Evaluation of the LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR for the Diagnosis of Malaria

LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR의 말라리아 진단 유용성

Background: Malaria is a problematic disease in Korea, and microscopic examination of Giemsa-stained blood smear has been used as the gold standard for its diagnosis. However, this technique is time-consuming and has low sensitivity in samples with low numbers of malarial parasites (<20 parasites/μL). Here, we evaluated the performance characteristics of the LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR (LG life sciences, Korea). Methods: Blood samples from 173 persons who visited Korea University Ansan Hospital were evaluated. QPCR was performed in 73 malaria patients and 100 healthy subjects by using the LG Advansure Malaria P.f./P.v. real-time QPCR^R kit, and the results were compared with those of microscopy. The detection limit of this kit was determined by serial dilution of Plasmodium-infected blood with normal blood (blood not infected with Plasmodium). Results: Among the 73 patients that were microscopically confirmed to have malaria (Plasmodium vivax infection, N=70, P. falciparum infection, N=3), 69 patients were diagnosed with P. vivax infection and 3 were diagnosed with P. falciparum infection by LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. realtime QPCR. Both the tests indicated absence of infection in the 100 healthy subjects. The detection limit of LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR was 0.1 parasite/μL. Conclusions: LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCRis a very sensitive and specific technique and can be used as a confirmatory test for malaria.

배경: 말라리아는 국내에서 여전히 유행하고 있는 감염질환이다. 현재까지 말라리아의 진단에는 혈액도말검사의 검경법이 표준방법으로 되어 있으나 혈중 원충 농도가 낮을 경우에 예민도가 떨어지고 판독하기까지 많은 시간이 소요된다. 본 연구자들은 최근 개발된 LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR (LG 생명과학)의 수행능력을 평가하고자 한다. 방법: 고려대학교 안산병원에 내원한 173명의 검체를 사용하였다. 고전적인 검경법으로 말라리아로 진단받았던 73명의 환자와 100명의 건강인을 대상으로 하여 LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR를 시행하였고 그 결과를 비교하였다. 또한 말라리아 양성 혈액을 정상 혈액으로 10배로 배수 희석하여 검출 한계를 설정하였다. 결과: 총 73명의 환자 중 혈액도말 검사상 70명이 삼일열 말라리아로 진단받았으며 중합효소연쇄반응검사상 69명(98.6%)이 양성률을 보였다. 또한 혈액도말 검사상 열대열 원충이 발견되었던 3명(100%)의 경우 중합효소연쇄반응 검사상 모두 양성 결과였다. 본 중합효소연쇄반응 키트의 경우 μL당 0.1개의 원충까지 검출할 수 있는 높은 예민도를 보였다. 결론: LG Advansure^TM Malaria P.f./P.v. real-time QPCR 검사는 민감도와 특이도가 높았으며 원충의 농도가 매우 낮을 경우에도 검출할 수 있어 말라리아 감염의 진단에 유용할 것으로 생각한다.