Micropropagation of Calanthe discolor Lindl. through Induction of Multiple Shoots from Axillary Bud Culture

새우난초(Calanthe discolor Lindl.)의 액아배양으로부터 다신초 형성을 통한 대량증식

This study was conducted to establishment of in vitro micropropagation through induction of multiple shoots from axillary bud culture in Calanthe discolor Lindl. Shoots initiation from axillary bud was the most effective on half strength MS medium supplemented with $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ TDZ during four weeks of dark culture followed by culture under a 16-h photoperiod. Multiple shoots (12.5 shoots per explant) were proliferated on half strength MS medium containing $4.0mg{\cdot}L^{-1}$ TDZ and $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA. On the other hands, the abnormally emerged shoots during the multiple shoot proliferation stage were recovered to normal shoots on half strength MS hormone free medium. Multiple shoots were well elongated and rooted on half strength MS medium with $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ NAA. The plantlets were acclimatized up to 100% on TKS substrate after pretreating with $10mg{\cdot}L^{-1}$ NAA for 30 min. and these plantlets showed good growth as well.

새우난초의 액아로부터 다신초 형성을 통한 기내 대량 생산 체계를 확립하기 위하여 본 실험을 실시하였다. 액아로부터 신초 형성율은 1/2MS배지에 NAA $0.5mg{\cdot}L^{-1}$과 TDZ $2.0mg{\cdot}L^{-1}$를 첨가한 배지에 배양하여 4주간 암배양후 16시간 일장으로 배양하였을때 가장 높았다. 액아배양을 통해 얻어진 신초로부터 다신초 (multiple shoots) 증식에는 1/2MS 배지에 TDZ $4.0mg{\cdot}L^{-1}$와 IBA $2.0mg{\cdot}L^{-1}$를 첨가한 배지에서 신초형성수가 12.8개로 가장 양호하였다. 한편, 다신초 증식과정에서 비정상적인 신초가 형성되었으며 이들 비정상신초로부터 정상적인 신초로 회복은 생장조절제가 첨가되지 않은 1/2MS 배지에서 기장 효과적이었다. 다신초의 생장과 발근은 1/2MS 배지에 NAA $0.1mg{\cdot}L^{-1}$를 첨가한 배지에서 신초의 생장과 발근 모두 양호하였다. 발근된 새우난초 유묘는 NAA $10mg{\cdot}L^{-1}$용액에 30분간 침지 처리 후 TKS상토에 이식하였을 때 100% 순화하였으며 순화 후 전반적인 생육도 기장 양호하였다.