Isolation of neohaplonts and application of spo11 marker to identify sporeless Pleurotus ostreatus

무포자느타리 선발을 위한 단핵화 균주의 분리 및 Spo11 마커의 이용

  • Shin, Pyung-Gyun (Mushroom Science Division, National Institute of Horticultural and Herbal Science) ;
  • Yoo, Young-Bok (Mushroom Science Division, National Institute of Horticultural and Herbal Science) ;
  • Oh, Se-Jong (National Agrobiodiversity Center, National Academy of Agricultural Science, RDA) ;
  • Park, Yun-Jung (Mushroom Science Division, National Institute of Horticultural and Herbal Science) ;
  • Kong, Won-Sik (Mushroom Science Division, National Institute of Horticultural and Herbal Science) ;
  • Jang, Kab-Yeul (Mushroom Science Division, National Institute of Horticultural and Herbal Science) ;
  • Lee, Keum-Hee (National Plant Quarantine Service, MIFAFF)
  • 신평균 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) ;
  • 유영복 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) ;
  • 오세종 (국립농업과학원 유전자원센터) ;
  • 박윤정 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) ;
  • 공원식 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) ;
  • 장갑열 (농촌진흥청 국립원예특작과학원 버섯과) ;
  • 이금희 (농수산식품부 국립식물검역원)
  • Received : 2010.12.13
  • Accepted : 2010.12.24
  • Published : 2010.12.31

Abstract

For the development of a sporeless strain of P. ostreatus we used sporeless strain ASI 2069. We have recovered both nuclear types of strain ASI 2069 as monokaryons of nh9, nh15, nh26 and nh36 (here after referred to as neohaplonts) by protoplasting the mycelium. Crosses between neohaplonts and SSI's(single spore isolates) obtained from a sporulating commercial strain ASI 2180. Five excellent strains are selected from 30 bred strains by quality of fruitbodies and spore number. To development of molecular markers linked to sporeless strain of P. ostreatus, we are screened helicase, recombinase(DMC1) and topoisomerase(Spo11) genes related meiosis by PCR and sequencing. Among three genes, Spo11 gene was identified into molecular marker of sporeless from neohaplonts and bred strains of P. ostreatus.

무포자형성 자연돌연변이 균주의 선발 및 특성검정 결과 ASI 2069 균주가 무포자이면서 수량성이 높으나 상품적 가치가 없어 원형질체 재생에 의한 단핵화로 Nh36 (neohaplont 36) 등 4균주를 분리하였다. 원형1호(ASI 2180) 및 무포자느타리간의 단핵교배 (Mon-Mon)를 시도한 결과 128교배조합수를 얻어 이 중 30균주를 특성 검정한 다음 자실체형성 및 포자비산량 조사에 의해 소포자형성 유망 13균주를 선발하였다. 무포자균주의 스크리닝법을 개발하기위해 포자형성 및 감수분열에 관여하는 helicase, DMC1(recombinase) 및 Spo11(topoisomerase II)유전자를 이용하여 PCR 증폭한 결과 단핵화균주 Nh36 및 교배체 2균주 중에서 Spo11유전자가 증폭되지않아 무포자 균주 스크리닝 방법으로 가능하리라 사료된다.

Keywords