Abstract
We screened several materials to stimulate IGF-1 promoter activity using luciferase reporter assay and found that Amomi Semen extract (ASE) among them is the most powerful stimulator We also studied about the anti-wrinkle effect of ethanolic extract of Amoni Semen in vitro and in vivo. Semi-quantitative RT-PCR showed that the extract elevated the presence level of IGF-1 mRNA. And $[^3H]$ proline incorporation and semi-quantitative RT-PCR showed that the extract increased the expression of type-I collagen compared with vehicle in vitro and in vivo, respectively. Significant inhibition of MMP-1 expression was determined by ELISA and Western blot. Finally, topical treatment of the extract on hairless mouse's dorsal skin expanded the volume of collagen and dermal thickness. These results suggest that Amomi Semen may be a good candidate for improving extracellular matrix through the increase of collagen expression and inhibition of MMP-1 expression. Moreover, this study enables us to guess that IGF-1 stimulated by the extract may be involved in the mechanism of anti-wrinkle effect of it.
본 연구에서 프로모터-리포터 분석방법을 통해 인슐린 유사 성장인자-1의 프로모터를 자극하는 천연물을 선별한 결과 사인 추출물이 가장 좋은 프로모터 자극효과를 나타냈으며, 무모생쥐에서 패쇄첩포 후 RT-PCR로 실험한 결과 IGF-1 mRNA를 $35\%$ 증가시키는 것으로 나타났다. 사인 추출물의 피부 주름개선 효과를 알아보기 위하여 인체 섬유아세포에서는 type-I collagen과 MMP-1 합성 변화를 관찰하였으며, 무모생쥐에서는 콜라젠의 증가와 진피 두께를 관찰하였다. 그 결과, 동위원소를 이용한 콜라젠 증가실험에서 type-I collagen은 $38\%$ 증가하였으며 무모생쥐에서 실시한 RT-PCR 결과에서는 mRNA가 $21\%$ 증가하는 것으로 관찰되었다. MMP-1 효소발현의 경우 ELISA 분석을 통해서 $63\%$의 높은 발현저해능을 확인하였고 Western blot에서도 발현이 저해되는 것을 확인하였다 추출물을 무모생쥐에 패쇄첩포 하였을 경우 대조군에 비해 진피 두께가 두꺼워지고 콜라젠 양도 증가되는 것으로 조직염색 관찰을 통해 확인하였다. 이상의 결과를 통해 사인추출물은 피부 주름개선에 좋은 효과를 나타내는 것으로 보이며, 여기에는 인슐린 유사성장 인자-I의 발현증가와 관련된 기전이 관여하는 것으로 판단된다.
