoding the functional Ig chain and a nonproductive allele potentially encoding truncated Ig polypeptides. Since the pattern of Ig gene expression is mostly biallelic, transcription initiated from nonproductive Ig alleles generates considerable amounts of primary transcripts with out-of-frame V(D)J junctions. How RNA surveillance pathways cooperate to control the noise from nonproductive Ig genes will be discussed in this review, focusing on the benefits of nonsense- mediated mRNA decay (NMD) activation during B-cell development and detrimental effects of nonsense-associated altered splicing (NAS) in terminally differentiated plasma cells.
최근에 방사선 조사에 대해 방호효과를 가지는 것으로 알려진 보중익기탕의 골수세포 분화 유도 효과에 대해 관찰하였다. 시험관에서 골수세포를 배양했을 때, 배양시간(5일,10일)에 따라 대조군의 세포 수는 현저히 감소하였고, 보중익기 탕의 total 분획을 첨가하였을 때도 비슷한 결과를 얻었다. 그러나 polysaccaride 분획을 첨가하였을 때는 감소하는 세포수가 일정한수준에서 유지되며 더 이상 감노하지 않았다. 그리고 이들 세포가 어떤 종류의 세포인지를 유세포분석기로 분석한 결과, Pre-B세포의 특징적인 세포 표면 단백질인 CDl9와 CD40을 동시에 발현한 세포인 것이 확인되었다. 또한, 이들 세포는 분화과정 이 끝난 B세포가 분비하는 IgM 뿐만 아니라 IgG1, G2a, G3를 분비하였다. 이상의 결과 보중익기탕의 polysaccaride 분획에 골수세포가 B세포로 분화 증식하는 것을 유도하는 성분이 포함되어 있어 방사선 조사로 상해를 입은 조혈계에 대한 방호 효과를 나타내는 것으로 생각된다.
Objectives : Tribulus terrestris $Linn{\acute{e}}$ (Tribuli Fructus; TF) has been used to treat hypochondrium, agalactia, nebula, itching and vitiligo in traditional Korean medicine. In this study, we investigated the effects of TF 30% ethanol extract on inflammatory responses in IgE-stimulated RBL-2H3 mast cells. Methods : TF extract was prepared by 30% ethanol. RBL-2H3 cells, a rat mast cell line, were treated with TF extract at different concentrations for 1 hr and then stimulated with DNP-IgE/HSA for indicated times. Cell viability was measured by WST-1 assay. The expression of inflammatory cytokines (IL-4, IL-13 and $IFN-{\gamma}$) mRNA was determined by reverse transcriptase-PCR, and the phosphorylation of ERK1/2, p38 and JNK MAP kinases (MAPKs) was determined by Western blot. The nuclear expression of $NF-{\kappa}B$ p65 in the cells was detected by Western blot and immunocytochemistry, respectively. Results : The treatment of TF extract at 0.1 and $0.2mg/m{\ell}$ significantly decreased the expression of IL-4 and IL-13 mRNA in IgE-stimulated RBL-2H3 mast cells, while significantly increased the expression of $IFN-{\gamma}$ mRNA. TF extract treatment was also inhibited the phosphorylation of ERK1/2, p38 and JNK MAPKs in IgE-stimulated RBL-2H3 mast cells in a dose-dependent manner. In addition, TF extract significantly blocked the translocation of $NF-{\kappa}B$ p65 into the nuclear of cells after IgE stimulation. Conclusions : These results indicate that TF extract inhibits inflammatory response in IgE-stimulated mast cells through blocking MAPKs/$NF-{\kappa}B$ pathway. This suggests that TF extract has an anti-inflammatory activity in mast cell activation.
한국식품영양과학회 2004년도 Annual Meeting and International Symposium
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pp.110-115
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2004
The immature fruits of Poncirus trifoliata L. or Ponciri fructus (PF), well known as 'Jisil' in Korea, have been used against allergic diseases for generations, and still occupy an important place in traditional Oriental medicine. Anti-allergic effects of this fruit have been investigated in a few experimental models. Immunoglobulin E (IgE) is the principal immunoglobulin involved in immediate hypersensitivities and chronic allergic diseases. The effect of an aqueous extract of PF on in vivo and in vitro IgE production was investigated. PF dose-dependently inhibited the active systemic anaphylaxis and serum IgE production induced by immunization with ovalbumin, Bordetelia pertussis toxin and aluminum hydroxide gel. PF strongly inhibited interleukin 4 (IL-4)-dependent IgE production by lipopolysaccharide-stimulated murine whole spleen cells. In the case of U266 human IgE-bearing B cells, Ponciri fructus also showed an inhibitory effect on the IgE production. On the other hand, mast cell hyperplasia can be causally related with chronic inflammation. Stem cell factor (SCF), the ligand of the c-kit protooncogene product, is a major regulator and ohernoattractant of mast cells. Ponciri fiuctus (1 mg/mL) significantly inhibited the SCF-induced migration of rat peritoneal mast cells (RPMCs). RPMCs exposed to SCF (50 ng/mL) resulted in a drastic shape change with a polarized morphology while the cells exposed to Ponciri fructus (1 mg/mL) remained resting, with little or no shape alteration. The drastic morphological alteration and distribution of polymerized actin were blocked by pretreatment with Ponciri fructus. In addition, Ponciri fructus inhibited both TNF-alpha and IL-6 secretion from RPMCs stimulated with SCF. These results suggest that Ponciri fructus has an anti-allergic activity by inhibition of IgE production from B cells. These findings also provide evidence that Ponciri fructu inhibits chemotactic response and inflammatory cytokines secretion to SCF in mast cells.
Background: There are at least two different subsets of B cells, B-1 and B-2. The characteristic features and function of B-2 cells in addition to the effect of steroids on B-2 cells are well-known. Although B-1 cells have different features and functions from B-2 cells, the effect of steroids on B-1 cells is not completely understood. Therefore, this study examined the effects of dexamethasone on peritoneal (or B-1 cells) and splenic B cells (or B-2 cells). Methods: Purified B cells were obtained from the peritoneal fluid and the spleens of mice. The isolated B cells were cultured in a medium and after adding different concentrations of dexamaethasone. The cell survival rate was measured by flow cytometry using propidium iodide. The expression level of the B cell surface marker was analyzed by flow cytometry. During the culture of these cells, immunoglobulin secreted into the culture supernatants was evaluated by an enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The survival rate of peritoneal and splenic B cells decreased with increasing dexamethasone concentration. However, the rate of peritofieal B cell apoptosis was lower than that of splenic B cells. CDS and B7.1 expression in peritoneal B cells and CD23 and sIgM expression in splenic B cells after the dexamethasone treatment were reduced. When B cells were treated with dexamethasone, the spontaneous IgM secretion decreased with increasing dexamethasone concentration. Conclusion: Dexamethasone induces apoptosis in peritoneal and splenic B cells. However, peritoneal B cells are less sensitive to dexamethasone. The dexamethasone suppressed expression of the surface markers in peritoneal B cells is different from those in splenic B cells.
본 연구는 하수오에서 분리한 PM-E와 PM-70M를 이용하여 GATA-3의존성 Th2세포 조절과 IgE 억제 효과를 실험하였다. 하수오를 물질분리하여 GATA-3 전사인자 활성을 억제하는 하수오 물질분획층이 흡착크로마토그래피를 통하여 70% 메탄올층에 포함되어 있다고 분석하였다. 그 결과 PM-70 %MFL 분획이 Th2 사이토카인을 조절하는 GATA-3를 억제하여 항알레르기 작용 효과가 있다고 생각된다. 하수오를 흡착크로마토그래피로 분리하여 분획들을 anti-CD40/rmIL-4와 동시 배양하여 B세포에서 IgE 분비를 억제하는지를 알아본 결과, PM-30M층, PM-70A, 그리고 PM-30A층의 IL-6와 TNF-${\alpha}$ mRNA, IgE 분비량은 대조군과 차이가 없었다. 그러나 IL-6와 TNF-${\alpha}$ mRNA 유전자 발현은 각각 $0.69{\pm}0.058$(p<0.001)과 $0.72{\pm}0.58$ (p<0.05)로 대조군에 비하여 30% 이상 유의하게 억제하였다. IgE 분비량은 $94.6{\pm}16.0$으로 대조군에 비교하였을 때 45.6% 이상 유의하게 감소를 나타내었다 (p<0.01). 본 연구를 통해 하수오의 분획중 PM-70 %MFL층에 B세포의 분화 및 활성을 억제하는 성분이 포함된 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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