The sequence of a 1795 bp restriction fragment containing the B. circulans F-2 gene for NaC1- dependent $\alpha$-amylase (CI-amylase) is reported. The probable coding region of the gene is 1005 base pairs (335 amino acida) long. The NaC1-dependent $\alpha$-amylase (el-amy) sequence shows an open reading frame (ORF) with the translated molecular weight of about 38, 006, which correspond to a molecular weight of about 35, 000 (Mi). The gene is preceded by the sequence resembling promoter for the vegetative B, subtitis RNA polymerases. These are followed by the sequences resembling a B. subtilis ribosome binding site 5 nucleotides before the first codon of the gene. Homologous regions with other amylases were found. The N-terminal sequences of the mature proteins expressed in E. eoli were identical to the N-terminal sequences which are anaIysed.
In order to improve the qualities of red ginseng extract and decrease precipitate formation in ginseng drink, red ginseng extract were hydrolyzed with ${\alpha}$-Amylase and characteristics of the hydrolyzed ginseng extract were investigated. 1.08% of isomaltose were produced and glucose content was increased from 2.83% to 11.03% in the hydrolyzed red ginseng extract. Total ginsenoside content of the hydrolyzed ginseng extract were decreased from 1,661 mg/100g extract to 1,389 mg/100g extract. The hydrolyzed ginseng extract enhanced the growth of Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus helveticus. Bitterness and astringency of the hydrolyzed ginseng extract were lower than those of the ginseng extract Precipitate formations in ginseng drink prepared with the hydrolyzed ginseng extract were significantly reduced in the storage conditions of 40$^{\circ}C$ for 4 weeks compared to those of control.
Barnyardgrass had relatively higher growth vigor at the earlier growth stage than inbred rice did, showing the 2 fold higher $\alpha$-amylase activity during the periods of germination and large leaf area Expansion with high net photosynthetic rate at the earlier autotrophic stage, but it performed weak growth at the late growth stage. However, the hlybrid rice Shanyou 63 had significantly higher $\alpha$-amylase activity and net photosynthetic rate than that of barnyardgrass, exhibiting heterosis for two physiologica1 traits during the germination (6~12 days) and autotrophic phase, respectively. Accordingly, hybrid rice, Shanyou 63, exhibited heterotic effect at the early growing stage when were presented with barnyardgrass. Shanyou 63 exhibited stronger tillering ability, faster leaf area expansion and higher net photosynthetic rate than those of barnyardgrass.
Some metabolites and embryo growth of primed tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. ‘KFI09’) seeds were observed during priming. The seeds were primed at 15 and $25^{\circ}C$ for 1, 2, 3, 5, 10 and 15 days in a -0.8 MPa polyethylene glycol 6000 (PEG) solution. The time to 50% seed germination (T$_{50}$) was greatly reduced when the seeds were primed at $25^{\circ}C$ when compared with 15$^{\circ}C$. The $\alpha$-amylase activity and sugars and amino acid contents in the seeds primed at $25^{\circ}C$ greatly increased, while $\alpha$-amylase activity was similar, and sugar and amino acid contents increased slightly in the seeds primed at 15$^{\circ}C$. When the seeds were primed at $25^{\circ}C$, growth of the embryo which was enclosed by endosperm was detected, while the endosperm became thinner as the priming duration was extended.d.
A yeast strain secreting glucoamylase was transformed with an expression vector (pMS12) containing the promoter of yeast alcohol dehydrogenase I gene ADC1, mouse salivary $\alpha$-amylase cDNA, and a segment of yeast $21\mu m$ plasmid. The transformed strain could produce ethanol from starch (4%, w/v) through a direct one-step process with the conversion efficiency of 93.2%, during 5 days of fermentation, while the original, untransformed strain exhibited a conversion efficiency of 38.1% under the same condition. When the regulatory site of the ADC1 promoter region was removed, the production of ethanol increased to 29~37% in the presence of exogenous 3%(v/v) ethanol in the fermentation medium.
This study investigated retrogradation properties of Jeungpyun substituted for cereals with dietary fibers of 60% of brown rice, and barley. Quality changes during storage periods of the functional Jeungpyun, were studied using $\alpha$-amylase iodine enzyme digestion methods, X-ray diffraction patterns, and differential scanning calorimetry (DSC). The barley substituted samples showed significantly lower retrogrdation rates than those of control when examined by $\alpha$-amylase method. The Relative crystallity by X-ray diffraction patterns had typical A type in all samples with appealing big crystallity around its diffraction angle 23$^{\circ}$degrees as storage periods were increased. The brown rice and barley Jeunpyun made smaller crystallity than that of control, representing slower retrogradation rates. The batter controls had significantly lower ΔH than the other compared samples when measured by DSC, but had significantly higher ΔH after 30 days of storage, implying that the control required more energy for regelatinization after the 30 days of storage.
Postprandial hyperglycemia plays an important role in the development of type 2 diabetes and complications associated with the disease such micro-and macro-vascular disease. The present study investigated the effect and action mechanism of a ethanolic extract from the Schizandra chinensis(SC-E) on hypeglycemia in vivo and in vitro. In vitro, SE-E demonstrated a potent inhibitory effects on ${\alpha}-amylase$ activity ($IC_{50}$ : 4 ${\mu}g/ml$). Its inhibition on ${\alpha}-amylase$ was determined to be competitive type. Oral administration of SE-E markedly lowered plasma glucose levels in non-fasted streptozotocin induced diabetic rats (45 mg/kg BW). In addition when it was orally administrated to rats with starch (2g/kg BW), SC-E (50 and 100 mg/kg BW) significantly suppressed the increase of blood glucose levels after starch loading . These results suggest that some edible plants merit further evaluation for clinical usefulness as anti-diabetic drugs.
Transformed, hybrid strains of the yeast Saccharomyces capable of simultaneous secretion of both glucoamylase and ${\alpha}-amylase$ have been produced. These strains can carry out direct, one-step assimilation of starch with conversion efficiency greater than 93% during a 5 day growth period. One of the transformants converts 92.8% of available starch into reducing sugars in only 2 days. Glucoamylase secretion by these strains results from expression of one or more chromosomal STA genes derived from Saccharomyces diastaticus. The strains were transformed by a plasmid(pMS12) containing mouse salivary ${\alpha}-amylase$ cDNA in an expression vector containing yeast alcohol dehydrogenase promoter and a segment of yeast $2{\mu}$ plasmid. The major starch hydrolysis product produced by crude amylases found in culture broths is glucose, indicating that ${\alpha}-amylase$ and glucoamylase act cooperatively.
The lysine residues of Bacillus licheniformis $\alpha$-amylase (BLA) were chemically modified using citraconic anhydride or succinic anhydride. Modification caused fundamental changes in the enzymes specificity, as indicated by a dramatic increase in maltosidase and a reduction in amylase activity. These changes in substrate specificity were found to coincide with a change in the cleavage pattern of the substrates and with a conversion of the native endo- form of the enzyme to a modified exo- form. Progressive increases in the productions of $\rho$-nitrophenol or glucose, when para nitrophenyl-maltoheptaoside or soluble starch, respectively, was used as substrate, were observed upon modification. The described changes were affected by the size of incorporated modified reagent: citraconic anhydride was more effective than succinic anhydride. Reasons for the observed changes are discussed and reasons for the effectivenesses of chemical modifications for tailoring enzyme specificities are suggested.
Seven kinds (acacia, cochineal, catechu, grape peel, persimmon, gallnut and clove) of color powders obtained from natural resources and their mixtures were evaluated for their biological activities, such as antioxidant (ABTS and DPPH radicals scavenging), cholesterol absorption, and COX-2 inhibitory activities. Catechu, gallnut and clove were selected for the further studies due to its the best activities. The cholesterol absorption, COX-2 inhibitory, ${\alpha}$-amylase inhibitory and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities were measured using the mixtures of catechu, gallnut and clove. The ABTS radical scavenging activity of the seven types of natural color powders were higher than the DPPH radical scavenging activity. The cholesterol absorption activity was significantly higher in cloves. The COX-2 inhibitory activity was significantly lower in acacia. The ${\alpha}$-amylase inhibitory activity was higher in catechu and gallnut, indicating that there were no significant difference between two mixtures. The ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity was the highest in catechu, which was higher than that of the catechu-containing mixtures. From all these results, a synergistic effect could be obtained when utilizing a mixture of powders rather than using only individual type. Since the activity of each powder was different, further studies will be required for clarifying the interactions between mixtures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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