To investigate the mechanism of cadmium tolerance in a cadmium-resistant Azomonas agilis PY101 that produces a specific fluorescent pigment promoted by cadmium, we carried out Tn5 mutagenesis and isolated four pigment-deficient mutants. In these mutants, Ppg1, Ppg2, and Ppg3 remarkably reduced the pigment production to 15.3%, 11.2%, and 13.9%, respectively. Especially, Ppg4 mutant did not produce the pigment at all. None of the mutants grew in the presence of 1500 ppm of CdCl2 in growth medium, and they exhibited differential sensitivities to cadmium. Ppg1, Ppg2, Ppg3, and Ppg4 mutants were sensitive to 900 ppm, 1100 ppm, 1000 ppm, and 800 ppm of CdCl2, respectively. These mutants also showed noticeable increase, from 8.8-fold to 13.2-fold, in the size of growth inhibition zone compared with that of the will type after treatment with cadmium. Therefore, the pigment production of A. agilis PY101 was found to decrease the toxic effects of cadmium to the bacterium.
Adsorption and precipitation of cadmium (Cd) could be dependent on rate of P addition and Cd level in soil. Therefore, the objective of this study was to examine how addition rate of P affect mechanisms of Cd immobilization such as adsorption and precipitation in different levels of Cd in soil. Arable soils were spiked with inorganic Cd ($CdCl_2$) to give a total Cd concentration of 10, 100, and $1,000mg\;Cd\;kg^{-1}$. Monopotassium phosphate ($KH_2PO_4$, MPP) was selected as phosphate material and mixed with the pretreated arable soil at the rates of 0, 800, 1,600 and $3,200mg\;P\;kg^{-1}$. The mixture soils were incubated at $25^{\circ}C$ for 8 weeks in dark condition. Soil pH decreased with increasing MPP addition rate in all levels of Cd but negative charge of soil increased, thereby reducing 1 M $NH_4OAc$ extractable Cd. Soil solutions were undersaturated with respect to $CdCO_3$ and $Cd_3(PO_4)_2$ with all P addition rate in soil with low Cd level (${\leq}100mg\;Cd\;kg^{-1}$) but supersaturated in soil with high Cd level ($1,000mg\;Cd\;kg^{-1}$). From the above results, Cd solubility was controlled by precipitation of Cd minerals such as $CdCO_3$ and $Cd_3(PO_4)_2$ in soil with high Cd level but by Cd adsorption induced by increase in negative charge of soil with low level of Cd.
The accumulation of inbreeding and the loss of genetic diversity is a potential problem in the modern swine breeds in China. Therefore, the purpose of this study was to analyze the pedigrees of Chinese Duroc (CD), Landrace (CL) and Yorkshire (CY) swine to estimate the past and current rates of inbreeding, and to identify the main causes of genetic diversity loss. Pedigree files from CD, CL and CY containing, 4529, 16,776 and 22,600 records, respectively, were analyzed. Pedigree completeness indexes of the three breeds, accounting for one generation back, were 83.72, 93.93 and 93.59%, respectively. The estimated average annual inbreeding rates for CD, CL and CY in recent three years were 0.21, 0.19 and 0.13%, respectively. The estimated average percentage of genetic diversity loss within each breed in recent three years was about 8.92, 2.19, and 3.36%, respectively. The average relative proportion of genetic diversity loss due to unequal contributions of founders in CD, CL and CY was 69.09, 57.95 and 60.57%, and due to random genetic drift was 30.91, 42.05 and 39.43%, respectively. The estimated current effective population size for CD, CL and CY was 76, 117 and 202, respectively. Therefore, CD has been found to have lost considerable genetic diversity, demanding priority for optimizing the selection and mating to control future coancestry and inbreeding. Unequal contribution of founders was a major cause of genetic diversity loss in Chinese swine breeds and random genetic drift also showed substantial impact on the loss of diversity.
브라디키닌은 체내에서 강력한 혈관 확장 작용을 일으키는 autacoid(local hormone)로서 혈압의 항상성 유지, 모세혈관 투과성 증진, 염증 및 통증 반응 등에 관여하고 여러 장관 평활근을 수축시킨다. 또한 septic 혹은 endotoxic shock의 여러 원인 물질로도 생각되어진다. 최근 rhinovirus로 인한 감기의 제증상 원인 물질로도 브라디키닌이 주목을 받고있다. 이와같이 브라디키닌온 다양한 질병에 있어 중요한 원인 물질로 여겨지므로 브라디키닌 길항제들은 한두 질병의 치료제로 개발될 가능성이 높음이 강력히 제시되고 있는 실정이다. 이의 개발을 위해서 브라디키닌 수용체에 대한 연구는 필수적이라고 할 수 있다. 본 연구는 두 부분으로 나누어 진행중인데 첫째, 이제까지 보고된 브라디키닌 길항 물질들은 대부분이 브라디키닌의 특정 아미노산 잔기를 치환시킨 펩타이드 유도체로서 이들을 경구 투여시 peptidase어 의하여 쉽게 분해되고 또한 부분적인 효능제 활성을 갖는 불리한 점을 감안하여, 비펩타이드성 브라디키닌 길항제를 개발할 목적으로 한방 및 민간에서 자주 사용되어온 생약중에 브라디키닌 작용에 선택적 길항효과가 있는 물질을 검색한 바 활성을 보인 황금으로부터 작용 성분을 추적중에 있다. 둘째, 브라디키닌 수용체를 순수하게 분리 정제하기 위한 첫 단계로서 이 수용체의 결합시험(binding assay) 방법을 확립하고 더불어 여러 조직내(흰쥐의 여러 기관, 토끼 및 사람의 신장)의 브라디키닌 수용체의 분포를 파악하는 일이다. 횐쥐 조직의 실험 결과로부터 신장에 브라디키닌 수용체가 많이 분포함을 확인되었고 향후 토끼 신장으로부터 동수용체를 분리하고자 한다. 또한 토끼 신장의 근위세뇨관일차배양세포을 이용하여 브라디키닌의 신장에서의 작용기전도 살펴보고 있다.+}$, $Na^{+}$, NH$_{4}$$^{+}$ 및 H$^{+}$) 수용액 메디움에서의 Cd(II), Mg(II) 및 Zn(II)의 Dowex 1-X8, Cl$^{-}$ 수지에 대한 흡착은 역시 어떤 메디움에서도 Cd(II) 흡착이 제일 크며, 다음이 Zn(II) 이고 착이온을 형성않는 Mg(II)이 제일 작았다. 한편 메디움 종류별 D값의 크기순위는 H$^{+}$>K$^{+}$> $Na^{+}$>NH$_{4}$$^{+}$이였다. 메디움의 종류에 따라 D값의 차이가 나는 것은 금속이온의 착이온 형성과 금속이온의 용액내에서의 이온종의 상태와 관련이 있다고 생각된다. 마. MCl(M:K$^{+}$, $Na^{+}$, NH$_{4}$$^{+}$ 및 H$^{+}$)과 MNO$_{3}$ 용리액에 의한 Cd(II), Mg(II) 및 Zn(II)의 용리는 예상한 바와 같이 MCl에서 작은 Dv 값을 갖는데, 이것은 CdCl$_{4}$$^{2-}$ 착이온을 형성하거나 ZnCl$_{4}$$^{2-}$ , ZnCl$_{3}$$^{-}$같은 이온과 MgCl$^{+}$, MgCl$_{2}$같은 이온종을 형성하기 때문인것 같다. 한편 어떠한 용리액에서던지 NH$_{4}$$^{+}$의 경우
자동차, 항공기, 선박등과 같은 산업제품과 전화기, TV브라운관과 같은 가전제품, 심미적 기능을 갖는 제품등과 같은 일상용품등은 많은 부분이 자유곡면(sculptured surface)으로 이루어져 있다. 이러한 해석적으로 정의 하기 어려운 제품 또는 그것을 생산하는데필요한 금형을 가공하는데 있어서 기존에는 석고 모형이나 목형을 이용한 모방 절삭을 하였다. 그러나 근래에는 자유곡면으로이루어진 제품을 설계하고 가공하는데 있어서 CAD/CAM system을 이용하고 있다. 제품의 곡면을 표현하거나 이들을 NC가공하기 위해서는 곡면을 나타내는 형상 정보가 필요 하고 이들 형상정보로 곡면모델링을 하여공구 경로를 구한다. 그러므로 이들 형상정보를 허용한도내에서 적절히 정하여 실제형상에 가까운 곡면을 형성하여야 한다. CAD/CAM 기술의 발달에 따라 다양한 형태의 곡면을 형성하는 기능을 가진 system이 많이 출현되었고 점토, 석고 또는 나무등으로 만든 physical model로 부터 얻어진 형상정보에 의해 surface fitting을 함으로서 자유곡면을 표현하는 방법이 많이 사용되고 있다. 어떠한 곡면을 표현할때는 곡면의 특성을 잘 표현하면서 전체적으로 smooth 한 것이 바람직하다. 그러므로 곡면의 형태를 설계자가 쉽게 이해할 수 있고 적은 수의 patch로도 복잡한 형상을 나타내야 하며 또한 국부적으로 수정이 용이하여야한다. 본 논문에서는 자유곡면을 나타낼 수 있는 수학적 표현 방법에 관하여 논하고, 해석적 곡면으로 부터 형상정보를 얻어 곡면 모델링을 한 후의 Ferguson곡면, UBS와 NUBS의 차이점을 분석하고, 이들 곡면과 해석적 곡면으로부터 얻은 실제곡면과의 오차를 측정하여 실제형상에 가까운 모델링 곡면을 찾고자 하였다.. 라. MCl(M:K$^{+}$, $Na^{+}$, NH$_{4}$$^{+}$ 및 H$^{+}$) 수용액 메디움에서의 Cd(II), Mg(II) 및 Zn(II)의 Dowex 1-X8, Cl$^{-}$ 수지에 대한 흡착은 역시 어떤 메디움에서도 Cd(II) 흡착이 제일 크며, 다음이 Zn(II) 이고 착이온을 형성않는 Mg(II)이 제일 작았다. 한편 메디움 종류별 D값의 크기순위는 H$^{+}$>K$^{+}$> $Na^{+}$>NH$_{4}$$^{+}$이였다. 메디움의 종류에 따라 D값의 차이가 나는 것은 금속이온의 착이온 형성과 금속이온의 용액내에서의 이온종의 상태와 관련이 있다고 생각된다. 마. MCl(M:K$^{+}$, $Na^{+}$, NH$_{4}$$^{+}$ 및 H$^{+}$)과 MNO$_{3}$ 용리액에 의한 Cd(II), Mg(II) 및 Zn(II)의 용리는 예상한 바와 같이 MCl에서 작은 Dv 값을 갖는데, 이것은 CdCl$_{4}$$^{2-}$ 착이온을 형성하거나 ZnCl$_{4}$$^{2-}$ , ZnCl$_{3}$$^{-}$같은 이온과 MgCl$^{+}$, MgCl$_{2}$같은 이온종을 형성하기 때문인것 같다. 한편 어떠한 용리액에서던지 N
실리콘의 모노머로 사용되고 있는 MCS의 합성 최적조건에 관한 연구를 수행하였다. 4원촉매계($CuCl/ZnCl_2/Sn/Cd$)와 원료규소로 부터 접촉물질을 제조한 후, 염화메틸과 반응시켜 MCS를 합성할 때 실험계획법에 따라 실험하고 해석하여 하나의 공정조건을 확립하였다. 접촉물질 50g, 교반속도 60rpm, 상압에서 최적반응온도와 MeCl 유량은 각각 $300-305^{\circ}C$와 $70-80cm^3/min$이었다. 또한 연속적으로 실험을 수행하여 최적공정조건을 확인하였으며, MeCl의 전환율 67%와 규소소모율 92%에서 평균반응속도는 170(g-MCS/hr.kg-Si), 평균선택도는 0.05이었으며, 연속식 실험결과로부터 총괄반응속도식의 파라미터와 최적압력을 구하였다.
P. phosphoreum을 이용하여 연속 모니터링 시스템을 개발하고자 free cell과 고정화 세포의 중금속 물질에 대한 반응을 일차로 조사하였다. 고정화 물질로는 절차가 비교적 간단하고 bioluminescence 투과성에 영향을 주지 않는 sodium algmate를 사용하였다. Alginate는 발광미생물의 빛 발생 대사를 저해하지 않을 뿐만 아니라 bioluminescence의 투과성이 탁월하였다. 중금속 물질 중에서 $HgCl_2$, $CdCl_2$, $MnSO_4$, $ZnSO_4$를 선택하여 free cell과 alginate 혼합 세포 및 strontium alginate에 고정화한 세포에 노출시켜 반응을 조사하였으며, 또한 독성 및 strontium alginate에 고정화한 gel을 disc type으로 제조하여 중금속 물질에 대한 bioluminescence의 변화를 조사하였다. Free cell과 disc type의 세포가 alginate 혼합세포 및 strontium alginate로 고정화한 세포에 비해서 비교적 민감한 반응을 보였으며 중금속 물질의 농도에 대하여 bioluminescence intensity의 감소율이 비례하여 나타났다. 특히, 고정화 세포인경우 free cell 보다 중금속의 mass transfer에 미치는 영향 때문에 민감성은 떨어지지만 모두 linear regression curve를 나타내었다. Disc type의 경우 alginate에 혼합한 세포와 strontium alginate로 고정화한 세포보다 민감한 반응을 보인 것은 중금속에 노출된 면적이 넓기 때문으로 사료된다. 독성물질에 대한 반응분석을 위하여 Gamma value로부터 $EC_{50}$을 계산하였으며 이를 이용하여 각 중금속 물질의 농도와 P. phosphoreum의 bioluminescence intensity와의 상관관계 및 각 중금속 물질의 독성정도를 산출하였다. $EC_{50}$값을 이용하여 독성정도를 볼 때 4가지 type 모두 $HgCl_2$가 가장 독성이 강한 것으로 나타났다. 본 연구결과를 종합해 볼때 P. phosphoreum을 고정화 할 경우 bioluminescence에 거의 영향을 미치지 않을 뿐만 아니라 bioluminescence의 안정성에도 기여하기 때문에 모니터링 시스템에 적용할 수 있다. 특히 disc type의 고정화 제재는 free cell과 동등한 민감도를 나타내었기 때문에 빛 안정성을 유지하면서 수질 모니터링을 위한 bioluminescence제재로 이용이 가능하다.
During depolarization, extrusion of $Ca^{2+}$ from sarcoplasmic reticulum through forward-mode $Na^+-Ca^{2+}$ exchange was studied in the rat ventricular myocytes patch-clamped in whole-cell configuration. In order to confine the $Ca^{2+}$ responses in a micro-domain by limiting the $Ca^{2+}$ diffusion time, rat ventricular myocytes were dialyzed with high (14 mM) EGTA. $K^+$ current was suppressed by substituting KCl with 105 mM CsCl and 20 mM TEA in the pipette filling solution and by omitting KCl in the external Tyrode solution. $Cl^-$ current was suppressed by adding 0.1 mM DIDS in the external Tyrode solution. During stimulation roughly mimicking action potential, the initial outward current was converted into inward current, $47{\pm}1%$ of which was suppressed by 0.1 mM $CdCl_2.$ 10 mM caffeine increased the remaining inward current after $CdCl_2$ in a cAMP-dependent manner. This caffeine-induced inward current was blocked by $1\;{\mu}M$ ryanodine, $10\;{\mu}M$ thapsigargin, 5 mM $NiCl_2,$ or by $Na^+\;and\;Ca^{2+}$ omission, but not by $0.1\;{\mu}M$ isoproterenol. The $I{\sim}V$ relationship of the caffeine-induced current elicited inward current from -45 mV to +3 mV with the peak at -25 mV. Taken together, it is concluded that, during activation of the rat ventricular myocyte, forward-mode $Na^+-Ca^{2+}$ exchange extrudes a fraction of $Ca^{2+}$ released from sarcoplasmic reticulum mainly by voltage-sensitive release mechanism in a micro-domain in the t-tubule, which is functionally separable from global $Ca^{2+}{_i}$ by EGTA.
The biosorption and desorption of Cd were carried out using brown marine algae, known as the good biosorbent of heavy metals. The content of alginate bound to light metals could be changed by the physical and the chemical pretreatment of Sargassum fluitans biomass. The Cd uptake was independent of the alginate content. In case of protonated biomass, Cd uptake was the lowest because the alginic acid of biomass was dissolved to cadmium solution during the biosorption. The maximum Cd uptake of Sargassum biomass was ranged from 79 mg/g to 139 mg/g. In case of raw biomass, the higher the alginate content of biomass, the higher was the Cd uptake. 100% of Cd and light metals sorbed in the biomass were eluted at 0.1N HCI(pH 1.1). However, the elution efficiency in $CaCl_2$ and $Ca{(NO_3)}_2$solution was varied by the concentration, the solid to liquid ratio and the pH of calcium solution. The distribution coefficient between Cd and protons in the desorption solution at pH ranged from 1.6 to 2.9 was observed on the constant stoichometric coefficient(1.3).
카드뮴이 마우스의 효소활성에 미치는 영향을 평가하고자 BALB/c 마우스를 대상으로 0, 25, 50, 100 및 200 ppm의 $CdCl_2$가 첨가된 음료를 7주동안 자유급식한 후 간 및 신장에서 카드뮴(Cd)의 축적정도 및 효소(LDH 및 SOD)활성 변화를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 간 및 신장에서의 Cd축적도는 투여량이 증가될 수록 높았으며 특히 신장에서 더욱 높았다. 2. 간장과 신장의 lactate dehydrogenase(LDH)활성치는 신장의 경우 농도가 증가할 수록 활성치도 증가(25 ppm ; p<0.05, 50, 100 및 200 ppm; p<0.01)하는 경향을 보였으나 간에서는 100 ppm까지는 농도에 비례하여 활성치도 증가(50 및 100 ppm; p<0.05)하였다가 200ppm 투여군에서는 25 ppm 투여군 수준으로 감소되었다. 3. Superoxide dismutase(SOD)활성은 25 ppm 투여군의 간장에서 유의한 상승치(p<0.05)를 보인 것을 제외하고는 대조군의 간 및 신장의 활성치와 유사한 결과를 보였다. 이상의 결과는 카드뮴이 농도에 따라서 생체내의 LDH 및 SOD와 같은 효소계의 활성에 영향을 미칠 수 있음을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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