The prevalence of type 2 diabetes mellitus has been rapidly increased in parallel with the westernization of eating behavior in Korea. Increased consumption of animal fat and simple sugar can be potential contributors for insulin resistance. The purpose of the study was to determine whether Western-(WD) and Korean-style(KD) diets altered insulin secretion and insulin resistance in male Sprague Dawley rats. Rats weighing 98$\pm$5g were provided by KD(77 En% of starch, 5 En% of corn oil and 13 En% of gluten plus 5 En% of casein), WD(42 En% of starch, 40 En% of butter and 18% of casein) or control diet(62 En% of starch, 20 En% of corn oil and 18% of casein) for 12 weeks. Body weights were lower in KD compared to WD. Fasting blood glucose levels were not different among diets. Insulin secretion from the beta cells was higher by 2.2$\pm$0.4 folds in WD than KD at baseline. In hyperglycemic clamp insulin secretion was higher in WD than KD and CD. Whole body glucose disposal rates referred to the state of insulin sensitivity were lowest in WD among groups. Glycogen deposits in soleus and quadriceps muscles were lowest in WD among all groups, but their triglyceride contents were highest. GLUT4 contents and glycogen synthase were lowest in WD in both muscles. In conclusions, westernization of diets needed more insulin to normalization of blood glucose levels due to increased insulin resistance. Thus, WD would lead to increased prevalence of diabetes mellitus when increased insulin resistance could not be compensated by insulin secretion in the case of elevated blood glucose levels. (Korean J Nutriton 34(5) : 485~492, 2001)
산양유는 단백질 구성과 개별 지방산의 구성이 모유에 가깝기 때문에 우유에 비하여 소화율이 높다. 특히 casein 단백질은 모유의 단백질과 분자구조가 흡사하여 높은 소화 흡수력을 보이므로 설사 또는 복통 등과 같은 소화장애를 일으키지 않는다. 뿐만 아니라 지방산 함량에 있어서도 우유보다 중간사슬지방산이 우유보다 2배정도 많이 들어있어 소화 흡수 시 분해되는 속도가 빠르다. 산양유에는 질 좋은 수용성 유청단백질, 비타민 및 미네랄이 다량 함유되어 있고, 특히 비타민 A, 콜린, 이노시톨의 함량이 높고 흡수율도 양호한 편이다. 산양유에 포함된 유당과 올리고당은 우유보다 모유에 더 가까운 효과를 기대할 수 있다. 유당은 장 내 산성을 증가시켜 유익한 박테리아의 증식을 돕는 한편 장내에서의 칼슘의 흡수를 도와주거나 인(P)과 마그네슘(Mg)의 흡수를 촉진시키는 역할을 담당한다. 또한 올리고당류는 장내유산균의 생육을 돕는 prebiotic 효과를 발휘하여 장내 유익균이 정착하는데 도움을 준다는 실험결과로 판단할 때 실제로 유아에게 정장작용을 기대할 수 있다. 그리고 산양유에 다량 함유된 미네랄 성분 또한 소화 및 흡수를 촉진시키는 역할을 하기 때문에 산양유는 우유 섭취 시 유당불 내증을 호소하던 소비자들도 어렵지 않게 섭취할 수 있다. 이처럼 산양유가 여러 가지 측면에서 우유보다 우수한 식품학적 생리적 특성을 가지고 있음에도 불구하고 국내 산양유가공 산업은 거의 불모지라 해도 과언이 아니다. 게다가 산양유의 정확한 영양학적 가치가 일반 소비자들에게 전달되지 못하고 있는 실정이다. 따라서 우유보다 그 성분과 조성이 모유와 흡사한 산양유의 식품학적 특성, 안전성 및 기능성에 대한 체계적이며 과학적 연구가 시급히 활성화되어야 할 것이다.
형질 전환 동물 생산에는 조직 및 시기 특이적 발현 조절이 가능하다는 장점 때문에 유즙 내로 외부 유전자를 발현시키는 시스템이 널리 이용되고 있다. 유전자 발현 즉, 단백질 생산은 프로모터의 강도뿐만 아니라 mRNA의 안정성에 의해서도 조절된다. 특히, polyadenylation에 의한 poly A의 길이는 in vivo와 올 in vitro에서 mRNA 안정성 및 목적 유전자의 번역효율에 영향을 준다. 본 연구에서는 이러한 mRNA 안정성이 목적 유전자의 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 3'-UTR 염기 서열을 분석하였다. 이 3'-untranslated region(UTR) 내의 poly A signal을 기준으로 putative cytoplasmic polyadenylation element(CPE) 부위와 downstream elements(DSE: U-rich, G-rich, GU-rich)의 염기 서열을 분석하고, 각각의 element를 기준으로 15 종의 luciferase reporter vector를 제작하여, 생쥐 유선 세포주(HC11)와 돼지 유선 세포주(PMGC)에 각각 transfection시킨 후 48시간 동안 배양하고 luciferase 발현량을 분석하였다. PMGC의 경우, luciferase의 발현은 exon 9의 CPE 2,3 및 DSE 1을 포함한 #6 construct에서 유의적으로 높은 발현량을 보였으며, exon 9의 CPE 2, 3과 DSE를 모두 포함하고 있는 #11 construct에서도 유의적으로 높은 발현량을 보였다. 이러한 결과는 형질 전환 돼지 생산에 있어 #6 및 11 construct의 사용은 목적의 유전자를 효과적으로 발현시키는데 기여할 것으로 사료된다.
Mira Chang;Oh, Keon-Bong;Lee, Kyung-Kwang;Han, Yong-Mahn
한국발생생물학회:학술대회논문집
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한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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pp.86-86
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2003
Research has been in progress for more than a decade to production of useful proteins by genetic modification in cattle. However, the levels of protein production in transgenic cattle have been reported very low. To enhance protein production in transgenic animal, we tried homologous recombination to donor cells for production of transgenic clone cattle through nuclear transfer procedure. Thus, we constructed the two targeting vectors of human thrombopoietin (TPO) at bovine $\beta$-casein locus using homologous recombination with 13.6 kb and 9.6 kb homology. In two targeting vectors, positive selection was through the neomycin resistance gene and negative selection was by the diphtheria toxin (DT). Gene targeting was attempted in bovine embryonic fibroblasts (bEF) and bovine ear skin fibroblasts (bESF). To determine the most appropriate concentration of neomycin for bEF and bESF, G4l8 resistance was confirmed by culturing the cells in various concentrations of the drug and both of the cells were optimally selected at $900 \mu g/ml$ of neomycin. The transfected bEF and bESF by the targeting vectors were colonized efficiently at the ratio of DNA to transfection reagent such as $4 \mu g$:2 ${mu}ell$ and $1 \mu g$:$2 \mu l$. Comparing number of healthy clones from passage 4 to passage 8, bESF (17%) persist in culture for much longer than bEF (6%). The two gene-targeted bESF clones of 30 random-integrated clones with 9.6 kb homology length were confirmed, however, nothing was out of 72 random integration clones with 13.6 kb homology length, The DT also worked more efficiently in clones transfected with the vector of 9.6 kb homology length. Our data suggests that the choice of donor cell for long culture period should be considered to obtain targeted cell clone, and the gene-targeting frequency and the DT working efficiency are dependent on the length of target homology.
Mitogen- and stress-activated protein kinase (MSK1) palys a crucial role in the regulation of transcription downstream of extracellular-signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) and mitogen-activated protein kinase p38. MSK1 can be phosphorylated and activated in cells by both ERK1/2 and p38$\alpha$. In this study, Casein Kinase 2 (CK2) was identified as a binding and regulatory partner for MSK1. Using the yeast two-hybrid system, MSK1 was found to interact with the CK2$\beta$ regulatory subunit of CK2. Interactions between MSK1 and the CK2$\alpha$ catalytic subunit and CK2$\beta$ subunit were demonstrated in vitro and in vivo. We further found that CK2$\alpha$ can only interact with the C-terminal kinase domain of MSK1. Using site-directed mutagenesis assay and mass spectrometry, we identified five sites in the MSK1 C-terminus that could be phosphorylated by CK2 in vitro: Ser757, Ser758, Ser759, Ser760 and Thr793. Of these, Ser757, Ser759, Ser760 and Thr793 were previously unknown.
Objective: The aim of the study was to evaluate the influence of polymorphic loci and other factors on milk performance and the technological properties of milk. Methods: The analysis was performed on Simmental and Holstein cows in field conditions (n = 748). Milk yield in kg, fat and protein percentage and yield were evaluated. Technological properties were evaluated by milk fermentation ability, renneting, and an alcohol test. Polymorphisms in the acyl-CoA diacylgycerol transferase 1 (DGAT1), leptin (LEP), fatty acid synthase (FASN), stearoyl CoA desaturase 1 (SCD1), casein beta (CSN2), casein kappa (CSN3), and lactoglobulin beta genes were genotyped, and association analysis was performed. Results: The DGAT1 AA genotype was associated with higher milk, protein and fat yields (p<0.05). The MM genotype in the LEP gene was associated with a lower protein percentage and the W allele with a higher protein percentage (p<0.05). In cows with the FASN GG genotype, the protein percentage was higher, but the A allele was associated with higher milk, protein and fat yields than the G allele. The TT genotype in SCD1 was associated with the lowest milk, protein and fat yields and with the highest milk protein percentage (p<0.01). The T allele had higher values than the C allele (p<0.05) except for fat percentage. The genotype CSN3 AA was associated with a significantly heightened milk yield; BB was associated with a high protein percentage. The effect of the alleles on the technological properties was not significant. The CSN2 BB genotype was associated with the best alcohol test (p<0.01), and the renneting order was inverse. Milk from cows with the CSN2 A1A1 genotype was best in the milk fermentation ability. CSN3 significantly affected the technological properties. Conclusion: The findings revealed the potential of some polymorphic loci for use in dairy cattle breeding and for the management of milk quality. In field research, the pivotal role of farms in milk yield, composition and technological properties was confirmed.
This study was undertaken to examine the influence of soluble non-starch polysaccharides on growth performance, mucin secretion, and endogenous amino acid flows in weaner pigs. Different levels (0, 4 and 7.5%) of purified corn arabinoxylan (AX) or barley $\beta$-glucan extract (BG) were substituted for cellulose in a purified diet based on starch, sucrose and enzymatically hydrolyzed casein. All diets contained titanium oxide as an indigestible marker. Each experimental diet was fed to five, 6-wk old weaner pigs for 21 days. Average daily gain (p<0.05) and feed conversion ratio (p<0.01) were improved with dietary inclusion of 7.5% AX and BG, indicating high degradation rates of AX and BG in pigs. Crude mucin contents and endogenous nitrogen flow were increased (p<0.05) with increased levels of AX, but not with BG. Numerical increases in endogenous amino acid flow (EAAF) were observed with increased levels of AX but no definite trend with BG. Endogenous amino acid flow in pigs fed mixed NSP diets (4% BG and 3.5% cellulose) was significantly higher (p<0.05) than those fed 7.5% BG diets. Among diets containing pure sources of soluble non-starch polysaccharides, endogenous amino acid flows were highest in 7.5% AX (p<0.05), intermediate in BG, and lowest in control diet. Increased flows (p<0.01) of threonine, proline and serine in pigs fed 7.5% AX diets are consistent with the increased flow of crude mucin determined in this treatment. In conclusion, mucin and endogenous amino acid flows were increased with dietary inclusion of AX, which could be related to its physicochemical property, particularly its high water-holding capacity. In contrast, $\beta$-glucan, due to its high degradation rate in pig, may be considered as unimportant factor in inducing mucin and endogenous amino acid secretions, at least at levels such as those used in this study.
Purpose: This study was conducted to investigate the effect on factors related lactation after administration of Palmul-tang in postpartum C57BL/6N mice. Materials and Methods: Experimental groups were divided into control group post-par group and pre-par group. Pre-par and post-par group were administered Palmul-tang(p.o) twice a week for 4 weeks or 3 weeks respectively. Control group was administered normal saline for 3 weeks. Then we observed morphological change, immunohistochemical density and milk protein gene expression of factors related lactation within mammary gland of postpartum mice. Results: In post-par and pre-par groups, adipose tissue within mammary gland significantly decreased, and ductal branch and alveoli prominently developed than that of control group at 1~3 weeks after administraion of Palmul-tang. In post-par and pre-par groups, density of immunoreactivity on oxytocin, prolactin, estrogen and progesterone receptors in mammary glandular tissue significantly increased than that of control group. mRNA expression of $\beta$-casein and placental lactogen (PL)-1 in post-par group was more increased than that of control and pre-par groups. Conclusion: These results suggest that Palmul-tang significantly improved factors related lactation at postpartum period.
V. parahaemolyticus 종류들이 gelatin분해 확인 실험에서 큰 clear zone을 형성했고, V. alginolyticus 분리균주도 V. parahaemolyticus와 비슷한 clear zone을 형성했다. V. fluvialis KCTC 2473은 clear zone을 형성하지 못했다. Hemolytic activity측정 실험에서는 V. parahaemolyticus 분리균주(2)가 가장 활성이 크게 나타났고, V. parahaemolyticus ATCC 17802, V. parahaemolyticus 분리균주(1)과 V. mimicus ATCC 33653도 높은 활성을 나타냈으며, 나머지 다른 비브리오균은 활성이 나타나지 않았다. Azocasein분해 활성 실험에서는 V. parahaemolyticus ATCC 17802, 분리균주(1), 분리균주(2)는 200EU/m1전후로 활성이 높게 나타났고, 나머지는 110EU/ml전후로 활성이 상대적으로 낮게 나타났다.
The objective of this study was to examine the effect of compensatory growth nutritional regimen on mammary gland growth and lactation. One hundred twenty-two Sprague Dawley female rats (35 days of age) were randomly assigned to either a control or a stair-step compensatory nutrition (SSCN) feeding regimen or an alternating 2-2-3-3-week schedule beginning with 40% energy restriction for 2 weeks followed by re-alimentation (control diet) for 2 weeks. Pup weight gain and milk yield were improved 8% and 8 to 15%, respectively, by the SSCN regimen. The gene expression of $\beta$-casein was 2.3-fold greater in the SSCN group than in the control group during early lactation, but they were greater at all stages of the second lactation. The gene expression of insulin-like growth factor-I was 40% lower in the SSCN group than in the control group during early lactation of the second lactation, but during late lactation it was 80% greater than in the control group. The concentration of serum corticosterone tended to be higher in the SSCN group during the late stage of the first lactation. These results suggest that the stair-step compensatory nutrition regimen improves lactation performance and persistency by modulation of cell differentiation and apoptotic cell death.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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