dsRNA결합인자인 RBF단백질을 정제하여 이의 단일 또는 이중선의 RNA 또는 DNA 와의 결합도를 측정하였다ㅓ. RBF단백질은 이들과 각각 반응시켜 그 결합도는 SDS-PAGE에 의하여 비교관찰하였다. RBF단백질은 dsRNA와은 강한 결합력을 나타낸 반면 기타의 핵산구조에 대해서는 이러한 결과를 나타내지 못하였다. 인산화 실험의 결과, RBF단백질은 poly(I) : poly(C)의 존재하에서 사람 도는 쥐 모두로 부터의 PKR 효소의 자가인산화를 유사한 방식으로 억제하였다. 이는 다른 종류의 진핵세포생물에서 단백질합성조절을 위한 PKR과 RBF가 유사한 경쟁적 관련성을 유지하면서 존재함을 시사하고 있다.

Vibrio unlnificus ATCC 27562의 16S rRNA 유전자를 PCR법과 제한효소절단법으로 분석 하여 얻은 결과는 다음과 같다. 1. 고안된 한쌍의 primer로 PCR을 시행하여 얻은 산물은 약 1.3Kb 였다. 2. PCR산물을 여섯가지의 제한 효소로 절단하여 얻은 단편들은 아래와 같다. BamH I: 어떤 restriction fragment도 만들지 않았다. Alu I : 약 400bp와 200bp의 두가지 fragment를 생산하였다. Sau3A I : 약 70bp에서 450bp 사이에 세가지 fragment를 생산하였다. Hind III : 약 800bp와 500bp의 약간 큰 두가지 fragment를 생산하였다. Sal I : 약 500bp와 750bp의 두가지 fragment를 생산하였다. Sma I : 약 800bp와 470bp의 두가지 fragment를 생산하였다.

외근에 귀화한 가시상추(Lactuca serriola)의 분산과 적응을 연구하였다. 가시ㅛ　추의 분포는 한반도 중부지방의 남부에 제한되었다. 그 분포지역은 인간에 의한 이동으로 점차 확산되고 잇었다. 10개의 조사지역의 관측결과 천이의 초기단뎨에 있는 노변식생으로 나타났다. 즉 측수의 90%의 초본층과 5%의 관목층으로 구성되었으나 교목층은 없었다. 우점종군은 Kummeroverowia stipulacea, Ixeris chimensis, Ambrosia artemisiifolia., Lactuca indica, Tiungia sonchifolia, Cephalonoplos segetum, Rubus parvifolius, Ixeris polycephala, Hemistepta Lyrata, Cercis chinensis Artemisia capillaris 이었다. 조사지역은 식생의 높은 상이도로 4개유형으로 구분되지만 많은 우형이 나타나는 것은 아직 가시상추의 특유한 군락은 형성하지 못하고 있음을 보였다.

These studies were undertaken to investigate changes of major components occuring during germination of sesame (Sesamum indicum L.) seeds, Changes of total lipid and protein contents, and fatty acid composition were determined. Also, the correponding values of various components in cotyledons, hypocotyls and roots were measured according to germination stage. The results were summarized as follows; During germination, total lipid and protein contents decreased. In particular, protein contents rapidly decreased to the 3 days after gemination(DAG), and then total lipid contents rapidly decreased. In changes of total lipid and protein of cotyledons, hypocotyles and roots detected at the 10, 15 and 20 DAG, some variations were determined. The contents of lipid and protein in hypocotyls rapidly decreased, but since than no changes were observed. In contract, in roots similar changes patterns were observed, while since 15 DAG a rapidly increase was wxamined. In fatty acid composition of total lipid ,saturatedmfatty acids such as palmitic acid increased during the germination. On the other hand, unsaturated fatty acid such as olic acid and linoleic acid decreased during the same periods. In changes of fatty acid composition of total lipid of cotyledons, hypocotlys and roots, saturated fatty acids such as palmitic acid and stearic acid increased during the germination. However, linoleic acid decreased during the same germination suggesting that this may be due to the rapid degradation. However, linoleic acid decreased during the same periods. According to SDS-PAGE analysis, there was no detectible polypeptide bands on the gel before seed germination suggesting that this may be due to the rapid degradation of the storage peotein in the mature seed by hydrolytic enzymes during the stag. As germination continued polypeptide bands, one with 40KD, two with 32∼34Kd and one with 24KD, were detected on the gel.

We isolated 100 Vobrio sp. from marine products and sea from July to September, 1997. We attemped on purification of hemolysin produced by Vibrio sp. The growth, hemolysin production patterns by the 100 strains of Vibrio sp. showed identical, in general. V. unlnificus ys-1 produced hemolysis as the higtest titer. The optimal culture conditions for the hemolysin production by the V. vunificus ys-1 are followings; 1. Hemolysin production was optimal dering the late exponetial phage. 2. Maximal growth, hemolysin production were in heart infusion broth. 3. Maximal yields of hemolysin was obtained when the heart infusion broth had an intial pH of 8.0, 3$0^{\circ}C$, 3% NaCL. Hemolysin was purified from culture filtrate of the strain by ammonium sulfate recipitation, ion exchange and hydrophobic interaction chromatography. The results were as follows; 1. Hemogeneity of the purified hemolysin was demonstrated by revealing single band on SDS-PAGE. The molecular weight of purified hemolysin was 45KDa. 2. The absorbance rattern in ultraviolet wsa typical of those seen with most proteinb with 280nm. 3. Purified hemolysin was atable at 5$0^{\circ}C$ but 7$0^{\circ}C$ of the acivity was lost by heating for 30 min at 6$0^{\circ}C$/ Optimal temperature of purified hemolysin was 35$^{\circ}C$. 4. Purified hemolysin was stable at the pH range of 6~9, but in the less the pH5.0. above the pH 9.0, the hemolysin activity was lost completely.

Farmesy-Protein Transferase의 저해제는 Ras단백질의 발암활성을 차잔하는 항암제의 후보로서 알려져있다. 우리는 최근에 topoisomerase I에 대하여 저해활성을 갖는 dihydrotanshinone I을 약용식물인 Salvia miltorhiza Bunge(Danshen)으로부터 분리하였다. Dihydrotanshinone Iml 작용기작의 해석을 위한 시도에서 farmesy-Protein Transferase에 대한 저해능($IC_{50}$치= 15ug/ml)을 관찰하였으며, 이것은 유용한 항암제로서의 가능성을 제시한 결과로 본다.

전 골수성 백혈병 세초인 HL-60 세포를 model로 하여, 민간요법으로 사용되어져 부작용이 극히 적은 거승로 알려진 고려인삼의 구성 성분 중 주요성분이 ginseng (Panzx ginseng C.A. Meyer) saponin 및 ginsenoside Rh1, Rh2, Rh3, 비파 (Eriobotrya japonica L.) 잎의 성분들 중에서 항발암 및 항암성분으로 알려진 ursolic acid 및 oleanolic acid, 웅담중의 중요성분 성분인 lithocholoc acid 드잉 분화능력이 있는 지를 조사하고자 본 실험을 수행아였다. Retinoic acid를 처리한 결과 타 연구자들의 연구결과들처럼 높은 분화력을 관찰할 수 있었으며, dbcAMP 단독 처리군에서도 높은 분화효과를 나타냈었다. Dexamethasone 처리군에서는 분화효과를 거의 관찰할 수 없었으나,dexamethansone과 구조적으로 유사한 ursolic acid와 oleanolic acid는 보다 높은 분화력을 보였고 웅담성분의 중요성분인 lirhocholic acid는 높은 분화력을 나타냈었다. Ginseng saponin은 0.00375% (w/v)에서 20% 이상의 분화력을 보였으며, Ginsenoside Rh2와 Rh3는 높은 분화력을 나타냈다.

To investigate the effect of pine needle extract (PNE) on membrane fluidirt and neurotransmiter-related enzymes in brain of Spragu-Dawley(SD), male SD rats were fed basic diets (control group), and experimantal diets (PNE group)with 0.5% and 0.1% fo PNE for 6 weeks. pine (pinus tabulaeformis C$_{ARR}$ is one of the popular plant drugs which has used as a medicine in Asia. Cholesterol levels in brain mitochondria of 0.5%-PNE and 0.1%-PNDE groups were significantly decreased in 15% and 25%, respectively, compared with control group, but cholesterol levels in brain microsomes of these PNE groups howed almost no change compared with control group. Lipofuscin accumulations in brain membranes of 0.5%-PNE and 0.1%-PNE groups were sgnificantly inhibited in 18% and 21%, respectively, compared with control group. Brain memberance fluidity was also activated in 50% and 100% by the administration of 0.5%-PNE and 0.1%-PNE. higher acetylcholinesterase(15% and25%) and lower monoamine oxidase B (25% and 15%0 activities were effectively modulated by the administration of 0.5%-PNE and 0.1%-PNDE. These results suggest that more beneficial effects such as inhibition of cholesterol and lipofuscin, increase of membrane fluidity, higher acetylcholinesterase and lower monoamone oxidase activities in brain membranes of SD rats may be effectively modulated by administration of pine needle extract (PNE).

미세 조류의 항균성 탐색을 위해 베를린 공대 생물공학 연구실에서 좀 균주을 분양받아 독일 현지 연구실에서 연구를 행하였다. 6종의 미세 조류로부터 항균성 시험 시료응 획득하기위해 먼저 배양데 따른 미세 죠류 배양액의 변화를 pH와 균제량으로 관찰하였고, 이를 토대로 시험 시료를 대주중식기와 정기기 두 구간으로 나누어 채취하였다. 얻어진 시료를 균체와 균체 상층액으로 분리하여 각족 용매를 이용하여 분획을 행하여 4-7종의 획분들 얻었거 이들이 가지는 항균 활성을 시험하였다. BGA(blue green algae) 4종류 중에서 Lsp(lyngbya sp.)와 Tsp(Tetraselmis sp.)에서 항균활성이 관측되었는데, 특히 균체외 상층액의 dthyl acetate 추출 획분이 서균과 특히 곰팡이에 대해 강력한 항균 활성이 있는 것으로 확인되었고, 그뢰 2종의 BGA 와 2종의 규조류(diatoms)에서는 항균 활성 획분이 확인되지 않았다.

두 종류의 ADP-riboyltransferase(Yac-1과Yac-2)가 최근 mouse의 임파구로부터 cloning되어 그 특성이 규명되어졌다. Yac-1효소는 ADP-ribosyltransferase활성을 보여주나, 대조적으로, Yac-2는 상당한 양의 NAD glycohydrolase 활성도 소유하고` 있으며 이는 NDA를 우선적으로 가수분해 할 수 있다는 사실을 반영한다. Yac-2는 보존된 두 glutamate에 인접한 위치인 219번에 또 다른 glutamate를 소유하고 있다. 효소 활성에 대한 Glu-219의 효과를 알아보기 위해 두 단계의 재조합 중합효소 연쇄 반응 방법에 의해 Glu-219가 glutamate (E219Q)혹은 alanine(E219A)으로 치환되었다. Gln혹은 Ala으로의 치환결과, ADP-ribosyltransferase활성은 56% (E219Q)혹은 66% *E219A)로 감소하였다. Yac-2단백질의 NAD glycohydrolase 활성은 돌연변이에 의해 영향을 받지 않았다. 이러한 결과는 Yac-2효소의 Glu-219가 ADP-ribosyltransferase 활성에 중요한 역할을 하나, NDA glycohydrolase활성에는 관여하지 않음을 시사한다.

다양한 동물세포로부터 그 cDNA가 dlining된 glycosylphosphatidylinositol-linked ADP-ribosyltransferase는 공통적으로 carboxy말단에 풍부한 glutamic acid motif (EEEVLP)를 소유하고 있다. 유사한 motif가 mouse 임파구의 ADP-ribosyltransferase(Yac-2)에서 발견되어진다. Yac-2는 ADP-ribosyltransferase 활성 뿐 아니라 NDA glycohyrolase의 활성도 소유하고 있다. yac-2에 있어, Glutamic acid가 풍부한 motif의 역할을 알아보기 위해 site-directed mutagensis가 수행 되었다. 돌연변이체인 E22OQ, E22OA, E222Q, E222A는 ADP-ribosyltransferase에 대해 불활성을 보였다. 이러한 결과는 Yac-2의 220번과 222번의 glutamic acid가 ADP-ribosyltransferase와 NDA glycohydrolase 활성에 필수적임을 나타내는 것으로, 이는 carboxy말단의 glutamic acid들이 Yac-2 효소의 활성에 중요한 역할을 함을 시사하는 것이라 하겠다.

효모를 먹이로 하는 filter-feeder들의 소화력을 높이고자, algae의 대용물로서 가치가 있는 Kluyveromuces fragilis효모를 화학적 처리방법에 의해 세포벽을 바괴시켰다. 화학적 처리방법의 최적조건은 0.2 M Tris-buffer에 용해시켜 만든 1M 의 $Na_2EDTA$와 0.3 M의 2-mercaptoethanol을 처리한 후 $30{\circ}C$배양기에서 1시간 배양하는 조건에서 얻어졌다. 이때, 약 30%의 protoplast yeast를 실시함으로써, 그 생성률을 약 2배이상 올릴 수 있었다.

본 연구는 옥수수에서 분리한 미토콘드리아에서 NADH-dehydrogenase 유전자 (subunit 4)의 cDNA를 RT-PCR의 방법을 사용하여 조제 한 ㅜ 염기서열 수행한 경과 특이한 점을 감지 할 수 있었다. 일반적인 RNA cditing은 C에서 U로 또는 U에서 C로 치환되는 현장으로 옥수수의 NAD4유전자에서도 이러한 editing 형상이 일어나는 것을 발견하였다. 또는 T가 G로 그리고 G 가 A로 변화되는 특이한 부분들이 생성되는 것을 관찰하였다. 이러한 RNA ediring은 주로 exon 1과 exon 4 에 많이 일어나며, 염기 치환되는 부분들은 에서늬 NAD4유전자의 RNA edting site들과 일피하지 않은 점으로 미루어 보아 RNA editing 현상은 무작의로 생성된다고 본다.된다고 본다.

제주도 근해에서 다량 채취되고 있는 해양갈조류인 톳의 살아있지 않은 건조한 생물질을 Ca-alginate법(Ca-ALG), Ba-alginate법(Ba-ALG), polyethylene glycol법(PEG), $\kappa$-carrageenan법(CARR) 등으로 고정화시켜 고정화방법에 따른 Cu의 흡착기능을 검토하였다. 생물질의 첨가량이 증가함에 따라서 Cu의 제거율은 증가하였으나 흡착량은 감소하였다. 그러나 초기농도가 증가함에 따라서는 cu의 흡착량이 증가하였다. 고정화법에 따른 Cu의 흡착량은 Ca-ALG>Ba-ALG>PEG>CARR순으로 감소하엿다. 고정화된 생물질에 으한 Cu의 흡착은 Freundlich 흡착 등온식 보다는 Langmuir 흡착 등온식을 잘 따름을 알 수 있었다.

Metal ion-induced and it’s regulatory genes were screened in virulent salmonella typhimurium UK1 and tested cross-regulation with various stresses. Using the techniqud of P22-MudJ(Km, lacZ)-directed lacZ operon fusion, LF40 cuiA::MudJ and Lf153 cuiD::MudJ which were induced by copper were selected. cuia and cuiD were determined anaerobic coper inducible and copper tolerance response gene, respectively. Also cuiA and cuiD locus were determined at 81 and 8min, respectively, on salmonella Genetic Map. The two regulators were identified as cuaR, and cudR, which controls cuiA and cuiD, respectively. cuaR, and cudR appeared as negative regulators because the expression of cuiA-lac-Z and cuiD-lacZ were increased. Copper adapted UK1 showed high resistance to H$_{2}$O$_{2}$, but cuiD did not. The product of the cudR locus was responsible for decreasing the tolerance to copper and H$_{2}$O$_{2}$. Furthemore cuiA and cuiD locus were found to be part of a regulon under the control of a trans-acting regulators, rpoS, oxyR and relA. Therefore, the results suggest CTR participate with oxidative stress on Salmonella.

Molecular chaperone의 발견은 생명과학자들에게 살아있는 세포 내에서 어떻게 생체활성단백질이 만들어지고 유지되는지에 대한 자극과 함께 그것을 증명하기 위한 실험동기를 부여하였다. 초기에는 Molecular chaperone이 nucleosomes의 assembly에 관여하는 단백질을 설명하기 위하여 사용되었으나, 지금은 기본적인 세포생리기능의 하나인 단백질의 folding과 assembly를 돕는 assistant protein으로 주로 사용된다. 단백질합성 뿐만 아니라 단백질수송, oligomeric structure의 assembly와 disassembly, heat shock을 포함한 각종 내, 외부스트래스에 의해서 변성된 단백질의 세로내분화와 회복에도 Molecular chaperone이 관여하고 있다. 그러나 아직까지는 Molecular chaperone들의 3차구조와 그들간의 상호작용에 관한 정보가 부족하여 크게 진전되지 못하고 있지만, 많은 연구자에 의한 정보축적으로 인하여 빠른 시일 내에 Molecular chaperone에 세포내역할이 분명하게밝혀질 것이다.

Molecular chaperone의 발견은 생명과학자들에게 살아있는 세포 내에서 어떻게 생체활성단백질이 만들어지고 유지되는지에 대한 자극과 함께 그것을 증명하기 위한 실험동기를 부여하였다. 초기에는 Molecular chaperone이 nucleosomes의 assembly에 관여하는 단백질을 설명하기 위하여 사용되었으나, 지금은 기본적인 세포생리기능의 하나인 단백질의 folding과 assembly를 돕는 assistant protein으로 주로 사용된다. 단백질합성 뿐만 아니라 단백질수송, oligomeric structure의 assembly와 disassembly, heat shock을 포함한 각종 내, 외부스트래스에 의해서 변성된 단백질의 세로내분화와 회복에도 Molecular chaperone이 관여하고 있다. 그러나 아직까지는 Molecular chaperone들의 3차구조와 그들간의 상호작용에 관한 정보가 부족하여 크게 진전되지 못하고 있지만, 많은 연구자에 의한 정보축적으로 인하여 빠른 시일 내에 Molecular chaperone에 세포내역할이 분명하게밝혀질 것이다.