Kim, Chung-Hoon;Cheon, Yong-Pil;Lee, You-Jeong;Lee, Kyung-Hee;Kim, Sung-Hoon;Chae, Hee-Dong;Kang, Byung-Moon
Development and Reproduction
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v.17
no.3
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pp.269-274
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2013
This study was performed to evaluate the effects of fibroblast co-culture on in vitro maturation (IVM) of prepubertal mouse preantral follicles. The intact preantral follicles were obtained from the ovaries of 12-14 day old mice and these were cultured individually in ${\alpha}$-minimal essential medium (${\alpha}$-MEM) supplemented with 5% fetal bovine serum (FBS), $100mIU/m{\ell}$ recombinant follicle stimulating hormone (rFSH), 1% insulin-transferrin-selenium, $100{\mu}g/ml$ penicillin and $50{\mu}g/m{\ell}$ streptomycin as base medium for 12 days. A total of 200 follicles were cultured in base medium co-cultured with mouse embryonic fibroblast (MEF) (MEF group) (n=100) or only base medium as control group (n=100). Survival rate of follicles on day 12 of culture were significantly higher in the MEF group of 90.0%, compared with 77.0% of the control group (p=0.021). Follicle diameters on day 6 and 8 of the culture period were significantly larger in the MEF group than those in the control group (p=0.021, p=0.007, respectively). Estradiol levels in culture media on day 4, 6, 8, 10 and 12 of the culture period were significantly higher in the MEF group (p=0.043, p=0.021, p=0.006, p<0.001 and p=0.008, retrospectively). Our data suggest that MEF cell co-culture on IVM of mouse preantral follicle increases survival rate and promotes follicular growth and steroid production.
Early development growth and sexual phenomena of the hybrid between male spotted flounder (Verasper variegatus) and female olive flounder (Paralichthys olivaceus) were investigated. The hybrid produced was newly called the "Bumnupchi" in Korean name, "Mottled flounder" in English name. Fertilization rate, hatching rate and early survival rate of the mottled flounder were 56.9~72.3%, 86.7~92.5% and 89.1~96.0%, respectively. At 50th day and 240th day after hatching, they were 2.1$\pm0.2cm\;and\;22.9\pm2.1cm\;in\;total\;length, \;0.10\pm0.002g\;and\;179.0\pm38.5g$ in body weight, respectively. Eye position of the mottled flounder was mixed with both dextral (77.7%) and sinistral type (22.3%). Gonads were differentiated into ovarian type and testis type at 80th day after hatching, and its ratio was 1:1 (P>0.05). Most Gonads seemed to be sterile without having germ cell, whereas only 3.6% of investigated indiciduals turned out to have oocytes in the gonad. When the induction of sex reversal were attempted by daily oral administration of $17\beta$-methyltestosterone (0.5mg/kg fish) andestradiol-17$17\beta$(0.5mg/kg fish)from 40th to 100th day after hatching, both testis and ovary type were induced 81.9% and 87.7% of each hormone-treated fish, respectively.fish, respectively.
Larrea nitida is a plant that belongs to the Zygophyllaceae family and is widely used in South America to treat inflammatory diseases, tumors and menstrual pain. However, its pharmacological activity remains unclear. In this study we evaluated the property of selective estrogen receptor modulator (SERM) of Larrea nitida extracts (LNE) as a phytoestrogen that can mimic, modulate or disrupt the actions of endogenous estrogens, depending on the tissue and relative amount of other SERMs. To investigate the property of SERM of LNE, we performed MCF-7 cell proliferation assays, estrogen response element (ERE)-luciferase reporter gene assay, human estrogen receptor (hER) binding assays and in vivo uterotrophic assay. To gain insight into the active principles, we performed a bioassay-guided analysis of LNE employing solvents of various polarities and using classical column chromatography, which yielded 16 fractions (LNs). LNE showed high binding affinities for $hER{\alpha}$ and $hER{\beta}$ with $IC_{50}$ values of $1.20{\times}10^{-7}$ g/ml and $1.00{\times}10^{-7}$ g/ml, respectively. LNE induced $17{\beta}$-estradiol (E2)-induced MCF-7 cell proliferation, however, it reduced the proliferation in the presence of E2. Furthermore, LNE had an atrophic effect in the uterus of immature rats through reducing the expression level of progesterone receptor (PR) proteins. LN08 and LN10 had more potent affinities for binding on $hER{\alpha}$ and ${\beta}$ than other fractions. Our results indicate that LNE had higher binding affinities for $hER{\beta}$ than $hER{\alpha}$, and showed SERM properties in MCF-7 breast cancer cells and the rat uterus. LNE may be useful for the treatment of estrogen-related conditions, such as female cancers and menopause.
Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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v.26
no.5
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pp.935-940
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2014
To investigate effect of on sexual maturation in spotted seabass, Lateolabrax maculatus the sexual maturation, photoperiods were established to natural photoperiod, 9L:15D, 11L:13D, 13L:11D and 15L:9D. After rearing for 90 days from August 11 to November 10, gonadosomatic index (GSI) and hormones were analyzed. In the female, GSI was $1.07{\pm}0.09%$ in the natural photoperiod, $1.93{\pm}0.06%$ in 9L:15D, while the GSI of male was $0.75{\pm}0.05%$ in the natural photoperiod, $1.89{\pm}0.12%$ in 9L:15D and $0.22{\pm}0.05%$ in 15L:9D and the lowest in 15L:9D, respectively. The blood estradiol (E2) of female was $226.0{\pm}13.6pg/ml$ in the natural photoperiod, and the highest value of $296.3{\pm}15.0pg/ml$ in 9L:15D. The male $17{\alpha}20{\beta}OHP$ was similar to the female with $196.3{\pm}17.0pg/ml$ in the natural photo period and $133.0{\pm}15.5pg/ml$ in 9L:15D. The testosterone (T) of male was $259.3{\pm}33.1pg/ml$ in the natural photoperiod, but the hightest value of $370.5{\pm}27.5pg/ml$ in 9L:15D. These results provide basic information from sexual maturation of spotted seabass.
The present study was carried out to investigate the estrous behavior and vaginal smear after induction of estrus with exogenous hormones in the premature, metestrous and anestrous bitches. A total of 21 bitches(Mixed breed: 16, Jindo breed: 5), from 10 months to 5 years of age and weighing 8 to 15 kg was studied the change of vaginal smear and the estrous behavior before and after induction of estrus. The results obtained are as follows: 1. In the treatment A(They were given the $PGF_2{\alpha}$, estrone, estradiol-$17{\beta}$, PMSG and HCG) proestrus commenced in $10.16{\pm}1.44$($Mean{\pm}SEM$) days after treatment, The mean duration of proestrus, and estrus was $7.50{\pm}1.44$ and $13.50{\pm}3.44$ days, respectively. In the treatment B(They were given the PMSG and HCG) proestrus commenced in $5.53{\pm}0.59$ days after treatment. The mean duration of proestrus and estrus was $6.60{\pm}0.71$ and $14.60{\pm}1.14$ days, respectively. 2. All of the 6 bitches in the treatment A showed vulval swelling and vaginal discharge, 14 of the 15 bitches in the treatment B showed vulval swelling and vaginal discharge. However, all of the treatment A and B showed male acceptance. 3. The main change of vaginal smear in proestrus and estrus after induction of estrus was a increase in the proportion of anuclear and superficial cells associated with a decrease in small intermediate and parabasal cells. By the estrous behavior and vaginal smear the estrus was induced in all the premature, metestrous and anestrous bitches.
This study was performed to investigate the patterns of progesterone secretion after induction of estrus in premature, metestrous and anestrous bitches. A total of 22 bitches were used. Of them 18 bitches were treated with hormone to induced estrus and 4 bitches were untreated and served as controls. Estrus was induced with $PGF_{2{\alpha}}$, estrone, estradiol-$17{\beta}$, PMSG and HCG(Treatment A), and with PMSG and HCG(Treatment B). Blood samples were collected via the cephalic vein at 2 to 5 days interval. Blood samples were centrifuged (1,200g, 10min.) within 30 minutes after collection and plasma was stored at $-20^{\circ}C$ until analyzed for the progesterone concentrations. Plamsa progesterone concentrations were measured by radioimmunoassay. The results of estrous induction were determined by estrous signs, ovarian response, egg recovery and progesterone patterns. The results obtained were as follows; 1. All bitches in treatment A showed estrous signs, however the ovarian response and egg recovery were not detectable and the levels of progesterone were nearly same as before. 2. In the treatment B, premature and metestrous bitches showed only estrous signs, however 5 of 7 anestrous bitches (71.4%) showed estrous signs, ovarian response and changes of progesterone levels. In conclusion, clinical estrous behavior can be induced during any phase of the estrous cycle, but ovulation should be induced only if induction occur approximately 4 months or more after the previous estrus.
Recent studies have been reported the presence of Endocrine Disrupting Compounds, Pharmaceuticals and Personal Care Products (EDC/PPCPs) in surface and wastewater, which could potentially affect to the complicate behavior in coupled presence of nano-colloid particles and surfactants (adsorption, dispersion, and partitioning). In this study, the adsorption of EDC/PPCPs by Single Walled Carbon Nanotubes (SWNTs) as a representative of nano-particles in cationic surfactant solutions were investigated. Hydrophobic interactions (${\pi}-{\pi}$ Electron Donor-Acceptor) have been reported as a potential adsorption mechanisms for EDC/PPCPs onto SWNTs. Generally, the adsorptive capacity of the relatively hydrophobic EDC/PPCPs onto SWNTs decreased in the presence of cationic surfactant (Cetyltrimethyl Ammonium Bromide, CTAB). This study revealed that the competitive adsorption occurred between CTAB cations and EDC/PPCPs by occupying the available SWNT surface (CTAB adsorption onto SWNTs shows five-regime and maximum adsorption capacity of 370.4 mg/g by applying the BET isotherm). The adsorption capacity of $17{\alpha}$-ethinyl estradiol (EE2) on SWNT showed the decrease of 48% in the presence of CTAB. However, the adsorbed naproxen (NAP) surely increased by forming hemimicelles and resulted in a favorable media formation for NAP partition to increase SWNTs adsorption capacity. The adsorbed NAP increased from 24 to 82.9 mg/g after the interaction of CTAB with NAP. The competitive adsorption for EDC/PPCPs onto SWNTs is likely to be a key factor in the presence of cationic surfactant, however, NAP adsorption showed a slight competition through $CH_3-CH_3$ interaction by forming hemimicelles on SWNT surface.
The purpose of the present study was to produce live offspring from in vitro fertilized goat embryos. Oocytes were collected from abattoir ovaries and kept in oocyte collection medium. Oocytes were washed 4-5 times with maturation medium containing medium-199 with 5 ${\mu}g/ml$ FSH, 100 ${\mu}g/ml$ LH, 1 ${\mu}g/ml$ estradiol-$17{\beta}$ 50 ${\mu}g/ml$ gentamycin, 10% inactivated estrus goat serum, and 3% BSA (fatty acid free). Oocytes were placed in 100 ${\mu}l$ drops of maturation medium containing granulosa cell monolayer and incubated in a 5% $CO_2$ incubator at $38.5^{\circ}C$ for 27 h. For capacitation of spermatozoa fresh semen was processed and mixed in 3 ml fertilization TALP medium containing 50 ${\mu}g/ml$ heparin and kept in the above incubator for 2 h. The capacitated spermatozoa were coincubated with matured oocytes for fertilization. Cleaved embryos were separated and cultured in embryo development medium with oviductal cells and 494 embryos were produced. Recipient goats were synchronized with two injections of 15 mg $PGF_{{2}{\alpha}}$/goat 10 days apart. Eighty early stage embryos were transferred into the uterotubal junction of 14 surrogate mothers using laparoscopy techniques. One recipient delivered twin kids, whereas another two recipients each.delivered a single kid The parentage of these kids was evaluated using highly polymorphic co-dominant microsatellites markers. From the present study, it was concluded that live goat kids can be produced from in vitro matured and fertilized goat embryos, to the best of our knowledge for the first time in India.
Background : Although chronic non-bacterial prostatitis is increasing, it is hard to treat effectively. In western medicine, antimicrobials drug, ${\alpha}$-adreno-ceptor antagonists, anti-inflammatory drugs, tricyclic antidepressants and anticholinergic agents are used commonly, but chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes is confusing and frustrating for urologist. IDS(Indongsoyeom-bang) is used in treatment of chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndromes. And it is reported that GLS(Gleditsiae spina) and TOF(Toosendan fructus) components of IDS have significant effect on protection of the glandular epithelial cells. Objective : In this study was conducted to investigate the therapeutic effects and action machanism of IDS in the rat model of non-bacterial prostatitis induced by castration and testosterone treatment. Methods : We observed six experimental objects of normal group, control group, testosterone group, and IDS 50 mg/kg, 200mg/kg, 400mg/kg group. Rats were treated with 17 ${\beta}$-estradiol after castration for induction of experimental non-bacterial prostatitis, which is similar to human chronic prostatitis in histophatological profiles. IDS and testosterone were administered as an experimental specimen and a positive control, respectively. The prostates were evaluated by histological parameters including the epithelial score and epithelio-stromal ratio for glandular damage. Also, the prostates were observed by Hematological alterations of WBC, RBC, hemoglobin and platelet. Results : While prostates of control rats revealed severe acinar gland atrophy and stromal proliferation, the rats treated with IDS-50 showed a diminished range of the tissue damage. Epithelial score was improved in IDS than that of the control. The epithelio-stromal ratio was lower in IDS when compared to that of the control. Also, the examination of bloods were not observed hematological change. Conclusion : These finding suggests that IDS may protects the glandular epithelial cells. We concluded that IDS could be a useful remedy agent for treating chronic non-bacterial prostatitis.
This study was carried out to determine the blood and milk progesterone by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and milk urea nitrogen (MUN) in cows. MUN and protein concentration were determined using automated infared procedures. The optimum conditions of ELISA system was investigated including the first and second antibody titres, bound percent, and enzyme conjugate and also the factors on MUN and protein concentration by sampling procedures and addition of preservatives. Progesterone antibodies did not react to pregnenlone, testosterone, estrone, estradiol-l7$\beta$, aldosterone, cortisol, corticosterone and 11$\alpha$-dehydroxycortisone (DOC), but reacted with only progesterone. The intra and inter-assay coefficient of variation 4.5%, 6.1~9.4% when used of bovine serum. The morning, MUN concentration (17.6$\pm$2.8 mg/100 ml) in the 13 herds was similar to that of evening MUN concentration of the lactating cows from the same herd. A significant relationship between morning and evening milk samples of upper parameters was found r=0.93. Difference in MUN concentration with sampling procedures and using of preservatives were investigated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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