• BMB Reports
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• 제36권3호
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• pp.326-331
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• 2003

The fission yeast cells that contained the cloned glutathione synthetase (GS) gene showed 1.4-fold higher glutathione (GSB) content and 1.9-fold higher GS activity than the cells without the cloned GS gene. Interestingly, $\gamma$-glutamylcysteine synthetase activity increased 2.1-fold in the S. pombe cells that contained the cloned GS gene. The S. pombe cells that harbored the multi copy-number plasmid pRGS49 (containing the cloned GS gene) showed a higher level of survival on solid media with cadmium chloride (1 mM) or mercuric chloride ($10\;{\mu}M$) than the cells that harbored the YEp357R vector. The 506 bp upstream sequence from the translational initiation point and N-terminal8 amino acid-coding region were fused into the promoteriess $\beta$-galactosidase gene of the shuttle vector YEp367R to generate the fusion plasmid pUGS39. Synthesis of $\beta$-galactosidase from the fusion plasmid pUGS39 was significantly enhanced by cadmium chloride and NO-generating S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP) and sodium nitroprusside (SN). It was also induced by L-buthionine-(S,R)-sulfoximine, a specific inhibitor of $\gamma$-glutamylcysteine synthetase (GCS). We also found that the expression of the S. pombe GS gene is regulated by the Atf1-Spc1-Wis1 signal pathway.

• 미생물학회지
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• 제52권2호
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• pp.220-225
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• 2016

쌀 전분을 원료로 효모를 직접 이용하여 항산화제 glutathione(GSH)이 풍부한 알코올 음료를 제조할 목적으로 GSH 함량과 당화능을 증진시키기 위하여 Saccharomyces cerevisiae의 ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase 유전자(GSH1), Debaryomyces occidentalis의 glucoamylase 유전자(GAM1), 그리고 ${\alpha}$-amylase 유전자(AMY)를 청주 효모 S. cerevisiae에서 공동 발현시켰다. 재조합 청주 효모의 세포외 GSH 함량은 원균주에 비해 1.5배 증가하였다. 2% (w/v) 쌀 전분이 함유된 배지에서 배양하였을 때 GAM1과 AMY 유전자 모두 발현하는 효모 균주의 glucoamylase에 의한 당화능은 GAM1유전자만 발현하는 균주와 비교하여 2배 증가하였다. 이 새로운 균주는 쌀 전분이 20%(w/v) 함유된 배지에서 7일간 발효를 통해 에탄올 11% (v/v)를 생산하였고, 전분 함유량의 90% 이상을 소비하였다.

• 생명과학회지
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• 제12권4호
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• pp.442-451
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• 2002

브롬(Br-)이온을 포함하는 지표수 또는 해수를 상수원 또는 어류양식용 물로 사용할 경우 소독, 살균을 위하여 오존(O$_3$)을 많이 사용한다. 이때 물속에 포함되어 있는 브름(Br-) 이온과 오존과의 반응에 의하여 독성물질인 Bromate(BrO$_3$-)가 산화 부산물로서 생성된다. 이 bromate의 생성반응에 대한 용액의 pH와 반응온도의 영향 및 bromate를 음용수중에 함유시키고 실험동물에 섭취시켰을 때의 생체독성에 미치는 기전을 관찰하였다. Bromate의 생성은 반응온도가 증가할수록 증가되지만, 낮은온도(15$^{\circ}C$)에서는 용액의 초기 pH가 3 인 경우는 초기 pH가 7, 10 인 용액의 경우보다 훨씬 적은 생성량을 나타내었다. Bromate를 음료수중에 0, 0.1, 0.2, 0.4g/L로하여 4, 12, 16, 20, 24주 투여하고서 신조직중의 지질과산화의 함량이 증가되었으며, 혈중 뇨소질소의 활성 및 뇨중 ${\gamma}$-glutamy-ltransferase의 활성은 대조군에 비하여 bromate의 투여로 현저히 증가되었으며, 뇨중 lactate dehydrogenase의 활성에는 별다른 영향이 없었다. Bromate의 투여로 xanthine oxidase 및 aldehyde oxidase의 활성은 bromate의 투여로 현저히 증가되었으며 glutathione의 농도 및 glutathione S-transferase의 활성도 대조군 보다 현저히 억제되었다. Glutathione의 생성계에 미치는 ${\gamma}$-giutarnylcystein synthetase의 활성은 대조군에 비해 bromate의 투여로 억제되었으며 glutathione redurtase의 활성은 별다른 영향이 없었다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제22권4호
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• pp.267-273
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• 1998

Pretreatment of acidic polysaccharide of Korean red ginseng (AcPS) for two weeks remarkably lowered the elevated content of lipid peroxide and levels of aminotransferases, sorbitol dehydrogenase, ${\gamma}$-glutamyltransferase, alkaline phosphatase and lactate dehydrogenase in liver intoxicated by acetaminophen (AA) . Pretreatments of AcPS also strengthen the liver function of glutathione related detoxication system indicated by glutathione contents and activities of glutathione S-transferase and glutathione reeducates which were affected by AA treatments. Activity of ${\gamma}$-glutamylcysteine syntheses was not changed by AcPS pretreatment whereas the activity of flu tathione reeducates was increased significantly. These results collectively indicate that the treatments of AcPS can promote the metabolism of lipid and reduce the production of peroxide in acetaminophen-intoxicated animals.

• 약학회지
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• 제47권4호
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• pp.218-223
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• 2003

Effect of taurine treatment on metabolism of glutathione (GSH) was studied in adult male ICR mice. An acute injection of taurine (250 mg/kg, ip) resulted in a significant decline of hepatic GSH level at t = 6 hr, but plasma GSH level was not altered. The activity of GSH-related enzyme in liver, such as GSH peroxidase, GSSG reductase, GSH S-transferases, ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase or ${\gamma}$-glutamyltranspeptidase, was not affected by taurine at t = 2.5 or 6 hr. Plasma cysteine and cystine levels were elevated rapidly following taurine treatment. Hepatic cysteine level was decreased by taurine, reaching a level approximately 70％ of control at t = 4 and 6 hr. In conclusion, the results indicate that an acute dose of taurine decreases hepatic GSH level by reducing the availability of cysteine, an essential substrate for synthesis of this tripeptide in liver. It is also suggested that taurine may decrease the cysteine uptake by competing with this S-amino acid for a non-specific amino acid transporter.

• 생명과학회지
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• 제13권5호
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• pp.626-633
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• 2003

백서에 bromate의 장기간 섭취로 간 및 신장의 glutathion량이 감소되는데, 간과 신장은 유사한 감소양상을 나타냈고, 폐 및 혈액에서는 감소하는 경향은 있었으나 통계적인 유의성은 없었다. Bromate 섭취로$\gamma-glutamyl$-cysteine synthetase와 $\gamma-glutamyl$ transpeptidase 활성이 감소되었다. 따라서 간과 신장의 glutathione 감소로 $\gamma-glutamyl$cysteine synthetase 활성이 감소됨으로서 glutathione 합성저하에 의해 나타난 결과로 생각되고, 폐에서 $\gamma-glutamyl$cysteine synthetase 및 $\gamma-glutamyl$- transpep-tidase 활성에는 별다른 영향이 없었다. 혈액에서는$\gamma-glutamyl$cysteine synthetase와 $\gamma-glutamyl$ transpeptidase 활성 감소로 glutathione의 혈액내로 유입과 타장기로 유출이 모두 저하되어 glutathione량의 변화가 없는 것으로 생각된다. Bromate에 의한 장기내 glutathione량 감소는 유리기 소거기능이 저하되어 bromate에 의해서 생성된 유리기 제거가 미흡할 것으로 생각되므로 bromate 독성의 한 요인이 될 것으로 추측된다.

• 생명과학회지
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• 제14권1호
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• pp.141-147
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• 2004

가자 추출물을 흰쥐에 일정량 투여한 후 간장에 미치는 영향을 관찰할 목적으로 여러 가지 효소량의 변동을 검토하였다. 간 손상의 지표로 사용되는 AST, ALT활성을 측정한 결과 AST, ALT모두에서 정상군보다 300 mg/kg의 용량으로 2주 시료 투여한 군의 함량이 2배 이상 증가되는 것으로 나타났다. 가자 추출물이 지질과산화물 생성에 미치는 효과를 관찰한 결과, 300 mg/kg의 용량으로 2주 시료 투여한 군함량이 정상군에 비해 135.43%, 173.9% 정도 증가하는 결과를 나타내었다. 간 조직의 지질과산화물 반응에 관여하는 것으로 알려진 XO, AO, AD 및 AH활성에 대한 효과를 관찰한 결과 마이크로솜 분획에 존재하는 AD, AH의 활성은 저해 효과가 없었고, 세포질 효소인 XO, AO의 활성은 300 mg/kg의 용량으로 2주 시료 투여한 군 함량이 정상군에 비해 약 2배 증가됨을 볼 수 있었다. 가자 추출물에 의한 간 조직중 glutathione농도에 미치는 영향에 대해 관찰한 결과 2주 동안 300 mg/kg의 용량으로 투여한 군의 glutathione농도는 정상군에 비해 약 75% 감소하는 것으로 나타났다 가자 추출물 투여 후 glutathione의 함량 감소를 경감시키는 기전을 알아볼 목적으로 glutathione 합성에 관여하는 $\gamma$-GCS의 활성과 산화형 glutathione을 환원형 glutathione으로 환원시키는 GR의 활성을 관찰한 결과 정상군에 비해 GR이 56.6%, $\gamma$-GCS가 6.7% 정도 감소하는 것으로 나타났다. 이러한 glutathione의 함량 변동은 산화형 glutathione을 환원형 glutathione으로 환원시키는 GR의 활성에 영향을 주어 나타나는 결과로 생각된다. 가자 추출물이 지질과산화의 해독계에 미치는 영향을 관찰할 목적으로 catalase, GP 및 SOD의 활성을 측정한 결과 catalase, GP의 활성은 각각 77.5%, 64.3% 감소하는 결과를 나타냈으며, SOD의 활성은 정상군에 비해 약 3배 증가하는 것으로 나타났다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제12권1호
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• pp.32-47
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• 1995

생쥐의 백혈병세포 L1210과 항암제에 대하여 내성이 유도된 L1210AdR, L1210VcR과 L1210Cis에서 glutathione의 농도와 glutathione의 합성 조절에 관여하는 ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase(GCS)와 ${\gamma}$-glutamyl transpeptidase (GGT), 세포 이물질을 축합하는데 촉매하는 glutathione S-transferase(GST)의 효소 활성도와 유전자의 발현 여부를 관찰하였다. 세포내 glutathione농도(${\mu}M/mg$ protein)는 L1210이 $0.41{\pm}0.003$, L1210AdR가 $0.73{\pm}0.006$, L1210VcR은 $1.16{\pm}0.060$, L1210Cis가 $2.19{\pm}0.282$으로 모세포에 비하여 내성세포에서 통계적으로 유의한 증가를 관찰하였다. Buthionine sulfoxamine(BSO)를 1 ${\mu}M$농도로 첨가하여 12시간 배양한 세포들에서의 glutathione농도는 L1210이 88%, L1210AdR가 85%, L1210VcR이 89%, 그리고 L1210Cis는 79%의 감소를 보였다. GCS의 활성도(nM/mg protein/min)는 L1210이 104인데 비하여 L1210AdR가 128, L1210VcR는 227, 및 L1210Cis는 212로 증가하였다. GGT의 활성도(nM/mg protein/min)는 L1210이 $2.15{\pm}0.531$이었고, L1210AdR은 $2.80{\pm}0.498$, L1210VcR은 $2.42{\pm}0.389$, 그리고 L1210Cis는 $2.98{\pm}0.623$으로 내성인 세포들에서 증가하였으며 L1210AdR과 L1210Cis에서 유의하였다. GST활성도(nM/mg protein/min)는 L1210이 $16.70{\pm}4.798$이었고, L1210AdR은 $14.51{\pm}3.402$, L1210VcR은 $19.52{\pm}4.255$, L1210Cis $17.77{\pm}4.495$로 L1210VcR과 L1210Cis가 약간의 증가를 보였으며, L1210AdR은 오히려 감소를 보였다. DNA의 slot blot에서 GCS, GGT, GST 유전자의 모세포와 내성세포간에 별다른 차이를 보이지 않았다. Northern hybridization에서 GCS는 약 4.5kb 크기의 band, GST-${\pi}$는 약 1.05kb 크기의 band를 보였으며 내성세포 모두에서 발현 증가가 관찰되었다. GGT의 경우 크기가 다른 6개의 band가 보였으며 특히 11.5 kb크기의 band에서 L1210AdR과 L1 210VcR의 발현이 증가하였으며, L1210VcR에서는 L1210과 다른 내성세포에서 보이는 1.95kb크기의 band가 보이지 않고 2.2kb 크기의 다른 band가 관찰되었다. 이상에서 L1210AdR과 L1210VcR의 내성에는 mdr1 유전자가 관여하고, L1210Cis의 내성에는 특히 glutathione이 중요하다. GCS, GGT 및 GST등의 활성도 및 유전자의 발현도 내성세포들에서 증가하였으며 이중 GCS는 내성세포내의 glutathione 합성에 가장 중요한 조절인자라 할 수 있다.

• 한국결정학회지
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• 제4권2호
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• pp.100-104
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• 1993

환원된 글루타치온은 모든 세포의 대사에 중요한 역할을 하고 있다. 글루타치온은 두개의 연속적인 반응으로 합성된 세개의 펩타이드로 구성되어 있다. 첫 번째 반응에서의 촉매효소가 GSH-I 이며, 두번째 반응에서의 촉매효소가 GSH-반이다. 대장균주의 글루 타치온 합성 기작은 주로 GSH-I의 되돌림 제어에 의 해 조절되고 있다. 이러한 생화학적 작용과 구조와의 관계를 알기 위한 첫 단계로 증기 확산 방을 방법과 모세관 확산 방법으로 실온에서 결정을 얻게 되었다. GSH-I 효소의 결정은 침전제 ammonium sulfate을 사용하여 얻었으며, 증기 확산 방을 방법으로는 10 일의 기간으로 실온에서 0.2 m x 0.2 mm x 0.2 mm 크기로 자랐으며. 이 결정은 싱크로트론 X-T3y 를 사용하여 약 4.0 A 까지 회절 시켰다. 또, 모세관 을 이용한 방법으로 얻은 결정은 40일의 기간으로 실온에서 0.25 mm X 0.25 mm X 0.3 mm 의 크기로 자랐으며, 이 결정은 회전 음극선의 X-ray를 사용하여 약 4.0 A까지 회절시켰다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제22권4호
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• pp.260-266
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• 1998

The effects of acidic polysaccharide of Korean red ginseng (AcPS) on metabolisms of drug and alcohol in the liver were investigated. We could find that treatment of AcPS to six-week ethanol administered rats lowered the levels of alcohol and acetaldehyde in serum. We also we found that treatment of AcPS normalized the elevated activities of free radical generation system, decreased activities of detoxification system such as ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase and glutathione S-transferase, and decreased activities of acetaldehyde metabolizing system. The cytosolic alcohol dehy drogenase and microsomal ethanol oxidizing system (MEOS) were strongly enhanced.