농어의 난성숙과 배란유도를 위한 C하(21)-스테로이드와 HCG의 효능 비교실험이 in vitro에서 이루어졌다. 분리된 난모세포를 대상으로 17${\alpha}$-hydroxy, 20${\beta}$-dihydroprogesterone(17${\alpha}$20${\beta}$OHP), 17${\alpha}$-hydroxy, 20${\beta}$-dihydroprogesterone(17${\alpha}$20${\beta}$OHP : 5~100ng/ml)와 HCG(5~500IU/ml)를 사용하여 관찰한 난성숙 유도효과, 즉 GVM(germinal vesicle migration)과 GVBD(germinal vesicle breakdown)를 보면, 5ng/ml 농도의 17${\alpha}$20${\beta}$OHP와 17${\alpha}$20${\beta}$OHP를 제외한 모든 실험군에서의 반응은 대조군보다 효과가 있는 것으로 나타났으며, 특히 17${\alpha}$20${\beta}$OHP 50ng/ml 농도에서 가장 높은 성숙 유도효과를 보였다. GVBD 유도효과에 대한 17${\alpha}$20${\beta}$OHP(50ng/ml), HCG(50IU/ml) 그리고 이들 호르몬을 혼합처리한 17${\alpha}$20${\beta}$OHP+HCG에서는 혼합처리한 실험군이 가장 높은 반응을 보여 이들의 상호 보완적 작용을 관찰할 수 있었다. 난소조직을 대상으로 HCG와 17${\alpha}$20${\beta}$OHP를 사용하여 in vitro에서 농어의 배란유도효과를 관찰한 결과 사용한 모든 농도(17${\alpha}$20${\beta}$OHP : 1~1000ng/ml, HCG : 1~500IU/ml)에서 배란반응을 보였다. 특히 저농도 50ng/ml 또는 50IU/ml 이하로 처리하는 것이 더 효율적인 것으로 나타났다. 또한 HCG 처리가 17${\alpha}$20${\beta}$OHP보다 배란 반응에 더 민감하게 작용하는 것으로 생각된다.
동자개 난모세포의 성숙과 배란에 있어 스테로이드와 HCG(human chorionic gonadotropin)의 효과에 대한 실험이 in vitro에서 이루어졌으며, 난모세포들은 $17\alpha,\;20\alpha-dihydroxy4-pregnen-3-one\;(17\alpha\;20\alpha\;OHP),\;17\alpha-hydroxyprogesterone\;(17\alpha\;OHP),\;progesterone\;(P_4),\;estradiol-17{\alpha}E_2)$ 과 HCG가 첨가된 Leibovitz L15 배지에서 성숙되어졌다. 60시간 배양후에 난모세포의 성숙능력은 난핵포붕괴(germinal vesicle breakdown, GVBD) 비율에 의해 평가되었다. GVBD 비율은 $17\alpha\;20\alpha\;OHP,\;17\alpha\;OHP,\;P_4$ 그리고 HCG의 첨가에 의해 유의하게 (P<0.05) 증가하였으며, 그 중 $17\alpha\;20\alpha\;OHP$ HCG에서 가장 높은 GVBD 비율을 보였다. 난모세포들 $17\alpha\;20\alpha\;OHP,\;17\alpha\;OHP,\;P_4$가 $10\~1,000ng/ml$포함된 배지에서 16시간 배양한 결과, $17\alpha\;20\alpha\;OHP\;10\~100ng/m1(65\%)$의 GVBD 비율은 $17\alpha\;20\alpha\;OHP(40\%)$와 $P_4(35\%)$에서 보다 나은 효과를 보였다. GVBD유도에 대한 효과는 $17\alpha\;20\alpha\;OHP$에서 $10\~100\;ng/ml$배지, HCG를 첨가하여 60시간 배양한 배란유도 실험에서 $17\alpha\;20\alpha\;OHP\;10\~100ng/ml$에서, HCG는 $50\~500IU/ml$의 배지에서 배란율이 유의하게 증가하였다. 그러나 $17\alpha\;20\alpha\;OHP\;1,000ng/m1$와 HCG 5IU/ml의 배지에서는 대조구의 배란율과 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 $E_2$를 제외한 스테로이드와 HCG는 동자개의 난모세포 성숙과 배란을 in vitro에서 유도할 수 있으며, $17\alpha\;20\alpha\;OHP$와 HCG는 다른 스테로이드에 비해 높은 율의 난모세포 성숙과 배란을 유도하였다.
범가자미 난모세포의 최종성숙(GVBD=germinal vesicle breakdown) 유도를 위한 HCG (human chorionic gonadotropin)와 스테로이드 호르몬들의 효능 비교실험이 in vitro에서 이루어졌다. 실험에 사용한 스테로이드 호르몬, progestogens (progesterone, $17\alpha$-hydroxyprogesterone, $17\alpha$-hydroxy, $20\beta$-dihydroprogesterone)중에서는 $17\alpha$-hydroxy, $20\beta$-dihydroprogesterone ($17\alpha20{\beta}OHP$)이 매우 효과적으로 나타났으며, $17\alpha20{\beta}OHP$와 HCG와의 비교실험에서는 이들 모두 GVBD 유도에 효과적인 것으로 나타났다. 특히 $17\alpha20{\beta}OHP$는 저농도($10\~50$ ng/ml)에서도 효과적이며, HCG는 사용한 농도(50, 100, 500 IU/ml)사이에 유의한차를 보이지 않았다.
점농어의 난소성숙과 배란과정에서 생성되는 성 스테로이드 호르몬 특히, $C_{21}$-스테로이드를 분석하고자 전구물질 $^3H$-pregneolone와 $^3H$-$17\alpha$hydroxyprogesterone를 난소조직 배양초기에 첨가하여 24시간 배양 뒤 생성된 물질은 성숙기 난소 (난경 $700\sim800 \mu m$ )의 경우corticosteroids계의 호르몬과 $17\alpha20\beta OHP$가 관찰되었으나 $17\alpha20\beta OHP$만이 HPLC상에서 확인되었다 특히 배란중인 점농어에서는 $17\alpha20\beta OHP$, $17\alpha20\beta21P$그리고 corticosterone의 존재가 뚜렷하였다. 따라서 점농어에서는 난소의 성숙과 배란과정에 $17\alpha20\beta OHP$이 모두 관여하며, 배란에 이르면서 $17\alpha20\beta21P$의 출현이 뚜렷한 것으로 생각된다. corticosterone의 존재에 대해서는 이 물질이 점농 어의 배란과 관련이 있는지 또는 스트레스 조건에서 나타나는 순간적인 생성물인지 앞으로 더욱 상세한 분석방법으로 접근해야 할 부분이다.
To examine the production of steroids with potential oocyte maturation-inducing activity in the spotted flounder, Verasper variegatus, we have incubated post-vitellogenic oocytes (0.820.95mm in diameters) with radiolabeled pregnenolone and $17\alpha-hydroxyprogesterone$. The resulting metabolites were analyzed by thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC). The two main metabolites (progestogens) found in both incubations co-migrated with $17\alpha-hydroxy$, $20\alpha-dihydroprogesterone$$(17\alpha, 20\alpha OHP)$ and $17\alpha-hydroxy,\;$20\beta-dihydroprogesterone$ (17 a20{30HP). Additional chromatography by HPLC and TLC confirmed the presence of radioactive $17\alpha, 20\alpha OHP$ and a large amount of unknown metabolite. The present study did not reveal in vitro formation of $l7\alpha 20\beta OHP$. Although 1$l7\alpha 20\beta OHP$ was found in a small amount, the synthesis of this steroid suggests that it may play a role in regulating the oocyte maturation process in the spotted flounder.
The study was conducted to find out the changes of progesterone and 20$\alpha$-dihydroprogesterone (20$\alpha$-OHP) levels during the oestrous cycle in Korean native goats. 4 cyclic goats were offered for this experiment. Blood samples were taken from jugular vein on day 0, 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17 and 19 during the oestrous cycle, then the next oestrous day. The serum levels of progesterone and 20$\alpha$-OHP were measured by radioimmunoassay. The progesterone concentration in seurm of the cyclic goats was 0.29$\pm$0.06ng/ml on the first day of oestrous (day 0), increased to 5.29$\pm$0.73ng/ml on day 9, reached to a peak level of 5.73$\pm$0.61ng/ml on day 13, and thereafter decreased to 0.35$\pm$0.30ng/ml on day 1. The serum level of 20$\alpha$-OHP during the oestrous cycle was 0.42$\pm$0.33ng/ml on day 0 and then decreased to 0.28$\pm$0.01ng/ml on day 5. This basal level was maintained until day 13, increased gradually, and reached a peak level of 0.62$\pm$0.05ng/ml on day 19. From the above results, it was suggested that the enzyme 20$\alpha$-hydroxysteroid dehydrogenase(20$\alpha$-HSD) catalyzing the conversion of progesterone to a biologically inactive steroid, 20$\alpha$-OHP, should be active in the luteal cells during the oestrous cycle in Korean native goats.
경골어류의 난소 성숙 과정은 여포층에서 생성ㆍ분비되는 성 스테로이드 호르몬에 의해 조절된다. 성 스테로이드 호르몬 중에서도 C2l-스테로이드가 난소 성숙 과정에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며, 특히 20$\alpha$와 20$\beta$-hydroxy group을 가지고 있는 스테로이드, 17 $\alpha$-hyoxy, 20 $\alpha$-dihydroprogesterone (17 $\alpha$ 20 $\alpha$ OHP)과 17$\alpha$-hyoxy, 20$\beta$-dihydroprogesterone (17$\alpha$20$\beta$OHP)가 성숙유도에 가장 효과적인 것으로 보고하고 있다 (Canario and Scott, 1989; 1990). (중략)
The present study was conducted to find out the changes of progesterone and 20$\alpha$-dihydroprogesterone(20$\alpha$-OHP) levels during the gestation period in Korean native goats. 4 pregnant goats were offered for this experiment. Blood samples were taken from jugular vein on Day 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140 and 145 of the pregnant goats. The serum levels of progesterone and 20$\alpha$-OHP were measured by radioimmunoassay. The progesterone level in goat serum during the gestaton was low as 2.94$\pm$0.21 at 5 days, and then increased to 4.51$\pm$0.25ng/ml at 10 days of gestation and increased greatly from Days 60 and reached a peak level of 7.21$\pm$0.58ng/ml at 100 days of gestation, and thereafter decreased to 6.01$\pm$0.57, 5.26$\pm$0.64ng/ml on Days 130, 140 of gestation, and decreased to 4.05$\pm$0.52ng/ml on Days 145 of pregnancy. The serum level of 20$\alpha$-OHP during the gestation was low as 0.3~0.4ng/ml in the early stage of pregnancy, and increased gradually and increased to 0.85$\pm$0.06ng/ml, 0.97$\pm$0.08ng/ml on Days 90 or 100, and then increased to 1.18$\pm$0.18, 1.25$\pm$0.21ng/ml on Days 140 or 145 of gestation. While the serum levels of progesterone during the luteal regression decreased, the 20$\alpha$-OHP increased continuously. From the above results, it was concluded that the enzyme 20$\alpha$-hydroxysteroid dehydrogenase (20$\alpha$-HSD) catalyzing theconversion of progesterone to a biologically inactive steroid, 20$\alpha$-OHP was active properly in the luteal cells what the levels of progesterone decreased and the levels of 20$\alpha$-OHP increased during the late pregnancy in Korean native goats.
This study was conducted to find out the changes of progesterone and 20$\alpha$-dihydroprogesterone(OHP) levels in the serum of female rats by progesterone-tube implantation during late pregnancy. One hundred and twenty rats, 10-13 weeks old, were offered for this experiment. Blood samples were taken from the rats on 18, 20, 21 and 22days of pregnancy. The rats were implanted with silicon tubes filled with pregesterone on day 15 of pregnancy. The progesterone and 20$\alpha$-OHP in serum were assayed by radioimmunoassay. The results obtained are summarized as follows : 1. The progesterone levels in rats of control group showed 126.36$\pm$20.19ng/ml on 18days and gradually decreased to 69.3$\pm$11.9, 29.2$\pm$1.8ng/ml 20 and 21 days. 2. The progesterone levels after progesterone-tube implantation showed 120.1$\pm$8.5, 59.01$\pm$3.1, 85.33$\pm$17.9 and 62.9$\pm$6.1ng/ml on 18, 20, 21 and 22days of pregnancy, respectively. 3. The 20$\alpha$-OHP levels in rats of control group showed 68.5$\pm$8.0ng/ml on 18 days and gradually increased to 139.9$\pm$3.7 and 141.4$\pm$6.7ng/ml on 21 and 22days. 4. The 20$\alpha$-OHP levles after progesterone-tube implantation showed 108.5$\pm$32.7 and 106.4$\pm$10.6ng/ml on 18 and 20days and increased to reach the peak level at 21days(225.01$\pm$9.9ng/ml) and rapidly decreased on 22days(85.9$\pm$10.7ng/ml).
The present study was conducted to find out the changes of progesterone and 20$\alpha$-dihydroprogesterone(20$\alpha$-OHP) levels before and after parturition, 4 pluriparous goats were offered for this experiment. Blood samples were taken from jugular vein on Days, 5, 3, 2 and 1 before parturition, the day of parturition, 1, 3, 5, 7 and 9 after parturition. The blood samples were centraifuged and stored at -2$0^{\circ}C$ until hormone assay. The serum levels of progesterone and 20$\alpha$-OHP were measrued by radioimmunoassay. The changes of serum progesterone level during peripartum period were characterized as a remarkable decrease. The progesterone level was 4.05$\pm$0.52ng/ml on 56 days before parturition and decreased to 2.24$\pm$0.38ng/ml on 1 day before parturition and 0.79$\pm$0.09ng/ml on the day of parturition and the basal level was maintained through 9 days of postpartum period. The serum level of 20$\alpha$-OHP during the peripartum period was 1.25$\pm$0.21ng/ml on 5 days before paturition and increased to 1.32$\pm$0.25 on 3 days and 1.59$\pm$0.24ng/ml on 1 day before parturition, and reached a peak level of 1.78$\pm$0.25ng/ml just prior to parturition and then decreased greatly to 0.31$\pm$0.03ng/ml on 1 day postpartum and the basal level was remained until 9 days postpartum. The high serum level of 20$\alpha$-OHP, which was peak just prior to parturition, was maintained for 2 days following the onset of remarkable decrease in the serum level of progesterone. From the above results, it was concluded that the enzyme 20$\alpha$-hydroxysteroid dehydrogenase (20$\alpha$-HSD) catalyzing the conversion of progesterone to a biologically inactive steroid, 20$\alpha$-OHP was active properly in the luteal cells in Korean native goats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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