In order to study the effect of Ontoyuklin-Tang (溫土毓麟湯), applied to cold of deficiency type sterility (虛)寒不姙) in women a series of expriments were conducted on the mouse regarding the in vitro developmental effect of I-cell embryos of the medium of Ontoyuklin- Tang, the ovulationin once a day of two-days, once a day for four-days, once every two-days irregualry for six-days after administered the drug orally, the change of weight, the in vitro developmental effect of 1-cell embryos and the level of serum of LH, FSH, Estradiol $17-{\beta}$, Progesterone in mouse. The results were following. 1. The culture medium of the drug was not significantly increased in the number of zygotes and in vitro development of embryos. 2. The ovum of the mouse during ovulation, was increased by the administered drug, when treated once a day for two-days in comparison to once a day for four-days & once every two-days for six-days. 3. The level of weight of the mouse was not significantly increased after administering the drug in comparison to administering water. 4. The production of zygotes in the mouse was significantly increased after the drug was administered, but the effect of in vitro developmental effect on embros has a tendency to decrease. 5. The levels of serum LH and FSH in the mouse were not significantly increased after the drug administered, and the level of serum. Estradiol $17-{\beta}$ of mice was few increased in a very small amaunt, but the level of the serum Progesterone of mice was significantly increased.
The present study was carried out to study the serum concentration of peptide and steroid hormones in puerperal sow. Eight crossbred sows were used for collection of blood samples from day 20 prepartum to day 20 postpartum. FSH, LH, prolactin, estradiol-$17{\beta}$, progesterone and cortisol were assayed by radioimmunoassay methods. The mean serum FSH did not vary during the puerperal period and ranged from $8.1{\pm}1.8mIU/ml$ to $9.0{\pm}2.3mIU/ml$. LH concentrations increased from $2.6{\pm}0.3mIU/ml$ at day 20 prepartum to $3.9{\pm}1.1mIU/ml$ at the time of parturition, reached $3.2{\pm}0.9mIU/ml$ by day+2 and remained quite constant therafter. Prolactin reached a peak mean level of $68.5{\pm}9.5ng/ml$ at day 0. Estradiol-$17{\beta}$ increased from $205.0{\pm}29.5pg/ml$ at day 6 prepartum to $425.0{\pm}35.0pg/ml$ at the time of parturition. Progesterone remained fairly constant ($18.4{\pm}1.6$ to $20.2{\pm}2.1ng/ml$) from 20 to 6 days before parturition, began to decline on day-2, reached $0.9{\pm}0.3ng/ml$ by day+2 and remained quite constant thereafter. Cortisol reached a peak level of $86.5{\pm}10.5ng/ml$ at the day 0.
본 연구의 목적은 한우 난포발달에 있어서 난포액 및 anti-inhibin serum의 생리적 역할을 검토하기 위해 수행하였다. Anti-inhibin serum(AI)은 항원으로서 porcine inhibin-$\alpha$-subunit 19~32의 peptide를 사용하여 adjuvant 용액을 1:3의 비율로 혼합하여 앙고라종 토끼 5두(체중 2.5kg)에게 주 2회 간격으로 접종 후 얻어진 항혈청을 사용하였다. 난포액(bFF; bovine follicular fluid)은 도축장에서 도축되는 한우 난소로부터 직경 1.0cm 이하의 난포로부터 회수하여 스테로이드를 제거하기 위해 10% chacoal so lution(50 mg/$m\ell$, Norrit-A, Fisher Sci., USA)을 처리하여 45분간 배양후 원심분리후 상층액을 회수하여 실험에 공시하였다. 공시동물은 1산후 정상적으로 발정주기가 반복되는 한우암소 9두를 난소감정후 황체를 확인하여 PGF2$\alpha$제제(lutylase. USA)를 주사하여 발정을 유기한 다음, 난소의 first wave가 시작되는 시기인 배란직후 12시간째부터 4일간 일일 2회 5 $m\ell$씩 총 8회 40 $m\ell$의 AI와 bFF를 각각 경정맥으로 주사하였으며 대조구로서 생리식염수를 주사하였으며 채혈 및 정맥주사를 용이하게 하기 위해 경정맥에 카테타를 설치하여 6시간간격으로 총 200시간까지 채혈하였으며 초음파진단기를 이용하여 난포의 발달을 검토하였다. 채혈후 혈중Inhibin, progesterone 및 Estrad iol-17$\beta$농도의 분석은 RIA 및 ELISA법으로 분석하여 얻어진 결과는 다음과 같다. 혈중 Progesterone농도는 대조구와 AI처리구에서는 배란후 68시간째부터 유의적으로 증가하기 시작하였으나, bFF처리구에서는 배란후 68시간부터 170시간까지 대조구에 비해 유의적으로 낮은 농도를 나타내었다. 이에 반해 혈중 Estradiol-17$\beta$농도는 대조구의 경우 bFF처리구와 비슷한 수준으로 배란후부터 낮은 농도를 유지하였으나, AI 처리구는 배란후 36시간이후부터 108시간까지 유의적으로 높은 수준을 유지하였다가 그 이후 감소되었다. 한편, 혈중 Inhibin농도는 전 구간에서 배란후 84시간까지 불규칙한 농도를 보이다가 bFF처리구에서는 배란후 84시간부터 유의적으로 증가하였다. 배란후 72시간째에 초음파진단기를 이용하여 난소의 난포발달을 조사한 결과 , 대조구와 bFF처리구에 비해 AI처리구에서 발달난포가 유의적으로 많은 것을 확인하였다. 이상과 같은 결과로, Anti-inhibin serum은 한우 자체에서 분비하는 Inhibin을 특이하게 억제하여 Inhibin에 의해 억제되는 FSH분비가 촉진됨으로써 난포발달과 estrogen의 농도가 촉진되는 것으로 사료되어 anti-inhibin serum이 한우의 과배란유기 효과가 있는 것으로 사료된다.
This study was performed to investigate the patterns of progesterone secretion after induction of estrus in premature, metestrous and anestrous bitches. A total of 22 bitches were used. Of them 18 bitches were treated with hormone to induced estrus and 4 bitches were untreated and served as controls. Estrus was induced with $PGF_{2{\alpha}}$, estrone, estradiol-$17{\beta}$, PMSG and HCG(Treatment A), and with PMSG and HCG(Treatment B). Blood samples were collected via the cephalic vein at 2 to 5 days interval. Blood samples were centrifuged (1,200g, 10min.) within 30 minutes after collection and plasma was stored at $-20^{\circ}C$ until analyzed for the progesterone concentrations. Plamsa progesterone concentrations were measured by radioimmunoassay. The results of estrous induction were determined by estrous signs, ovarian response, egg recovery and progesterone patterns. The results obtained were as follows; 1. All bitches in treatment A showed estrous signs, however the ovarian response and egg recovery were not detectable and the levels of progesterone were nearly same as before. 2. In the treatment B, premature and metestrous bitches showed only estrous signs, however 5 of 7 anestrous bitches (71.4%) showed estrous signs, ovarian response and changes of progesterone levels. In conclusion, clinical estrous behavior can be induced during any phase of the estrous cycle, but ovulation should be induced only if induction occur approximately 4 months or more after the previous estrus.
Behavioural estrus and short estrous cycles were observed and serum concentrations of estradiol-17$\beta$(E2) before and after of estrous were measured following superovulation treatments in 30 pluriparous Korean native goats. The goats were divided into 2 groups. Fifteen goats were injected IM with 1,000IU PMSG on Day 12 of the estrous cycle followed by 10mg PGF2$\alpha$ 48h later(P4+PMSG), and the other 15 goats were injected IM with 10mg progesterone(P4)in oil once daily for 10d beginning at any days of estrous cycle followed by 1,000IU PMSG and 10mg PGF2$\alpha$ at the 8th day of progesterone treatment(P4+PMSG group). After injection of PGF2$\alpha$, onset of standing estrus occurred in 12 of 15 goats(80.0%) at 50.0$\pm$7.7h and in 11 of 15 goats(73.3%) at 135.6$\pm$10.1h in PMSG and group and P4+PMSG group, respectively. The mean interval from PGF2$\alpha$ injection to first estrus was significantly(P<0.01) earlier in PMSG group than in P4+PMSG group. This result indicate that the delayed infusion of P4 in P4+PMSG group caused the later exhibition of their estrous behaviors. However, duration fo frist estrus(31.5$\pm$2.6h vs 26.2$\pm$2.3h), length of estrous cycle(14.1$\pm$3.3d vs 16.6$\pm$3.8d) and percentage of short estrous cycle(50.0% vs 45.5%) were not different between PMSG and P4+PMSG group. The mean concentration of serum E2 in 4 goats showing normal estrous cycle in P4+PMSG group(PP-NEC) was higher than in 6 goats showing normal(P-NEC) or in 6 goats showing short estrous cycle(P-SEC) in PMSG group. The peak level of serum E2 was observed at the time of onset of standing estrus in PP-NEC(67.6pg/ml), 6h earlier in P-NEC(53.1pg/ml) and 6h later in P-SEC(52.3pg/ml) than the onset of standing estrus. The profiles of serum concentration of E2 during the period of peri-estrus was similar in the goats of PMSG or P4+PMSG and also in the goats showing the subsequent estrous cycle of normal or short length.
The purpose of this experiment was to investigate the effects of adrenalectomy and PMSG treatment on reproductive organs and serum steroid hormone level in immature female rats. The animals used in this experiment were 25 days old female rats weighing a, pp.oximately 70g. They were randomly divided into two groups of intact rat group (Int-) and adrenalectomized rat group (Adx-) and each group were subdivided into two groups of Non-PMSG (-Cont) and PMSG treated (-PMSG) group. The rat of PMSG-treated group (-PMSG) was administered subcutaneously with 25 IU PMSG on first day (9 a.m.) after adrenalectomy. The adrenalectomized rat groups were su, pp.ied with saline solution through the experiment period. The rate of ovulation and vaginal opening and reproductive organ weights were observed at 8, 32, 56, 80 and 104 hours after PMSG treatment. At the same time, the serum level of estradiol-17${\beta}$ and progesterone were measured by the radioimmunoassay. The results obtained were as follows: 1. Ovulation was shown at 56 hours after treatment in Int-PMSG group and Adx-PMSG group and Adx-PMSG group. The rate of ovulation was very low in PMSG-treated groups, but it was increased in 80 to 90% at 104 hours after treatment. However, there was no ovulation in Int-Cont group and Adx-Cont group. 2. Vaginal opening was shown at 56 hours after treatment in Int-PMSG group and Adx-PMSG group and a, pp.ared in 80% at 104 hours after treatment. The rate of vaginal opening in PMSG-treated groups was very low, but Int-Cont group and Adx-Cont group had no vaginal opening. 3. The weight of ovary and uterus in two PMSG-treated groups were increased with the elapse of time after treatment and were significantly heavy in all observation time, but changes in Int-Cont group and Adx-Cont group were not recognized. The weights of ovaries and utera in Adx-Cont group were increased with the elapse of time. 4. The level of serum estradiol-17${\beta}$ was remarkably increased in PMSG-treated groups (Int-PMSG and Adx-PMSG groups) compared with Int-Cont and Adx-Cont group, and significant difference was recognized between Non-PMSG group and PMSG-treated group in the experimental period. Especially, the highest levels of Int-PMSG groups and Adx-PMSG groups were shown at 80 and 56 hours after treatment and after ward estradiol-17${\beta}$ levels of PMSG-treated groups were decreased. However, changes of the levels did not a, pp.ared in Non-PMSG groups at 104 hours after treatment. 5. The level of serum progesterone in PMSG-treated groups was significantly increased between 80 and 104 hours after treatment. With the elapse of time, the level was increased in all observed groups except for Int-Cont and Adx-Conx group. And the order from the highest level at 104 hours after treatment was Int-PMSG, Adx-PMSG, Int-Cont and Adx-Cont group.
This study was performed to analyze the characterization of plasma hormonal levels during pregnancy in the Hanwoo recipients pregnant by artificial insemination (AI) or somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. The synchronized recipients pregnant by SCNT embryos produced by Hanwoo fetal fibroblast cells (n=8) and by AI (control, n=5) were used. The plasma hormonal levels were measured by RIA (P4 and E2) and ELISA (cortisol), respectively. In control, the increase of E2 and the decrease of P4 were occurred immediately before the initiation of parturition. The expression pattern of plasma P4 was similar in both groups from 50 to 10 days before parturition, however, it did not decrease even at the expected date of labor in the SCNT recipients. The plasma cortisol was expressed a lower level during pregnancy in the SCNT recipients. But, the cortisol was increased in the cow aborted around 100 days of pregnancy (n=1). Based on these results, it can be postulated that the failure of the hormonal changes immediately before parturition in the SCNT recipients may be one of the most important reasons for a delayed parturition in clone calving.
NUCB2/nesfatin-1 known to regulate appetite and energy homeostasis is expressed not only in the hypothalamus, but also in various organs and tissues. Our previous reports also demonstrated that NUCB2/nesfatin-1 was expressed in the reproductive organs, including the ovaries, uterus, and testes of mice. However, it is yet known whether NUCB2/nesfatin-1 is expressed in the oviduct and how its expression is regulated. Therefore, we investigated the expression of NUCB2/nesfatin-1 in the oviduct and its expression is regulated by gonadotropin. Immunohistochemical staining results showed that nesfatin-1 protein was localized in epithelial cells of the oviduct. As a result of quantitative real-time PCR (qRT-PCR) and Western blot, NUCB2/nesfatin-1 was detected strongly in the oviducts. During the estrus cycle, NUCB2/nesfatin-1 expression in the oviducts was markedly higher in the proestrus stage than in other estrus stages. In order to elucidate whether the expression of NUCB2 mRNA is controlled by the gonadotropins, we injected PMSG and hCG and measured NUCB2 mRNA level in the oviduct after injection. Its level was increased in the oviduct after PMSG injection, but no significant change after hCG injection. In addition, NUCB2 mRNA levels were markedly reduced after ovariectomy, while recovered after 17β-estradiol (E2) injection, but not by progesterone (P4). This study demonstrated that NUCB2/nesfatin-1 is highly expressed in the oviduct of mouse and its expression is regulated by E2 secreted by the ovaries. These results suggest that NUCB2/nesfatin-1 expressed by the oviduct may affect the function of the oviduct regulated by the ovaries.
The aim of this study was to determine the effect of steroids and human chorionic gonadotropin (HCG) on in vitro maturation and ovulation of oocyte in Pseudobagrus fulvidraco. Oocytes were incubated in the media Leibovitz L15 supplemented with the various concentration of $17\alpha,\;20\beta-dihydroxy-4-pregnen-3-one(17\alpha20{\beta}OHP),\;17\alpha-hydroxyprogesterone(17{\alpha}OHP),\;progesterone(P_4),\;estradiol-17\beta(E_2)and\;HCG$. After 60 hours incubation, the maturation ability of oocyte was assessed by the appearance of germinal vesicle breakdown (GVBD). GVBD was significantly enhanced by the addition of $17\alpha20{\beta}OHP,\;17{\alpha}OHP,\;P_4\;and\;HCD(P<0.05)$. The highest CVBD was observed when $17\alpha20{\beta}OHP$ and HCG were supplemented to media. When oocytes were cultured for 16 hours in media containing $10\~1,000\;ng/ml\;17\alpha20{\beta}OHP,\;17{\alpha}OHP\;and\;P_4$, the rate of GVBD in oocytes cultured in the medium supplemented with 100 ng/ml $17\alpha20{\beta}OHP(65\%)$ was significantly higher than that with $17{\alpha}OHP\;(40\%)\;and\;P_4(35\%)$. The efforts of $17\alpha20{\beta}OHP$ and HCG on GVBD were assessed by various concentration of these hormones. When oocytes were cultured for 60 hours in various media containing $1\~1,000\;ng/ml\;17{\alpha}20{\beta}OHP\;or\;5\~1,000\;IU/ml$ HCG, the GVBD of oocytes was significantly increased in the medium with $10\~100\;ng/ml\;17\alpha20{\beta}OHP$ and 500 IU/ml HCT. When oocytes were cultured in the various media supplemented with $1\~1,000\;ng/ml\;17\alpha20{\beta}OHP\;or\;5\~1,000\;IU/ml$ HCG for 60 hours, the media with $1\~100\;ng/ml\;17\alpha20{\beta}OHP\;or\;50\~1,000IU/ml$ HCG significantly increased in the rate of ovulation. However supplementation with $1,000\;ng/ml\;17\alpha20{\beta}OHP$or 5 IU/ml HCG did not improve the rate of ovulation compared to controls. This results indicate that supplementation of steroid and HCG except $E_2$ can improve the in vitro maturation and ovulation of oocyte in P. fulvidrac; HCG and $17\alpha20{\beta}OHP$ may be more effective than other steroids on oocyte maturation and ovulation in P. fulvidraco.
Growth hormone (GH) is obligatory for growth and development. But, there is controversy on the GH effect about reproductive processes of sexual differentiation, pubertal maturation, gonadal steroidogenesis, gametogenesis and ovulation. This study was conducted to investigate the effect of GH on estrus, ovulation and embryo implantation. The results obtained were as follows. GH stimulated to increase estrus rate (p<0.05), pregnancy rate (p<0.05), and total fetus number in mice treated for superovulation. Also, the correlation between GH and steroids, E2 and P4, at peri-estrus stage/ peri-ovulation stage/ peri-implantation stage of the superovulation-induced mice was examined. Consequently, GH co-injected with PMSG especially increased P4 level (p<0.05) at peri-estrus stage of superovulationinduced mice. In conclusion, GH co-treatment in superovulation system boosted the rate of estrus, pregnancy and total fetus by increasing progesterone level at peri-estrus stage of superovulation-induced mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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