Background: Alu elements are one of the most common repetitive sequences that now constitute more than 10% of the human genome and potential targets for epigenetic alterations. Correspondingly, methylation of these elements can result in a genome-wide event that may have an impact in cancer. However, studies investigating the genome-wide status of Alu methylation in cancer remain limited. Objectives: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) presents with high incidence in South-East Asia and thus the aim of this study was to evaluate the Alu methylation status in OSCCs and explore with the possibility of using this information for diagnostic screening. We evaluated Alu methylation status in a) normal oral mucosa compared to OSCC; b) peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of normal controls comparing to oral cancer patients; c) among oral epithelium of normal controls, smokers and oral cancer patients. Materials and Methods: Alu methylation was detected by combined bisulfite restriction analysis (COBRA) at 2 CpG sites. The amplified products were classified into three patterns; hypermethylation ($^mC^mC$), partial methylation ($^uC^mC+^mC^uC$), and hypomethylation ($^uC^uC$). Results: The results demonstrate that the $%^mC^mC$ value is suitable for differentiating normal and cancer in oral tissues (p=0.0002), but is not significantly observe in PBMCs. In addition, a stepwise decrease in this value was observed in the oral epithelium from normal, light smoker, heavy smoker, low stage and high stage OSCC (p=0.0003). Furthermore, receiver operating characteristic (ROC) curve analyses demonstrated the potential of combined $%^mC$ or $%^mC^mC$ values as markers for oral cancer detection with sensitivity and specificity of 86.7% and 56.7%, respectively. Conclusions: Alu hypomethylation is likely to be associated with multistep oral carcinogenesis, and might be developed as a screening tool for oral cancer detection.
The CO substitution reactions of the complex, $Cp(S-2,4-Me_2C_5H_5)CrCo$ with $PR_3(PR_3=PMePh_2,\;P(OCH_3)_3,\;PMe_2Ph)$ were investigated spectrophotometrically at various temperatures. From the reaction rates, it was suggested that the CO substitution reaction took place by first-order (dissociative) pathway. Activation parameters in decaline were ${\Delta}H^{\neq}\;=\;22.0\;kcal{\cdot}mol^{-1}$, ${\Delta}S^{\neq}=\;-3.8cal{\cdot}mol^{-1}{\cdot}K^{-1}$. Unusually low value of ${\Delta}S{\neq}$ suggests an ${\eta}^5-S{\to}{\eta}^5-U$ conversion of the pentadienyl ligand. This suggestion was confirmed by the Extended-Huckel molecular orbital (EHMO) calculations, which revealed that the total energy of $Cp(S-2,4-Me_2C_5H_5$)CrCO is about 0.42 kcal/mol more lower than that of $Cp(U-2,4-Me_2C_5H_5)CrCO$ and the energy of $[Cp(U-2,4-Me_2C_5H_5)Cr{\cdots}CO]^{\neq} $ transition state is about 2.43 kcal/mol lower than that of $[Cp(S-2,4-Me_2C_5H_5)Cr{\cdots}CO]^{\neq}$ transition state.
The CO substitution reactions in the complex, $Cp(S-C_5H_7)CrCO$ with $PR_3(PR_3=PMePh_2,\;P(OCH_3)_3,\;PMe_2Ph)$ were investigated spectrophotometrically at various temperatures. From the reaction rates, it was suggested that the CO substitution reaction takes place by first-order (dissociative) pathway. Activation parameters in decaline are ${\Delta}H^{\neq}\;=\;24.58\;kcal\;{\cdot}\;mol^{-1},\;{\Delta}S^{\neq}\;=\;3.05 cal\;{\cdot}\;mol^{-1}{\cdot}K^{-1}$. Unusually low value of ${\Delta}S^{\neq}$ suggests an ${\eta}^5-S\;{\to}\;{\eta}^5-U$ conversion of the pentadienyl ligand. This was confirmed by the extended-Huckel molecular orbital (EHMO) calculations, which revealed that the total energy Of $Cp(S-C_5H_7)CrCO$ is about 6.84 kcal/mol more stable than that of $Cp(U-C_5H_7)CrCO$ and the energy of $[Cp(U-C_5H_7)CrCO^{\neq}$ transition state is about 4.25 kcal/mol lower than that of $[Cp(S-C_5H_7)Cr]^{\neq}$ transition state.
기본 조성 N $i_{0.18}$Z $n_{0.68}$C $u_{0.14}$F $e_{2}$$O_{4}$와 N $i_{0.14}$Z $n_{0.64}$C $u_{0.22}$F $e_{2}$$O_{4}$ 및 N $i_{0.24}$Z $n_{0.64}$C $u_{0.12}$F $e_{2}$$O_{4}$에 입계의 고저항층을 형성하고 소결을 촉진시키기 위해서 0.1 mol %의 Ca $Co_{3}$와 입자의 성장을 촉진시키고 높은 투자율을 얻을 목적으로 $V_{2}$$O_{5}$를 0.04 mol% 첨가하였다. 이들 원료들을 혼합한 후 950 .deg. C에서 3시간 하소 과정을 거친후 ball mill해서 toroid 시편을 만들고 1030 .deg. C, 1050 .deg. C 및 1070 .deg. C 에서 2시간 동안 공기중에서 소결 시켰다. Raw material의 조성비 변화 및 소결 온도 변화에 따른 여러 가지 물리적 특성들을 조사하였다. X-선 회절 분석 결과 이들 시편들이 spinel 구조를 이루고 있음을 확인하였고 금속현미경으로 측정한 결정 입자의 크기는 6 .mu. m ~ 16 .mu. m 이었다. 초투자율, 자기 유도는 소결 온도가 1030 .deg. C에서 1050 .deg. C로 증가함에 따라 증가하였고 Q factor와 보자력은 감소하였다. 보자력과 큐리온도는 각각 0.17 Oe 및 220 .deg. C 근처로 모든 시편들에서 거의 비슷하였다. 본 시편의 사용 주파수 범위는 0.4 ~ 20 MHz로 확인되었으며, 소결 온도 1050 .deg.C와 기본 조성 N $i_{0.14}$Z $n_{0.64}$C $u_{0.22}$F $e_{2}$$O_{4}$ 에서 다른 사람들 보다 더욱 더 우수한 자기유도값(B, $B_{m}$ )을 얻을 수 있었다.
Ustilago maydis(옥수수깜부기균)에 있어서 동포자 melanin의 구성성분으로 catecol 계 알려진바 이 물질의 전구체인 benzoic acid의 생성 여부와 그 유래 원천을 추적하고자 phenylalanine의 분해 과정을 조사하였다. 방사성 동위원소가 표지된 L-$^{14}C$-phenylalanine 및 $^{14}C$-trans-cinnamic acid를 첨가한 액체배지에서 균체와 배양액을 대상으로 대사산물을 추적 조사한 결과 trans-cinnamic acid, benzoic acid, 4-hydroxybenzoic acid와 hydroxybenzoic acid derivatives 추정되는 물질 등이 검출되었다. 또한 L-$^{14}C$-phenylalanine을 대사하여 매우 천천히 공기 중으로 $^{14}CO_2$를 방출함을 확인하여 phenylalanine을 완전히 분해 할 수 있음을 밝혔다. 결론적으로 본 연구는 옥수수깜부기균이 benzoic acid를 생성하고 그 유래는 phenylalanine의 분해에서 만들어지는 증거를 제시하였다.
방사성 동위 원소화합물 소디움 아세테이트$-V-C^{14}(C^{14}$-아세데이트)를 2년생과 4년생 7월, 9월 미국인삼(오갈피 나무과, Panax quinquefolium L.) 식물과 캇팅(Cutting) 에 각기 심지법에 의하여 투여하였다. $C^{14}$아세테이트 섭취율은 약 99%였다. 오토래디오크로매토그램은 제조적 박층 크로매토그래피로 분리한 사포닌들이 불순물을 함유하고 있음을 제시하였으며 특히 잎이나 줄기 엑기스에서 분리한 사포닌들에 불순물이 많이 섞여 있음을 알았다. 뿌리 및 과실 메타놀 엑기스는 상대적으로 순수한 사포닌들을 얻을 수 있다. 패나퀼린 B의 과량으로 인한 패나퀼린 C에 대한 패나퀼린 B의 꼬리는 제조적 박층 크로매토그래피에서 서로 혼교되는 결과를 얻었다. 일차 정제된 사포닌들의 평균 함량(건조 식물에 대한 %)은 과실(9.8%), 줄기(7.9%), 뿌리(6.3%)에 비하여 잎(13.8%)에 높았다. $C^{14}$아세테이트가 패나퀼린으로 인코포레이트되는 평균 %는 48%였다. 패나퀼린 B와 C로 $C^{14}$아세테이트가 인코포레이트되는 평균 %는 패나퀼린 C (0.75%), (d) (0.65%). G-1 (0.13%) G-2 (0.53%)보다 높았다. (패나퀼린 B 1.40%, C 1.13%). 패나퀼린 합성은 식물의 채취 부위, 채취 시기 및 연령에 따라 를린다고 사료된다. 패나퀼린 B 에 $C^{14}$아세테이트가 인코포레이트되는 평균 함량은 뿌리(0.58%)와 줄기(0.48%)에서 높았고, 패나퀼린 C(0.40%)와 (d) (0.45%)는 잎에서 높았고, 패나퀼린 E는 뿌리 (0.55%)와 잎(0.50%)에서 각기 높았다. 패나퀼린 G-2는 식물의 모든 부위에서 생합성되어 졌다. 패나퀼린은 9월에 채집한 식물에서 보다 7월에 채집한 식물에서 보다 활발하게 생합성되는 것처럼 보였다(예외 패나퀼린 G-1). 패나퀼린 B, C, G-1은 4년생 식물에서 활발하게 생합성되고 패나퀼린 (d)와 E는 2년생 식물에서 활발하게 생합성된다고 사료된다. 캇팅에서 기대된 결과들은 패나퀼린들이 인삼 식물의 지상부위에서 새로히 합성되고 괘나퀼린 G-1은 잎에서 새로히 합성된다고 하는 것 들이다. 인삼 조직 배양 연구에서 알려진 바와 같이 패나퀼린들은 미국인삼과 한국인삼의 잎, 줄기, 뿌리 캘러스 조직에 의하여서도 합성될 뿐만 아니라 또한 그들의 캘러스 뿌리에서도 패나퀼린들이 항성된다. 따라서 인삼 사포닌인 패나퀼린은 인삼 식물의 세포나 기관등 모든곳에서 새로히 합성된다고 사료할 수 있다. $C^{14}$아세테이트가 패나퀼린의 비당체 부분에도 인코포레이트되는 것을 입증하였는데, 2년생 식물에서 패낙사다이올은 $(0.56\;m{\mu}Ci/mg)$, 4년생 식물에서 패낙사다이올은 $(0.54\;m{\mu}Ci/mg)$스페시획 액티비티를 갖었다.
This study investigated the lipogenesis capacity of hepatocytes and lipolysis rate of adipocytes of broilers as affected by different fatty acids (trial one) and different linoleic acid (C18:2) levels (trial two). Twenty 6-wk old broilers were used; their hepatocytes and adipocytes were isolated for the in vitro study. In trial one, four treatments were tested. The control group in which no fatty acid was added, and the test groups to which were added $300{\mu}M$ of C16:0, C18:1 and C18:2, respectively. For trial two, different levels (0, $300{\mu}M$ and 1 mM) of C18:2 combined to fatty acid-free bovine serum albumin (BSA) were added to the medium. According to results of trial one, added fatty acids significantly reduced the incorporation by hepatocytes of [U,$^{14}C$]glucose into total lipid (p<0.05); the lipogenesis capacity in C18:2 group was the lowest. Although a similar pattern was found with [l,$^{14}C$]acetate, the groups only slightly differed in terms of lipogenesis capacity (p=0.11). In addition, the C18:2 group had a significantly (p<0.05) greater lipolysis rate than the C16:0 and control groups. Results of trial two indicated that C18:2 significantly (p<0.05) reduced lipogenesis capacity both for [U,$^{14}C$]glucose and [l,$^{14}C$]acetate, and markedly stimulated the lipolysis rate (p<0.05), displaying a dose response. Results presented herein demonstrate that C18:2 can reduce lipogenesis capacity and stimulate the lipolysis rate in broilers.
Hydrolysis and adsorption reversibility experiments were run for initial enzyme activity of 4.48, 9.65, 11.19 and 17.14U/mL at a temperature 30$^\circ C$. The chitin particle size corresponded to a mean particle diameter of 0.127mm, and the initial concentration of chitin was 10mg/mL. After approximately 2hrs, the enzyme activity remained constant in a speudo-steady state. The amounts in the bulk [E] and the amounts of enzyme adsorbed on the chitin surface [E] are plotted on Lineweaver-Burk plot to yield a linear relationship with a correlation coefficient of 0.99, a slope of 2.79cm$^-1$ and an intercept of 0.08$\textrm{cm}^2$/U. From this parameters, the values of [E$_T$] and $K_E$ were calculated to be 12.5U/cm$^2$ and 34.88U/mL. respectively, Adsorption isotherm of the enzyme on the particles showed a well developed plateau of 1.35$\times$10$^-3$, 4.72$\times$10$^-3$, 4.42$\times$10$^-3$, 8.58$\times$10$^-3$U/cm$^2$ at 30$^\circ C$. To determine the specificity of chitinase for crystalline chitin, the free energy of adsorption was measured, and its was determined as about -14.62~-18.8kJ/mol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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