초록
PRA 검사는 치료 가능한 고혈압 질환 중 하나인 일차성 알도스테론증의 선별 진단에 이용되는 검사 중 하나이다. 혈장의 레닌은 체외에서 변형이 쉬운 물질이며 온도 변화에 민감한 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 검체의 보관온도와 해동온도에 차이를 두어 각각의 결과 차이를 비교 분석하고, PRA 검사의 정확한 결과 보고를 위한 치침의 마련과 재현성을 높일 수 있는 방안을 마련하고자 하였다. 본원에 의뢰된 PRA 검체 43건에 대하여 냉동보관 혈장 분리 자검체와 냉장보관 EDTA tube의 혈장을 재검사 실시하였다. 본검사를 기준으로 회귀분석과 bland-altman plot, 백분율을 비교하여 결과를 분석하였다. 또한, 해동온도에 따른 결과 비교를 위하여 PRA 검체 13건에 대하여 각각 실온해동과 냉장해동을 실시하였다. 실험을 마친 뒤, 다시 얼리고 2차 실온해동과 냉장해동을 실시하여 본검사를 기준으로 결과를 회귀분석하였다. 혈장 분리된 자검체 재검사를 시행한 결과는 y = 1.2048x + 1.046(R=0.8501, n=43)이며, 냉장보관 EDTA tube의 혈장으로 재검사한 결과는 y = 1.0594x + 0.1365 (R=0.9966, n=41)였다. Bland-altman plot에서 본실험과 차이에 대한 평균이 EDTA tube 혈장 재검사한 결과가 0.24, 냉동보관 자검체 재검사한 결과가 1.4로 냉장 보관 EDTA tube의 혈장이 높은 상관관계를 나타내었다. 해동온도에 차이를 두고 비교실험 한 결과, 1차 실온해동한 결과보다 2차 실온해동한 결과의 평균 백분율이 증가한 것으로 나타났다. 동일하게, 1차 냉장해동 결과보다 2차 냉장해동 결과의 평균 백분율이 증가하였다. 본 연구를 통해 PRA 검체의 보관 방법과 해동 온도에 따른 결과변화를 비교 분석한 결과, 냉장 보관된 원검체 EDTA tube 혈장의 재검사 결과가 더 높은 상관관계를 나타내었다. 또한, 해동 시 온도에 상관없이 혈장분리 자검체의 반복적인 얼림과 녹임이 PRA 결과에 영향을 미치는 것으로 나타났다. 따라서 PRA의 재검사 시에는 냉장 보관 중인 원검체 EDTA tube에서 혈장을 다시 채취하여 검사하는 것이 검사 결과의 오차를 줄이고 재현성을 높일 수 있을 것으로 사료된다.
Purpose Plasma renin activity (PRA) test is important for the diagnosis of primary aldosteronism. PRA is an easily deformed substance in vitro and affected by temperature changes. Laboratory of ASAN medical center has consistently found that there was a difference between the initial and re-experimental results. We compared and analyzed the differences in PRA test results according to the sample storage status. Materials and Methods The measurement of PRA was performed by using the radioimmunoassay. From August to September 2020, 43 PRA re-test samples were tested with different sample storage condition. The first group was re-examined by freezing the plasma-separated samples at -18℃, and the second group was re-examined with refrigerated EDTA sample. Also, additional tests were conducted on 13 PRA samples to verify the effect on thawing temperature differences in plasma-separated samples. The same samples were divided into two parts and stored frozen at -18℃, respectively, and thawing samples in room temperature and those in refrigerator were were conducted. Each result was compared and analyzed based on the initial experimental results. Results The results of re-examination after frozen storing plasma separation samples showed a lower correlation than the results of re-examination with EDTA plasma samples in refrigerator. When calculating the percentage based on the initial test results, the average percentage of each was 404.9% and 133.8%. The correlation coefficient was also R=0.8501 and R=0.9966, respectively, showing a higher correlation between plasma in the refrigerated sample EDTA tube. In comparison experiments with differences in thawing temperature, average percentage of the results of initial test and room temperature thawing was 94.3% and the average percentage of the results of refrigerated thawing was 88.0%. After again freezing the sample, the average percentage of the second room temperature thawing result is 107.5%, and the second refrigerated thawing group is 112.7%. Both groups showed an increase from first thawing. Conclusion A comparative analysis of retesting according to differences in sample storage methods in PRA tests showed a higher correlation between the results of retesting of the refrigerated EDTA plasma. And repeated freezing and melting of plasma separation samples, regardless of temperature during defrosting, has been shown to affect results. Therefore, retest of PRA should re-collect plasma from original EDTA plasma to increase reproducibility.